刘晓亮
- 作品数：13 被引量：103H指数：6
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划军队科研计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠毛囊细胞构建组织工程全层皮肤被引量：13
- 2005年
- 目的:以大鼠毛囊细胞为种子细胞培养组织工程皮肤。方法:分离培养新生SD大鼠毛囊外根鞘细胞和真皮鞘细胞,以这两种细胞为种子细胞构建全层组织工程全层皮肤。结果:成功构建了具有表皮层和真皮层的组织工程皮肤。结论:毛囊细胞可以用作种子细胞来构建组织工程全层皮肤。
- 刘晓亮金岩董蕊聂鑫
- 关键词：毛囊皮肤细胞
- 从人外毛根鞘细胞分离获取黑素母细胞被引量：2
- 2007年
- 目的:毛囊黑素细胞是皮肤黑素细胞的储库,含有黑素母细胞甚至黑素干细胞,具有更强的增殖潜力。观察人毛囊外毛根鞘细胞中黑素细胞的分布特征,尝试分离获取黑素母细胞。方法:实验于2003-04/2006-04在解放军第四军医大学组织工程实验中心和武警医学院附属医院皮肤科完成。消化游离流产胎儿头皮(产妇同意由医院处理流产胎儿)毛囊,用黑素细胞培养基接种,原代培养人外毛根鞘细胞,并观察外毛根鞘细胞和黑素细胞的分布。待原代外毛根鞘细胞融合时,加入胰酶消化,大约一半细胞漂浮时,加入含体积分数为0.10小牛血清的DMEM终止,轻柔吹打,弃去飘浮细胞。用DMEM清洗原瓶后加入黑素细胞培养基,继续培养,寻找黑素(母)细胞克隆。并采用胰酶消化法纯化培养黑素细胞。结果:在贴壁生长的毛根周围发现了外毛根鞘细胞团,以毛囊隆突部位为中心呈纺锤形排列。其中含有黑素细胞:临近毛囊漏斗部和毛球部的黑素细胞体积较大,有两个或者多个长一些的树突;隆突部位周围的黑素细胞体积偏小,树枝少而短。经纯化培养获得黑素(母)细胞集落,集落中心细胞呈短梭形,折光性很强,排列密集,增殖活跃;边缘细胞变大,树突延长;集落之间散在分布的黑素细胞体积更大,树突延长,数量增多至3个以上。结论:实验观察到人毛囊外毛根鞘细胞中有黑素细胞分布,并选择性培养获得黑素细胞克隆,分析克隆中心可能含有黑素母细胞。
- 卢涛金岩刘源雷娟刘晓亮
- 关键词：黑素细胞
- 人全层组织工程皮肤的研制被引量：57
- 2002年
- 目的 :用组织工程的方法培养人的全层复合皮肤。方法 :胎儿背部皮肤为取材对象 ,分离表皮细胞和成纤维细胞。将成纤维细胞种植入牛I型胶原凝胶中 ,培养 3d后 ,将表皮细胞接种在凝胶的表面 ,继续培养 2d ,然后将凝胶移至气液面进行复层化。 5d后取材 ,进行HE染色 ,光镜和透射电镜观察。结果 :皮肤具备表皮层和真皮层 ,其结构和正常皮肤的结构相似。表皮层中包括基底层、棘层、颗粒层和角质层 ,细胞和细胞之间以细胞间桥的形式连接 ,个别部位有角化珠的存在。表皮层和真皮层之间有完整的基底膜。部分真皮层中可以见到长短不等的上皮钉突。透射电镜结果表明 ,表皮层的各层细胞之间以桥粒连接。结论 :以胎儿皮肤为细胞来源、牛I型胶原为支架的全层组织工程皮肤 ,是一种良好的生物活性皮肤替代物 ,可用来修复全层皮肤缺损。
- 金岩吕红兵刘源赵宇聂鑫刘晓亮张勇杰
- 关键词：人工皮肤表皮层真皮层胶原
- 反义hTR对舌鳞癌细胞系Tca8113作用的初步探讨
- 2002年
- 目的 观察反义hTR对人舌鳞癌细胞系Tca8113的影响及其与细胞周期和凋亡的关系。方法 脂质体介导真核表达载体PBBS2 12 -hTR转染Tca8113细胞系 ,运用流式细胞仪技术观察细胞周期的改变和凋亡 ,并结合免疫组化和原位杂交技术分析转染前后某些基因表达的变化。结果 转染反义hTR的Tca8113细胞克隆生长减缓 ,群体倍增时间较未转染组和转染空质粒组明显延长 ,流式细胞仪显示转染细胞PI指数下降 ,有亚二倍体凋亡峰出现 ,转染后细胞 p2 1基因表达水平显著增高 ,裸鼠移植瘤实验显示转染后的Tca8113致瘤性减弱。 结论 反义hTR可引起细胞通过细胞周期关卡受阻而显著抑制Tca8113细胞的生长 ,同时激活了某些凋亡程序而导致细胞凋亡 。
- 陈琰董绍忠杨连甲刘晓亮李伟丽
- 关键词：反义HTR舌鳞癌端粒酶原位杂交
- 兔口腔黏膜固有层多能干细胞的分离培养被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨兔口腔黏膜固有层中是否含有间充质干细胞并对其进行分离培养。方法:利用间充质干细胞的粘附特性,对兔口腔黏膜固有层多能干细胞进行筛选分离。体外培养扩增后,以CD44、角蛋白抗体(Ck)、波形丝蛋白(Vim)抗体,免疫组化方法对细胞进行鉴定;并用MTT方法检测其增殖,流式细胞术检测其细胞周期。结果:所筛选培养的细胞可在体外呈克隆性生长,细胞表面表达CD44分子,而不表达Ck、Vim;细胞增殖活力旺盛;流式细胞检测结果显示95.1%的细胞处于G0/G1期,与未经筛选的对照组有明显差异。结论:本实验证实在兔口腔黏膜固有层中含有成体干细胞,这类细胞可在体外成功分离并进行扩增培养。口腔黏膜固有层可能是间充质干细胞的又一重要来源,为研究间充质干细胞和口腔黏膜的生物学特性提供基础。
- 董蕊金岩刘晓亮王新文雷娟赵宇
- 关键词：口腔黏膜多能干细胞细胞培养
- 体外分离培养大鼠毛囊真皮鞘细胞被引量：2
- 2005年
- 目的 :扩增培养纯化的大鼠毛囊真皮鞘细胞。方法 :以新生SD大鼠毛囊为原材料 ,机械法分离真皮鞘 ,胶原酶消化 ,获取毛囊真皮鞘细胞 ,体外培养 ,并免疫组化方法鉴定细胞。结果 :通过消化法成功培养了大鼠毛囊真皮鞘细胞 ,并扩增至第六代。结论 :本方法可以快速高效的获得大量真皮鞘细胞。
- 刘晓亮金岩董蕊聂鑫
- 关键词：真皮毛囊体外分离免疫组化方法消化法
- 肿瘤坏死因子α和白细胞介素2在大鼠皮肤移植中的作用被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF_α)和白细胞介素 2 (IL_2 )在同种异体大鼠皮肤移植后免疫排斥反应中的作用 ,研究组织工程皮肤的组织相容性。方法 取SD大鼠皮肤和实验室培养的组织工程SD大鼠皮肤移植于成年Wistar大鼠 ,移植成功后取不同时间点标本用免疫组织化学方法和Westernblot方法检测TNF_α和IL_2在组织中的表达。结果 同种异体皮肤移植组 ,TNF_α和IL_2有显著表达 ;组织工程皮肤移植后 ,局部组织中TNF_α和IL_2水平显著低于同种异体皮肤移植组。结论 TNF_α和IL_2水平的改变与同种异体皮肤移植后免疫排斥反应的发生密切相关 ,组织工程皮肤只具有很弱的免疫原性 ,不引起显著的排斥反应。
- 王军琳金岩刘晓亮
- 关键词：肿瘤坏死因子Α白细胞介素2皮肤移植
- 口腔鳞状细胞癌中RhoA的表达及作用被引量：7
- 2008年
- 目的探讨口腔鳞状细胞癌组织及其转移灶、癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜中RhoA的表达及其意义。方法采用免疫组化检测40例口腔鳞状细胞癌,RT-PCR技术分析口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织、口腔鳞状细胞癌转移灶、鳞状上皮增生和正常口腔黏膜组织中RhoA的表达情况。结果RhoA在非癌组织均不表达或弱表达,40例口腔鳞癌中25例表达RhoA,阳性率为62.50%;两者之间具有显著差异(P<0.05)。低分化鳞癌中RhoA的阳性率为66.67%,中、高分化鳞癌中RhoA的阳性率为60.71%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。16例有淋巴结转移的鳞癌组织中13例表达RhoA,阳性率为81.25%,24例无淋巴结转移的鳞癌组织中12例表达RhoA,阳性率为50%;两者之间有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR检测RhoA mRNA的表达水平,鳞癌组织中RhoA mRNA光密度相对值明显高于癌旁组织、增生鳞状上皮和正常口腔黏膜组织(P<0.01),低于转移灶(P<0.05)。结论RhoA的表达与鳞状细胞癌分化程度、转移程度有关,有望作为鳞状细胞癌预后和转移的参考指标。
- 周峻何勇金岩刘晓亮董绍忠
- 关键词：口腔鳞状细胞癌RHOA分化
- 三维立体培养中不同浓度的胶原凝胶对成纤维细胞生长的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 :研究在三维立体培养中不同浓度胶原对成纤维细胞生长状态的影响。方法 :分离 1～ 2dSD新生鼠背部皮肤的成纤维细胞 ,分别种入 6 4、5 3、4mg/ml的胶原中 ,光镜观察立体培养条件下成纤维细胞的生长状态和细胞数量 ,并进行统计分析。结果 :6 4mg/ml胶原中细胞的生长状态良好 ,细胞突起明显 ,和二维条件下的形态相似。 5 3mg/ml组中 ,部分细胞出现了空泡和颗粒 ,细胞的生长状态趋于不良。4mg/ml中细胞的大部分突起消失 ,细胞核固缩、溶解 ,部分细胞类似凋亡细胞。 结论 :6 4mg/ml浓度的胶原最适宜于成纤维细胞的生长。
- 吕红兵金岩刘源刘晓亮王容张勇杰赵宇
- 关键词：胶原成纤维细胞
- 热休克蛋白在口腔疾病中的作用被引量：3
- 2000年
- 刘晓亮金岩
- 关键词：热休克蛋白口腔自身免疫疾病肿瘤
