冯丹丹
- 作品数：6 被引量：21H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京佑安医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费中国初级卫生保健基金会佑安肝病/艾滋病基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 214例艾滋病死亡病例临床特征分析被引量：7
- 2018年
- 目的探讨艾滋病死亡病例的临床特征。方法回顾性分析首都医科大学附属北京佑安医院2007-2017年收治的214例艾滋病死亡病例。结果 2007-2017年艾滋病住院患者平均病死率为3.50%(214/6 119);男性196例,占91.59%;20～59岁者184例,占死亡人数的85.98%;病程0～6个月127例;同性传播者占44.39%,异性传播者占34.58%,经血液传播者占7.48%;直接死亡原因包括机会性感染(126例,58.88%)、非HIV相关疾病(65例,30.37%)、机会性肿瘤(18例,8.41%)等;接受高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy, HARRT)患者90例,占42.1%;患者抗病毒治疗基线CD4+T细胞数<50个/μl 53例。结论艾滋病患者病死率呈现下降趋势,非HIV相关疾病病死率有升高趋势,但机会性感染仍是主要死因,与患者就诊晚、接受抗病毒治疗率低下相关,早期抗病毒治疗有利于降低艾滋病病死率。
- 冯丹丹李爱新汪雯张彤
- 关键词：艾滋病死亡病例
- 长期抗病毒治疗后人类免疫缺陷病毒感染和艾滋病患者CD4^＋／CD8^＋比值的变化特点被引量：11
- 2018年
- 艾滋病自1981年被发现后，以迅猛的速度在人群中蔓延，严重威胁着人类的健康。抗反转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）的广泛应用使该病成为一种可以治疗的慢性传染病。
- 冯丹丹李爱新汪雯张彤
- 关键词：人类免疫缺陷病毒感染CD4^+/CD8^+比值艾滋病患者抗病毒治疗抗反转录病毒治疗
- 高表达CD81的Huh7细胞株对提高HCV病毒感染效率的研究被引量：1
- 2010年
- 目的建立具有高感染性的丙型肝炎病毒(HCV)的体外细胞株。方法构建高表达CD81的Huh7细胞株。将HCV质粒(JFH-1,2a)体外转录成RNA,电转染到Huh7和CD81-Huh7细胞中,实时定量PCR法检测两组细胞和培养上清液中病毒载量,间接免疫荧光法检测细胞中HCV核心蛋白表达。收集电转后细胞上清液重新感染两组细胞,检测细胞中病毒RNA表达。结果 CD81-Huh7电转后,细胞和上清液中病毒RNA水平均明显高于Huh71-2log。其被感染的效率也高于Huh7。结论成功建立一株能够高表达感染性HCV病毒颗粒的细胞株CD81-Huh7。
- 杨硕徐珩顾娜冯丹丹李宁李军锋童贻刚周育森娄金丽闾军
- 关键词：丙型肝炎病毒CD81HUH7细胞
- pCDNA3.1/NY-ESO-1真核表达质粒的构建及在肝癌细胞系HepG2中稳定高表达
- 2010年
- 目的建立癌-睾丸抗原NY-ESO-1稳定表达的HepG2肝癌细胞系。方法设计NY-ESO-1的引物,PCR法从NY-ESO-1阳性表达的睾丸癌组织中扩增出目的片段,克隆至T载体,双酶切后定向连入pCDNA3.1载体,构建pCD-NA3.1/NY-ESO-1真核表达质粒。经酶切、PCR、测序检测其构建的正确性,脂质体转染法将重组质粒转入HepG2细胞,G418药物筛选出稳定转染的细胞系,RT-PCR法、间接免疫荧光法分别检测稳定转染HepG2细胞中NY-ESO-1基因、蛋白的表达水平。结果构建的pCDNA3.1/NY-ESO-1质粒经酶切、测序等检验表明质粒构建成功,筛选获得稳定高表达NY-ESO-1的HepG2细胞。结论构建了pCDNA3.1/NY-ESO-1真核表达质粒及稳定高表达NY-ESO-1的HepG2细胞株,为下一步以NY-ESO-1为靶标进行肝癌的抗原特异性免疫治疗研究奠定了实验基础。
- 徐珩杨硕顾娜冯丹丹闾军汪思应
- 关键词：免疫疗法荧光免疫测定
- NY-ESO-1抗原T细胞受体基因慢病毒载体的构建及鉴定
- 2010年
- 目的构建NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(TCellReceptor,TCR)的慢病毒载体并获得重组慢病毒。方法设计特异性NY-ESO-1TCR的引物,用聚合酶链反应(PCR)对我们前期已克隆的NY-ESO-1TCRcDNA进行体外扩增,双酶切后定向插入到pCL20c-MSCV-GFP质粒,构建NY-ESO-1抗原特异性TCR基因的重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,并经酶切、PCR及测序鉴定。用pCL20c-MSCV-ESOTCR﹑pCL20c-HIV-gp、pCAG4-RTR2和CAG-VSV-G共转染T293包装细胞,获得上清,上清浓缩后感染Hela细胞,观察ESOTCR基因及蛋白水平的表达。结果经PCR及测序证实,成功构建重组慢病毒载体pCL20c-MSCV-ESOTCR,包装产毒后感染Hela细胞,RT-PCR法及荧光显微镜均能检测及观察到基因及蛋白水平的表达。结论成功构建了表达NY-ESO-1抗原T细胞受体基因(TCellReceptor,TCR)的重组慢病毒载体。
- 顾娜徐珩冯丹丹李宁闾军
- 关键词：慢病毒载体HELA细胞
- HCV感染通过Erk信号的激活上调PTTG1的表达被引量：2
- 2012年
- 为探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染导致肝细胞癌发生的分子机制,利用前期研究建立的体外HCV细胞培养体系,将HCVJFH-1RNA转染CD81-Huh7细胞,确定能够获得感染性HCV后,收集HCV转染后10,50,100和150d的细胞,采用RealtimePCR及WesternBlot法检测不同时间点细胞内垂体瘤转化基因1(PTTG1)基因和蛋白水平的表达情况,同时检测总MAPK/Erk1/2,磷酸化Erk1/2(p-Erk1/2)蛋白的表达。随后,用干扰素抑制HCV的感染,再检测PTTG1及MAPK/Erk1/2的表达情况,以及用MAPK/Erk抑制剂(PD98059)阻断MAPK/Erk1/2的磷酸化后,检测PTTG1的表达情况。结果显示,HCV转染的细胞与未转染细胞比较,PTTG1的mRNA和蛋白表达均显著增加,p-Erk1/2蛋白显著升高(P<0.05);抑制HCV感染显著降低PTTG1的表达和MAPK/Erk1/2的磷酸化(P<0.05);MAPK/Erk1/2抑制剂显著降低了PTTG1基因和蛋白的表达(P<0.05)。体外HCV感染可以导致MAPK/Erk信号通路的磷酸化,进一步导致原癌基因PTTG1的表达增加,这可能是慢性HCV感染导致HCV相关性肝细胞癌发生的分子机制之一。
- 冯丹丹杨硕李红霞顾娜闾军
- 关键词：HCV感染MAPK/ERK信号通路
