代小虎 作品数:12 被引量:9 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 云南省科技计划项目 协和青年科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 化学工程 更多>>
IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法 本发明提供一种IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法,选择猪龄为3-5个月、体重为10-20kg的属于华南型猪种的云南版纳小耳猪,随机分组,分别进行第一次无针皮内注射IPV疫苗免疫,免疫后30天采血,分离血清,再分... 廖国阳 孙明波 马磊 寸怡娜 蔡玮 周健 杨卉娟 刘婧 张新文 戴忠祥 代小虎 胡文柱 姜述德文献传递 核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量 被引量:3 2014年 目的 建立核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法测定b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法。方法 利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(1H-NMR)的定量功能,对不同浓度的D-核糖进行定量分析,验证该方法的精密度及准确度,并与传统化学方法进行比较。结果NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1.0%,相对误差除最低浓度20 mmol/L为7.4%外,其余浓度均在1%-3%之间,不同浓度的样品回收率在97.2%-107%之间;化学法定量结果RSD在0.6%-7.9%之间,相对误差在3%-6.5%之间,不同浓度样品回收率在93.5%-105.3%之间;两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别,均在《中国药典》三部(2010版)规定的320~410 mg/g之间。结论1H-NMR定量方法取样少,可直接定量,该方法精密度高、准确度高、重现性好,且不破坏多糖结构,可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量。 普元倩 朱文勇 寸怡娜 代小虎 张新文 钟汉斌 宋绍辉 吴亚楠 赵娜娜 王明清 廖国阳 李卫东b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的质量标准研究 2020年 目的验证苯酚法检测b型流感嗜血杆菌荚膜多糖提取新工艺中Triton X-114残留含量的可行性,并建立Triton X-114在Hib荚膜多糖中残留含量的质量标准。方法参考2015版《中国药典》三部中检测Triton X-100及相关文献中的苯酚法,对其线性范围、准确性、精密性进行验证,对多批次荚膜多糖的残留含量及对应的安全性结果进行统计归纳。结果苯酚法可以应用于b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留量检测,其线性范围、准确性及精密性较好,经15批次荚膜多糖中数据统计,b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中Triton X-114的残留含量标准建议定为<25.00mg/g荚膜多糖。结论苯酚法可以有效检测Triton X-114在b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的残留含量,本研究所制定质量标准可以保证产品的安全性。 朱文勇 欧阳圣洁 代小虎 宋绍辉 寸怡娜 陈枫 廖国阳关键词:B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备工艺 本发明涉及一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备工艺,属于革兰氏阴性细菌荚膜多糖技术领域。本发明方法将发酵液仅需通过离心、浓缩、除杂、超滤4步,并且无需柱层析即可得到b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的精糖溶液。该制备工艺避免了苯酚、... 廖国阳 朱文勇 欧阳圣洁 宋绍辉 代小虎 李卫东 马磊 高菁霞 寸怡娜 钟汉斌 胡文著 陈枫 李双丽 非成瑞 李宗霖 张冰洁 贺凌煜文献传递 一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备方法 本发明公开一种b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的制备方法,通过溶解、除杂、精提、浓缩,得到b型流感嗜血杆菌荚膜多糖的精糖溶液。该制备工艺安全有效,对人体及环境无害。本发明制备的b型流感嗜血杆菌荚膜多糖精糖溶液中精糖的各项指标均符... 廖国阳 朱文勇 寸怡娜 李卫东 马磊 钟汉斌 代小虎 欧阳圣洁 王明清 管娇琼 胡文著 宋绍辉 蔡玮 高菁霞 张新文 戴宗祥 姜述德利用Tween 80去除b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中杂蛋白方法的优化 被引量:3 2017年 通过单因素试验和Box-Behnken实验设计考察在蛋白去除过程中b型流感嗜血杆菌荚膜多糖浓度、Tween 80及(NH_4)_2SO_4含量对多糖回收率及蛋白残留含量的影响,建立回归模型.预测荚膜多糖质量浓度8.54mg/mL、Tween 80质量分数12.9%、(NH_4)_2SO_4质量分数28.12%为该方法的最佳参数组合,并通过实验进行验证其符合度分别达到93.9%和90.3%,符合度较高.研究通过实验设计(design of experiments,DOE)试验建立并优化了Hib荚膜多糖中杂蛋白的新方法,能够应用于实际的生产工艺中. 魏茂琪 管娇琼 王明清 朱文勇 钟汉斌 宋绍辉 欧阳圣洁 代小虎 廖国阳关键词:B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 蛋白 SARS-CoV-2S蛋白mRNA疫苗对不同毒株交叉中和活性的研究 2024年 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在感染和持续性进化过程中不断发生变异,导致现有疫苗的有效性降低,因此人类迫切需要能够建立广谱免疫保护的有效疫苗.作者采用mRNA疫苗技术,设计了原型(Prototype)株刺突(Spike,S)蛋白mRNA疫苗(P0).在S蛋白基因序列中引入氨基酸突变位点,制备了Prototype-mut mRNA疫苗P1~P7,并对小鼠进行了免疫.结果表明,引入Q498R-Y505H-H655Y和Q498R-N501Y突变位点的S蛋白mRNA疫苗可以显著提升对Delta株的中和抗体(neutralizing antibody,NAb)滴度(P<0.05).引入Q493R-Q498R-H655Y和Q498R-N501Y突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta、Omicron BA.1等多个毒株的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为1∶194.0、1∶73.5、1∶32.0、1∶194.0、1∶16.0和1∶294.1、1∶294.1、1∶64.0、1∶256.0、1∶8.0.同时,引入Q493R-Q498R-H655Y、Q498R-Y505H和Q498R-Y505H-H655Y等突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta 4种毒株的中和抗体阳转率可达到100%.通过在S蛋白mRNA疫苗中引入点突变的策略,验证了可能具有免疫逃逸或改变受体结合亲和力潜力的氨基酸突变位点的引入对mRNA疫苗交叉中和活性的影响,这为提升mRNA疫苗广谱性的研发提供了参考. 童菲 赵蕊蕊 张润芳 张凤莲 刘懿萱 乔秋榕 刘婧 钏鸿云 徐丽兰 沈霏 代小虎 马雪峰 宋绍辉 解云 洪超 吴雅楠 周健 廖国阳关键词:新型冠状病毒 IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法 本发明提供一种IPV皮内免疫有效性评价用动物模型的建立方法,选择猪龄为3-5个月、体重为10-20kg的属于华南型猪种的云南版纳小耳猪,随机分组,分别进行第一次无针皮内注射IPV疫苗免疫,免疫后30天采血,分离血清,再分... 廖国阳 孙明波 马磊 寸怡娜 蔡玮 周健 杨卉娟 刘婧 张新文 戴忠祥 代小虎 胡文柱 姜述德文献传递 通过CDAP活化多糖制备b型流感嗜血杆菌荚膜多糖-D蛋白疫苗初探 被引量:3 2014年 目的用CDAP活化b型流感嗜血杆菌(Hib)荚膜多糖,制备b型流感嗜血杆菌荚膜多糖及D蛋白疫苗。方法采用CDAP法在不同p H值条件下活化Hib荚膜多糖,再通过乙二酰肼(ADH)与D蛋白共价结合,制备Hib荚膜多糖与其D蛋白结合物原液,并对三批结合物原液的各项指标进行检测。获得的结合物原液免疫BALB/c小鼠,应用ELISA法检测血清中的Ig G抗体水平,评价其免疫原性。结果三批结合物原液以上检测指标均符合药典要求,衍生物中ADH含量对结合物的免疫原性有重要影响。结论用CDAP活化工艺制备的Hib荚膜多糖-D蛋白结合物适宜制备结合疫苗,为以D蛋白为载体的Hib结合疫苗的制备及五价联苗的研制奠定实验基础。 吴雅楠 王明清 朱文勇 代小虎 宋少辉 廖国阳 李卫东关键词:B型流感嗜血杆菌 荚膜多糖 结合疫苗 一种Vero细胞培养流感病毒的纯化方法 本发明涉及一种Vero细胞培养流感病毒的纯化方法,属于病毒液纯化技术领域。该方法将病毒收获液澄清后超滤浓缩;对所获浓缩液采用含Capto Core 700填料的层析柱进行一级纯化,然后再采用含Capto Q填料的层析柱进... 廖国阳 周健 李卫东 马磊 寸怡娜 高菁霞 朱文勇 刘泽 吴雅楠 徐丽兰 赵蕊蕊 刘婧 宋绍辉 钏鸿云 欧阳圣洁 代小虎 戴永娟文献传递