何素辉
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广东医学院医学检验学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省大学生创新实验项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 兔抗人肥大细胞羧肽酶抗体的制备与鉴定被引量：10
- 2007年
- 目的:以原核表达的人肥大细胞羧肽酶(hMC-CP)免疫家兔,制备兔抗hMC-CP多克隆抗体并进行鉴定。方法:在大肠杆菌中诱导表达重组hMC-CP,经Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后,以其为免疫原制备兔抗hMC-CP多抗,并以间接ELISA测定抗体效价,以Western blot鉴定抗体的特异性。结果:成功地表达并纯化了hMC-CP,以纯化的重hMC-CP组免疫家兔成功制备了兔抗hMC-CP抗体,ELISA结果显示效价达1∶6 400,Western blot分析表明该抗体能特异结合hMC-CP。结论:以纯化的重组hMC-CP为免疫原,成功地制备了效价、特异性较强兔抗hMC-CP抗体,为进一步建立简便的hMC-CP检测方法及进一步研究hMC-CP生物学功能打下了良好的基础。
- 陈章权何素辉陆田田何天文何韶衡
- 关键词：抗体
- 抗人S100A7抗体的制备
- 2010年
- 目的制备兔抗人S100A7(hS100A7)多克隆抗体。方法制备原核表达重组人S100A7,用纯化的hs100A7为免疫原免疫新西兰大白兔,制备兔抗人S100A7抗体,并以间接ELISA测定抗体效价,以Western blot和免疫组织化学法鉴定抗体的特异性。结果成功制备了重组人S100A7及其抗体,ELISA结果显示抗体效价达1∶16000,Western blot和组织化学法分析表明该抗体能特异结合hS100A7。结论以纯化的重组人S100A7为免疫原,成功地制备了效价高、特异性强的兔抗人S100A7抗体。
- 梁晓东何素辉陈章权
- 关键词：S100A7抗体
- 类风湿关节炎患者外周血IL-37水平的检测与意义分析
- 目的:检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血IL-37表达水平,探讨其临床意义.
方法:用实时荧光定量PCR检测60例RA患者及30例正常人的外周血单个核细胞(PBHC)中...
- 柯庆喜何素辉陈章权
- 关键词：类风湿关节炎基因表达
- 文献传递
- 人肥大细胞类糜蛋白酶分泌型真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的构建人肥大细胞类糜蛋白酶(MC-Chy)分泌型真核表达载体。方法以MC-Chy基因的质粒pDEST17/CMA为模板,通过PCR扩增出融合有免疫球蛋白κ链信号肽的人MC-Chy基因,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1,通过PCR、酶切和DNA测序鉴定。结果 PCR扩增出免疫球蛋白κ链融合人MC-Chy基因,DNA序列测定结果显示目的基因片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功构建了人MC-Chy分泌型真核表达载体,为下一步重组类糜蛋白酶的制备及其功能的深入研究奠定了基础。
- 唐晓磊何素辉梁晓东陈章权
- 关键词：肥大细胞类糜蛋白酶真核表达
- 人IL-37在大肠杆菌表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：5
- 2014年
- 目的原核表达白细胞介素37(IL-37)及制备其多克隆抗体。方法 PCR扩增IL-37b成熟肽编码区基因,克隆至表达载体pET28a,转化大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化重组蛋白,以纯化的重组蛋白IL-37为免疫原免疫BALB/c小鼠制备其特异性抗体,用ELISA、Western blot法和免疫组织化学染色检测抗体的效价和特异性。结果原核表达了重组蛋白IL-37b成熟肽,并获得高效价的小鼠抗IL-37抗体,能特异性识别天然的IL-37抗原。结论成功制备效价高、特异性好的小鼠抗IL-37抗体。
- 赵付前何素辉何玲鸽林妙芬王森陈章权
- 关键词：抗体小鼠
- 多棘海星乙醇提取物对小鼠血清IL-4和IFN-γ水平的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究多棘海星乙醇提取物对小鼠血清IL-4和IFN-γ水平的影响。方法:将多棘海星粉碎后,用无水乙醇提取,通过硅胶柱层析进行组分分离。将各组分分别腹腔注射小鼠后,用ELISA法检测小鼠血清中IL-4与IFN-γ的水平。结果:多棘海星乙醇提取物通过硅胶柱层析分离后,获取8个组分。多棘海星乙醇提取物的组分III和VIII能刺激小鼠产生较高水平的IL-4和IFN-γ。结论:所分离的多棘海星乙醇提取物组分III和VIII刺激小鼠产生高水平的IL-4和IFN-γ,具有自然杀伤T(NKT)细胞激活剂的作用特征。提示多棘海星中可能含有能活化NKT细胞的活性物质。
- 何素辉唐晓磊邓亦峰陈章权
- 关键词：IL-4IFN-Γ小鼠
- IL-37融合EGFP真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的:构建白介素-37(interleukin-37,IL-37)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因真核表达载体,并检测其在293T细胞中的表达。方法 :通过PCR分别扩增出IL-37和EGFP基因,经酶切和测序鉴定正确后,克隆入真核表达载体pc DNA3.1,用Linker(G4S)3连接2个目的基因片段,构建IL-37-GFP融合基因真核表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP,将其转染到293T细胞中,观察荧光产生情况,用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测IL-37的表达情况。结果:经酶切和测序鉴定,由linker连接的IL-37-GFP融合基因正确克隆入表达载体pc DNA3.1,重组表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP转染293T细胞后,用荧光显微镜检测显示荧光蛋白在细胞中表达,RT-PCR与Western blot均检测到高水平IL-37 m RNA和IL-37蛋白的表达。结论:成功构建了IL-37-融合报告基因EGFP的真核表达载体,并在293T细胞中得到了有效表达,为进一步研究IL-37的功能和表达调控奠定了实验基础。
- 刘倩梁庄严何素辉王森陈章权
- 关键词：绿色荧光蛋白293T细胞
- UF-1000i尿沉渣仪临床标本检测性能的探讨被引量：2
- 2010年
- 目的探讨UF-1000i全自动分析仪临床检测性能、荧光相关指标及其临床应用价值。方法随机抽取部分本院住院患者尿液标本200例,所有标本均在1h内分别用尿干化学分析仪和UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测,再结合显微镜镜检。结果UF-1000i和尿沉渣镜检对RBC、管型、小圆上皮细胞的检出有显著性差异,对WBC、酵母菌、结晶检出无显著性差异;UF-1000i发生误认时,误认RBC的RBC-MFl为18.68±2.13ch,与真性RBC-MFl比较差别有显著性,RBC-Fl-DWSD也呈现出与RBC-MFl的一致变化。尿蛋白阳性,管型符合检出率为100%。结论尿液中有形成份种类多、复杂、形态差异大,仪器本身原理的局限性,患者服药、病情、病程,标本的采集、处理、送检等环节的影响,仪器应当结合干化学分析、显微镜检查,三者联合应用。
- 何素辉迟秀文黄震杨利桃
- 关键词：尿沉渣
- 人肥大细胞类糜蛋白酶的促血管生成作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人肥大细胞类糜蛋白酶(mast cell chymase,MC-Chy)的促进血管生成作用。方法将30只BALB/c小鼠随机分为6组,每组5只。4组实验组小鼠分别予腹股沟部皮下注射基质胶与MC-Chy质粒DNA50μg(Chy50组)、100μg(Chy100组)、150μg(Chy150组)、200μg(Chy200组)的混合物;抑制剂组小鼠给予MC-Chy质粒DNA150μg与基质胶的混合物腹股沟部皮下注射,然后每天注射类糜蛋白酶抑制剂chymostatin10μg至皮下的基质胶栓;对照组小鼠行腹股沟部皮下注射生理盐水及基质胶混合物。注射后第7天,以同样剂量的质粒DNA注射至各实验组小鼠皮下的基质胶栓,于第12天处死小鼠,取出胶栓,测定MC-Chy活性及血红蛋白浓度,并进行免疫组化学染色、HE染色,测量血管密度计数。结果 Chy50组(7.5±1.4)、Chy100组(21.7±2.7)、Chy150组(28.4±2.1)、Chy200组(25.8±2.0)血红蛋白浓度与对照组(2.9±0.7)比较差异均显著(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。Chy50组(9.3±2.7)、Chy100组(12.2±4.0)、Chy150组(15.4±3.1)、Chy200组(13.5±3.6)血管密度与对照组(5.9±2.7)比较,均存在显著性差异(均P<0.01)。HE染色可见到血管,免疫组化染色可见到棕黄色阳性颗粒及血管腔。结论人MC-Chy具有促进血管生成的作用。
- 张志伟侯玉涛何素辉邝珠芳陈章权
- 关键词：肥大细胞类糜蛋白酶血管生成
- 南中国多棘海星乙醇提取物体外抗肿瘤活性作用的初步研究被引量：1
- 2011年
- 目的研究多棘海星乙醇提取物对人肿瘤细胞体外生长的影响,为进一步筛选抗肿瘤活性成分提供重要的科学依据。方法用硅胶柱层析法对多棘海星乙醇提取物进行组分分离,采用MTT法观察各个组分对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231、人宫颈癌Hela细胞、鼻咽癌CNE-1细胞等肿瘤细胞株增殖的抑制作用。结果通过硅胶柱层析从多棘海星乙醇提取物中分离得到8个主要组分(Ⅰ～Ⅷ)。MTT结果显示多棘海星乙醇提取物中的4个组分对肿瘤细胞增殖具有抑制作用,其中组分Ⅳ和Ⅷ对MDA-MB-231、Hela和CNE-1细胞的增殖具有非常显著的抑制作用(P<0.01),组分Ⅴ对Hela细胞增殖具有一定的抑制作用(P<0.05),组分Ⅶ则对Hela细胞的增殖具有抑制作用(P<0.01),而组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅵ则对上述3种细胞增殖均无抑制作用(P>0.05)。结论多棘海星乙醇提取物对肿瘤细胞的增殖具有抑制作用,但不同组分对不同的肿瘤细胞株的增殖表现出不同的抑制作用,组分Ⅳ和Ⅷ可能是其主要的抗肿瘤活性成分存在部位。
- 何素辉唐晓磊侯玉涛邓亦峰陈章权
- 关键词：海星乙醇提取物抗肿瘤
