李卫东
- 作品数：113 被引量：302H指数：9
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金国家高技术研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 低血清培养Vero细胞和流感病毒条件的优化被引量：11
- 2009年
- 目的优化低血清培养Vero细胞和流感病毒的条件,为开发Vero细胞流感疫苗奠定基础。方法分别在DMEM/F12和SLM-199培养基中,添加不同浓度的血清,培养Vero细胞,观察细胞连续传代的生长状态;接种流感病毒后,检测病毒培养液不同pH值、不同浓度TPCK-胰酶和病毒不同接种量对病毒血凝效价的影响。结果用SLM-199在1.0%血清浓度下培养的Vero细胞接种流感病毒血凝效价较高,病毒培养液pH值为7.2,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,接种病毒MOI为1.0时,72h收获的病毒血凝效价最高。结论已筛选出低血清培养Vero细胞和流感病毒的适宜条件。
- 刘铮孙明波高菁霞马磊林小瑞燕景恩张勇吴忠香刘雅灵姚忠萍廖国阳李卫东
- 关键词：流感病毒VERO细胞
- 快速、灵敏检测甲肝减毒活疫苗病毒感染性滴度的方法
- 本发明提供一种快速、灵敏检测甲肝减毒活疫苗病毒感染性滴度的方法，它通过检测甲肝病毒复制时出现的标志物负链RNA中间体来确定病毒的存在，突破了现有逆转录聚合酶链式反应不能区分感染性甲肝病毒和失活病毒的局限，同时克服了细胞培...
- 孙明波蒋燕军廖国阳李卫东周健姜述德
- 文献传递
- 散发食管癌组织3,9号染色体部分位点杂合性丢失和频发的微卫星DNA不稳定被引量：3
- 1996年
- 采用10对来自3,9号染色体不同位点的引物,以微卫星DNA长度多态性-PCR-银染法检测36对散发食管癌标本该位点处的杂合性丢失和微卫星DNA不稳定。结果发现在9p22～23,3p23,3p14.2,3p21.3和3q21～22等处有较高频率的杂合性丢失,提示这些位点附近有可能存在抑癌基因。同时,在某些位点发现了较高程度的微卫星序列不稳定,这说明广泛的微卫星序列不稳定不仅存在于家族性肿瘤,而且存在于散发食管癌病例中。
- 李卫东王亮王秀琴张春林毛学正吴旻
- 关键词：杂合性丢失食管癌染色体抑癌基因癌基因
- 疫苗生产车间消毒剂效力及保存效期评价的研究被引量：2
- 2018年
- 目的:确认疫苗生产车间常用消毒剂的消毒作用时间和保存效期,为消毒剂的使用及管理提供依据和理论参考。对疫苗生产车间日常使用的消毒剂进行消毒效力测定和保存效期测定。方法:分析目前疫苗生产车间常用的消毒剂,选用金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉作为挑战菌,根据消毒剂成份设计中和剂配方,对中和剂效力进行确定后,使用定量悬浮法和平板菌落计数法对消毒剂效力进行检测。结果:对平板菌落数计数,对照组菌落数的对数减去实验组菌落数的对数,其杀灭对数均大于3,确认消毒剂的消毒作用时间、效力及其保存效期。结论:使用中和剂和定量悬浮法可有效的测定消毒剂的消毒效力,对各种消毒剂的消毒作用时间和保存效期进行确定。
- 高承刚丁丽莎何云龙王亚芳李卫东陈洪波
- 关键词：消毒剂中和剂效力有效期
- 脆性组氨酸三联体基因与食管癌遗传易感性的关系初探被引量：11
- 1998年
- 目的检测７３对食管癌标本中脆性组氨酸三联体（ｆｒａｇｉｌｅｈｉｓｔｉｄｉｎｅｔｒｉａｄｇｅｎｅ，ＦＨＩＴ）基因相关的多态性位点的杂合性丢失。方法以ＲＴＰＣＲ和ＤＮＡ序列分析，检测１４例食管癌标本及２个食管癌细胞系中ＦＨＩＴ基因５′ＵＴＲ及编码区的缺失情况。结果３ｐ１４．２的Ｄ３１４８０、Ｄ３Ｓ１４８１、Ｄ３Ｓ１２３４位点有较高频率的杂合性丢失。在１４例标本中，有９例发现ＦＨＩＴｃＤＮＡ的全部或部分丢失，其中７例存在外显子１～４的丢失，５例有外显子５～９（编码区）的丢失。在食管癌细胞系ＥＣ８７３３中发现了ＦＨＩＴ全基因的丢失。结论ＦＨＩＴ基因的改变在食管癌的发生中是一种常见的遗传现象，但其是否就是食管癌的易感基因还需进一步探讨。
- 李卫东王秀琴程贵余郭慧琴王兴元李伟张春林张睿吴
- 关键词：食管肿瘤遗传学基因缺失
- 狂犬病毒aG株糖蛋白在CHO细胞中的表达被引量：5
- 2005年
- 目的克隆狂犬病毒aG株糖蛋白(Glycoprotein)基因,构建重组真核表达载体,在CHO细胞中表达aG株糖蛋白。方法采用RTPCR,从狂犬病毒aG株基因组RNA中扩增GP基因,并将该基因克隆至真核表达载体pCIdhfr上,以脂质体介导法转染CHOdhfr-细胞。用MTX筛选的抗性克隆经ELISA、免疫荧光及Westernblot检测GP蛋白的表达。结果克隆到狂犬病毒aG株糖蛋白全长基因,并在CHO细胞中进行表达。结论成功地在CHO细胞中表达了狂犬病毒aG株的糖蛋白,为进一步开发狂犬病毒基因工程疫苗打下基础。
- 钱源孙明波张鸣杨卉娟蒋燕军姜述德廖国阳李卫东
- 关键词：CHO细胞狂犬病毒糖蛋白AGWESTERN-BLOT全长基因
- 乙型流感病毒Vero细胞高产适应株传代稳定性研究被引量：5
- 2019年
- 由于能快速、大规模生产以应对随时可能暴发的流感,细胞流感疫苗已成为当今流感疫苗的主要研发方向,而选育流感病毒Vero细胞高产适应株对于细胞流感疫苗的研发至关重要。本文旨在研究流感病毒Vero细胞高产适应株BX-51BVa(By)在Vero细胞上的传代稳定性,以证明该毒株是否可以作为制备Vero细胞流感疫苗的种子批。以Vero细胞高产株BX-51BVa(By)在Vero细胞上连续传代50次,测定其血凝效价和感染性滴度,并通过型别鉴定及基因序列测定考察传代过程中生物学性状的稳定性。结果显示BX-51BVa在Vero细胞连续传代50次,血凝效价维持在256～512,感染性滴度稳定在1×107TCID50/mL左右,型别未发生改变,HA和NA氨基酸序列与流行株BX-51B相比没有发生变化。本研究发现B型流感病毒重配株能够稳定地在Vero细胞连续传代,可以作为制备Vero细胞流感疫苗的种子批。
- 寸怡娜宋绍辉周健刘泽郭琦高菁霞马磊李卫东廖国阳
- 关键词：VERO细胞B型流感病毒种子批
- MF59佐剂的研究进展被引量：9
- 2016年
- MF59佐剂的研究始于20世纪80年代末期。在当时重组DNA背景下,许多新的蛋白质抗原都可以用于疫苗制备。Chiron疫苗公司研制的HBV重组疫苗的成功尤其推动了这种微生物加铝佐剂的疫苗模式[1]。但HBV是1种特殊的,可以自发形成高免疫原性病毒样颗粒的抗原,而其他大多数重组抗原均是可溶解的单体,并且在和铝佐剂结合后只有很弱的免疫原性。这些抗原需要比铝佐剂效力更强的佐剂来获得保护性的免疫力,如弗氏佐剂。因此,
- 李卓凡李卫东
- 关键词：佐剂
- 一种不停机连续自动清通的污水过滤装置
- 本发明适用于污水处理技术领域，提供了一种不停机连续自动清通的污水过滤装置，包括注水部分和过滤部分。本发明提供的不停机连续自动清通的污水过滤装置，通过注水口注入到注水罐内的污水会推动注水隔板移动，使得第一转辊产生转动，第一...
- 杨磊申峰樊海涛杨素萍李卫东太祥飞王峰郭佩超李剑锋郑力何顺权李杨杜有径杨超然朱毅李亚冬吴志超沈凯储艳宁贺建伟李周成阮永刚邓智勇赵国伟杨红斌叶敏
- 流感疫苗单向免疫扩散试验中抗血清制备新方法的研究被引量：1
- 2011年
- 流感疫苗血凝素含量检测方法为单向免疫扩散试验,其抗血清通常由WHO参比实验室提供,通过纯化病毒、蛋白酶切获得血凝素主要抗原片段,然后再免疫动物获得抗血清。该方法制备时间较长,是制约流感疫苗研发及检测的主要因素。以RT-PCR方法获取甲型H1N1流感病毒血凝素中主要抗原片段基因,构建重组质粒并在大肠杆菌中表达,表达产物经纯化、复性后,以蛋白电泳及免疫印迹方法进行了鉴定。以纯化蛋白免疫家兔,制备了相应的抗体,初步证明可用于常规的单向免疫扩散试验。以该法可以快速获得抗血清,尤其是在大流行流感疫苗的研发中,加快疫苗研发进程。
- 顾琴李娟徐康维邵铭廖国阳李卫东李长贵
- 关键词：流感病毒血凝素
