何玲鸽
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 雷公藤对THP--1细胞IL--37表达的影响
- 何玲鸽
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- IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建被引量：2
- 2013年
- 目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示RT-PCR扩增出1条大小约650 bp特异条带,DNA测序结果显示获取了大小为654 bp的IL-37b编码区基因。PCR和DNA测序对所构建的真核表达载体鉴定结果表明IL-37b编码区基因正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功克隆了IL-37b编码区基因,并成功构建其真核表达载体,为下一步IL-37b生物学作用的深入研究奠定了基础。
- 何玲鸽赵付前林妙芬祝惠钦王森陈章权
- 关键词：基因克隆真核表达载体
- 肿瘤坏死因子-α对人滑膜成纤维细胞白细胞介素-37表达的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人滑膜成纤维细胞(human fibroblast-like synovicyte,HFLS)白细胞介素-37(IL-37)表达的影响。方法:不同浓度TNF-α与HFLS作用,作用不同时间后,用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应,检测HFLS中IL-37mRNA的表达。结果:TNF-α上调HFLS的IL-37mRNA表达,并呈一定的时间、剂量依赖关系。结论:TNF-α诱导HFLS的IL-37上调表达,为进一步探索HFLSIL-37参与类风湿关节炎的炎症反应提供了实验依据。
- 柯庆喜张志伟赵付前何玲鸽陈章权
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α滑膜成纤维细胞
- 人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：5
- 2014年
- 目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。
- 赵付前何素辉何玲鸽林妙芬王森陈章权
- 关键词：抗体小鼠
