陈章权 作品数:49 被引量:143 H指数:8 供职机构: 广东医科大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 广东省大学生创新实验项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
蛋白质组学在感染性疾病研究中的应用 被引量:1 2001年 陈章权 彭世清 陈守才关键词:蛋白质组学 感染性疾病 新型抗炎因子IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin转录表达的影响 被引量:4 2014年 目的:探讨IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin(E-cad)转录表达的影响。方法:将IL-37过表达载体转染肺癌A549细胞,采用Real time PCR检测IL-37及E-cadherin的mRNA表达,Western blot检测蛋白表达,CCK-8法检测A549细胞增殖。结果:在转录水平,IL-37组mRNA表达较NC组升高约200倍;在蛋白水平,NC组A549细胞中几乎未见IL-37蛋白表达,IL-37组则检测到明显的IL-37蛋白,显示IL-37重组质粒成功转染A549细胞。IL-37组与NC组相比,E-cad的mRNA水平升高约20%。在对A549细胞的增殖影响方面,与NC组相比,在24h,48h,72h,IL-37组细胞增殖抑制率约为15.6%,29.2%,28.1%。结论:新型抗炎因子IL-37可抑制A549细胞增殖并上调E-cad表达。 王森 郑晓璇 陈章权关键词:A549 IL-37基因启动子的克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建 被引量:3 2015年 [目的]克隆白介素-37(IL-37)基因启动子,构建其荧光素酶报告基因载体,并分析活性。[方法]用PCR方法扩增IL-37基因5'端上游区3个不同长度的启动子片段,分别克隆入荧光素酶报告基因载体p GL3,构建IL-37基因启动子荧光素酶报告基因质粒。将所构建的质粒转染HEK-293细胞,通过双荧光素酶报告基因系统分析启动子的转录活性。[结果]754、1 017、2 043 bp等3个IL-37启动子片段正确亚克隆入荧光素酶报告基因载体,重组质粒转染HEK-293细胞后,双荧光素酶活性分析显示1 017 bp的启动子片段具有较强转录活性,约为对照组(空载体p GL3-basic)的10.9倍。[结论]成功克隆IL-37基因启动子,构建了大小为1 017 bp的IL-37基因启动子荧光素酶报告基因载体,为IL-37表达的调控机制的研究提供有效的工具。 朱建冬 梁庄严 王森 侯为烨 邓小红 陈章权关键词:启动子 荧光素酶 报告基因 兔抗人肥大细胞羧肽酶抗体的制备与鉴定 被引量:10 2007年 目的:以原核表达的人肥大细胞羧肽酶(hMC-CP)免疫家兔,制备兔抗hMC-CP多克隆抗体并进行鉴定。方法:在大肠杆菌中诱导表达重组hMC-CP,经Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后,以其为免疫原制备兔抗hMC-CP多抗,并以间接ELISA测定抗体效价,以Western blot鉴定抗体的特异性。结果:成功地表达并纯化了hMC-CP,以纯化的重hMC-CP组免疫家兔成功制备了兔抗hMC-CP抗体,ELISA结果显示效价达1∶6 400,Western blot分析表明该抗体能特异结合hMC-CP。结论:以纯化的重组hMC-CP为免疫原,成功地制备了效价、特异性较强兔抗hMC-CP抗体,为进一步建立简便的hMC-CP检测方法及进一步研究hMC-CP生物学功能打下了良好的基础。 陈章权 何素辉 陆田田 何天文 何韶衡关键词:抗体 鼠抗人肥大细胞羧肽酶截短体抗体的制备与鉴定 2008年 目的建立检测人肥大细胞羧肽酶(hMCCP)的双抗体夹心ELISA法,以hMCCP截短体免疫小鼠,制备鼠源性多克隆抗体。方法PCR法扩增hMCCP-N118基因片段,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌Rosseta(DE3)。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化目的蛋白。用纯化重组蛋白免疫小鼠,制备抗hMCCP-N118抗体。间接ELISA测定抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性。结果hMCCP截短体在大肠杆菌中高效表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得了鼠抗hMCCP-N118抗体,效价达1∶6 400,该抗体能特异结合hMCCP。结论成功地制备了效价高、特异性好的鼠抗hMCCP截短体抗体。 陈章权 陆田田 黄震 梁晓东关键词:小鼠 自然杀伤T细胞配基的研究进展 被引量:3 2009年 自然杀伤T细胞(NKT)在抗感染、抗肿瘤及自身免疫病中起保护作用,NKT细胞配基对NKT细胞的激活起关键作用。近年来NKT细胞配基的分离、鉴定、结构与功能研究取得了较大进展,本文就已鉴定的内源性和外源性NKT细胞配基的结构及其生物学功能研究进展予以综述。 陆田田 黄震 陈章权关键词:CD1D 自然杀伤T细胞 配基 橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:2 2008年 [目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA和W estern blot对抗体效价和特异性进行鉴定。[结果]高效表达和纯化了橡胶延长因子重组蛋白,用其免疫家小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗体,W estern blot检测显示该抗体可识别胶乳中的天然橡胶延长因子。[结论]成功获得橡胶延长因子重组蛋白,制备了效价高、特异性好的鼠抗橡胶延长因子抗体,为进一步橡胶延长因子及其他橡胶粒子膜蛋白的生物学功能研究奠定了基础。 陈章权 吴坤鑫 梁晓东 黄震 陆田田关键词:基因 抗体 IL-37融合EGFP真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达 被引量:3 2015年 目的:构建白介素-37(interleukin-37,IL-37)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因真核表达载体,并检测其在293T细胞中的表达。方法 :通过PCR分别扩增出IL-37和EGFP基因,经酶切和测序鉴定正确后,克隆入真核表达载体pc DNA3.1,用Linker(G4S)3连接2个目的基因片段,构建IL-37-GFP融合基因真核表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP,将其转染到293T细胞中,观察荧光产生情况,用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测IL-37的表达情况。结果:经酶切和测序鉴定,由linker连接的IL-37-GFP融合基因正确克隆入表达载体pc DNA3.1,重组表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP转染293T细胞后,用荧光显微镜检测显示荧光蛋白在细胞中表达,RT-PCR与Western blot均检测到高水平IL-37 m RNA和IL-37蛋白的表达。结论:成功构建了IL-37-融合报告基因EGFP的真核表达载体,并在293T细胞中得到了有效表达,为进一步研究IL-37的功能和表达调控奠定了实验基础。 刘倩 梁庄严 何素辉 王森 陈章权关键词:绿色荧光蛋白 293T细胞 膀胱癌实验诊断进展 2008年 膀胱癌是常见的泌尿生殖系恶性肿瘤之一,膀胱镜检查和细胞学检查仍是目前膀胱癌诊断的主要技术,前者是有创检杏且检查费用较高.后者的敏感性低。因此,研究开发特异性强、敏感性高的膀胱癌无创诊断新技术对于膀胱癌的诊断及其复发监测是迫切需要的.现已发现多种具有重要诊断作用的膀胱癌肿瘤标志物,其中部分已用于膀胱癌的筛查。本文结合近年来有关膀胱癌实验诊断的新进展综述如下。 肖邦华 陈章权关键词:膀胱癌 细胞学检查 膀胱镜检查 肿瘤标志物 人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定 被引量:5 2014年 目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。 赵付前 何素辉 何玲鸽 林妙芬 王森 陈章权关键词:抗体 小鼠