刘海峰
- 作品数：28 被引量：42H指数：3
- 供职机构：牡丹江医学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗纤维化基因工程药物研究现状被引量：1
- 2016年
- 纤维化是导致器官功能慢性衰竭的主要原因,严重危害人类健康。目前临床上仍缺乏可有效逆转纤维化的药物。近年来,随着对纤维化发生机制认识的深入及分子生物技术的不断发展,基因工程药物在抗纤维化治疗中日益发挥重要作用。
- 韩瑞杰王小花张哲李桂芹刘海峰
- 关键词：抗纤维化
- 一种蛋白质及编码其的核苷酸序列
- 本申请公开了一种蛋白质及编码其的核苷酸序列。所述蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.1和/或如SEQ ID No.3所示；或者，所述蛋白质的氨基酸序列为如SEQ ID No.1或SEQ ID No.3所示的序列经过取...
- 刘海峰初彦辉王小花袁晓环
- 文献传递
- TGF-β1和TGF-βⅡ型受体酵母表达载体构建被引量：3
- 2017年
- 目的克隆人转化生长因子β1(TGF-β1)和4个受体基因片段,构建酵母表达载体,为应用酵母双杂交筛选与TGF-β1相互作用的TβRⅡ区域提供技术支持。方法提取人血液中RNA,逆转录转为c DNA,PCR扩增TGF-β1和4个受体(TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβRⅡ-C、TβRⅡ-D)基因片段,双酶切后,分别插入酵母双杂交表达载体p GBKT7和p GADT7;经过PCR扩增、双酶切和DNA测序鉴定后,构建质粒p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡ-C和p GADT7-TβRⅡ-D。结果成功扩增TGF-β1基因(1 200 bp)和TβRⅡ-A(453bp)、TβRⅡ-B(366 bp)、TβRⅡ-C(276 bp)和TβRⅡ-D(165 bp)基因片段,经PCR、双酶切和DNA测序鉴定插入到酵母双杂交载体序列正确。结论成功构建p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡC和p GADT7-TβRⅡ-D酵母双杂交表达载体。
- 左魁阳陈梦茜韩瑞杰王小花孟娜娜金秀东刘海峰
- 关键词：质粒构建酵母双杂交
- SUMO修饰IFNγ信号转导域偶联截短型TGF-β II型受体的融合蛋白可溶性表达条件优化
- 2023年
- 目的优化小分子泛素相关修饰物(SUMO)修饰IFNγ信号转导域偶联截短型TGF-βII型受体的融合蛋白SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达的条件。方法将已转化重组质粒pET28a/SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ的大肠杆菌Rosetta(DE3)在不同异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度(0.1、0.3、0.6和1 mmol/L IPTG)、不同诱导温度(37℃、16℃和20℃)和时间(6 h、16 h和20 h)条件下进行诱导,SDS-PAGE分析SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ的表达情况。结果在20℃、IPTG为0.6 mmol/L诱导20 h时,重组蛋白SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达量最高,约占上清中总蛋白的20.24%。结论获得SUMO-BiPPB-mIFNγ-tTRβⅡ可溶性表达最佳条件,为进一步制备生物活性的蛋白和后续功能研究奠定基础。
- 董溢馨王小花刘海峰
- 关键词：融合蛋白可溶性表达
- 组织贴壁法原代培养人皮肤瘢痕成纤维细胞被引量：3
- 2010年
- 目的:探索和建立可靠的人皮肤瘢痕成纤维细胞培养方法,为皮肤瘢痕体外研究提供平台。方法:采用组织块贴壁法进行瘢痕成纤维细胞的原代培养,使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃,CO2浓度为5%,饱和湿度下培养。结果:皮肤瘢痕原代成纤维细胞培养成功,18d～20d可传第一代,以后每7d～10d可传一代,细胞形态为长梭形。结论:培养出的人皮肤瘢痕成纤维细胞可用作体外实验研究。
- 郭冉刘洁婷刘海峰董凯初彦辉
- 关键词：皮肤瘢痕成纤维细胞原代培养
- 一种(2E,6E)-2,6-双亚苄基环己酮类似物及其制备方法与应用
- 本发明提供了一种（2E，6E）-2,6-双亚苄基环己酮类似物，包括具有通式Ⅲ所示结构的化合物及其药学上可接受的盐，该类化合物具有显著的药理活性。此外，本发明进一步提供了该类化合物的制备方法及作为1型11beta-羟基类固...
- 初彦辉葛仁山袁晓环赵冰海李洪志刘洁婷马洪闯尹昌浩付小兵刘海峰
- 文献传递
- 一种医用镁合金及其制备方法
- 本发明涉及医用镁合金技术领域，尤其涉及一种医用镁合金及其制备方法。镁金属虽然具有与天然骨相似的弹性模量、抗菌性能，但是其在生理环境中降解速度过快阻碍了其临床应用。基于上述问题，本发明提供一种医用镁合金，其成分中含有Mg、...
- 高质涵刘洁婷高铭泽初彦辉付高洁肖阳王国珅王新陈培剑刘海峰
- 一种负载有纳米囊泡的复合材料及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物制药技术领域，具体讲，涉及一种负载有纳米囊泡的复合材料及其制备方法和应用，复合材料包括载药系统和负载于载药系统上的纳米囊泡；载药系统为明胶微球，纳米囊泡为采用巨噬细胞膜包裹药物所形成的纳米囊泡。本发明的负载...
- 袁晓环李嘉丽袁琦武艳刘海峰刘洁婷李鲁新尹永奎柏合陈培剑
- 原发性肝癌患者外周血中TGF-β1 mRNA表达水平的检测及其临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨在原发性肝癌外周血TGF-β1 mRNA表达水平对肝癌发病的影响及其诊断和鉴别价值。方法采用RT-PCR方法检测72例原发性肝癌患者和70例正常对照者外周血中TGF-β1 mRNA的表达水平。结果肝癌患者组与健康对照组TGF-β1 mRNA水平差异显著(P<0.05),早期肝癌与中晚期肝癌TGF-β1 mRNA水平比较差异显著(P<0.05),肝细胞癌组与其他类型肝癌的TGF-β1 mRNA水平比较无显著差异。结论 TGF-β1 mRNA表达水平升高与原发性肝癌的发病相关,且随病程发展会逐渐升高。
- 武艳袁晓环张羽飞刘海峰包海花吴丹初彦辉
- 关键词：原发性肝癌外周血TGF-Β1MRNA
- 重组人转化生长因子β1原核表达及多克隆抗体制备
- 2012年
- 目的克隆人转化生长因子β1(TGF-β1)基因,原核表达TGF-β1蛋白,制备兔抗人TGF-β1多克隆抗体。方法应用RT-PCR技术扩增人TGF-β1基因序列,构建pET-28a-TGF-β1重组质粒。转化至E.coli BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。Western-blot检测目的蛋白的抗原性。免疫新西兰白兔,获得兔抗人TGF-β1多克隆抗血清。饱和硫酸铵盐析法纯化多克隆抗体,间接ELISA法检测多克隆抗体效价,Western-blot技术进行抗体特异性检测。结果获得了TGF-β1编码序列和表达载体,目的蛋白主要存在于超声破碎后的包涵体中;经Western-blot检测目的蛋白存在抗原性;获得纯化的兔抗人多克隆抗体效价达1∶10 000。结论获得的兔抗人TGF-β1多克隆抗体效价较高,具有良好的特异性。
- 郭冉刘洁婷吴丹刘海峰初彦辉
- 关键词：转化生长因子Β1抗纤维化原核表达多克隆抗体
