赵付前
- 作品数:4 被引量:13H指数:2
- 供职机构:广东医学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广东省大学生创新实验项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 鼠抗IL--37多克隆抗体的制备及热休克对IL--37表达的影响
- 赵付前
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- IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建被引量:2
- 2013年
- 目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示RT-PCR扩增出1条大小约650 bp特异条带,DNA测序结果显示获取了大小为654 bp的IL-37b编码区基因。PCR和DNA测序对所构建的真核表达载体鉴定结果表明IL-37b编码区基因正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功克隆了IL-37b编码区基因,并成功构建其真核表达载体,为下一步IL-37b生物学作用的深入研究奠定了基础。
- 何玲鸽赵付前林妙芬祝惠钦王森陈章权
- 关键词:基因克隆真核表达载体
- 肿瘤坏死因子-α对人滑膜成纤维细胞白细胞介素-37表达的影响被引量:8
- 2013年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人滑膜成纤维细胞(human fibroblast-like synovicyte,HFLS)白细胞介素-37(IL-37)表达的影响。方法:不同浓度TNF-α与HFLS作用,作用不同时间后,用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应,检测HFLS中IL-37mRNA的表达。结果:TNF-α上调HFLS的IL-37mRNA表达,并呈一定的时间、剂量依赖关系。结论:TNF-α诱导HFLS的IL-37上调表达,为进一步探索HFLSIL-37参与类风湿关节炎的炎症反应提供了实验依据。
- 柯庆喜张志伟赵付前何玲鸽陈章权
- 关键词:肿瘤坏死因子-Α滑膜成纤维细胞
- 人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量:5
- 2014年
- 目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。
- 赵付前何素辉何玲鸽林妙芬王森陈章权
- 关键词:抗体小鼠