黄春田
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后自噬水平的变化被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化前后自噬水平的变化,进一步研究BMSCs神经分化机制。方法:原代培养大鼠BMSCs,三代后用L-DMEM(2%DMSO+200μmol/L BHA)诱导其向神经细胞分化,采用免疫细胞化学方法检测神经元特异标记物NSE表达,采用RT-PCR方法检测自噬相关基因LC3B、Beclin1、Atg5、Atg7、Atg10的表达,用Western blot及流式细胞术检测了自噬标志蛋白LC3B的表达。结果:大鼠BMSCs传3代后,贴壁的BMSCs可达90%以上,类成纤维细胞样梭形生长,经诱导剂作用5 h后,细胞呈现神经细胞样改变,NSE阳性率为(83±5)%。RT-PCR结果表明BMSCs向神经细胞分化后LC3B,Beclin1,Atg5,Atg7,Atg10的表达升高,流式细胞术检测LC3B的平均荧光强度升高,Western blot结果表明神经分化后LC3B-Ⅱ表达增加。结论:大鼠BMSCs向神经细胞分化后自噬水平增加。
- 李博黄春田李彩芳段萍韩雪飞鄢文海邢莹
- 关键词：骨髓间充质干细胞自噬分化神经细胞
- CDK15磷酸化PAK4促进结直肠癌发生发展的作用及机制研究
- 背景和目的： 结直肠癌是全球高发的肿瘤，在所有肿瘤中结直肠癌的发病率与死亡率分别位于第三位以及第二位。近年来，我国结直肠癌的发病率与病死率呈明显上升的趋势，尤其在年龄小于50岁的人群中发展迅猛。研究表明，结直肠癌(Co...
- 黄春田
- 关键词：结直肠癌蛋白表达临床病理
- 慢病毒Tet-On系统调控Notch1-EGFP融合蛋白在PC12细胞中表达的研究被引量：5
- 2013年
- 目的:构建Te-t On系统调控的人源性Notch1胞内段(NICD)和EGFP融合蛋白的慢病毒真核表达载体,并探讨Notch1-EGFP在PC12细胞中的表达条件。方法:采用RT-PCR从人胎盘组织中获得NICD的cDNA,利用PCR扩增pEGFP-C1质粒中EGFP的编码序列,两者均定向克隆到pcDNA3.1(+)质粒中组成Notch1-EGFP片段,将该片段进一步酶切回收,并定向克隆到pLVX-Tigh-t puro载体获得pLVX-Notch1-EGFP。将构建好的质粒进行病毒包装并感染PC12细胞,抗性筛选2周。在不同时间点和不同浓度Dox作用下,用荧光显微镜观察EGFP表达,流式细胞术检测Notch1表达。结果:酶切和DNA测序均证实pLVX-Notch1-EGFP质粒构建成功。镜下可见感染后的PC12细胞在500 ng/ml Dox诱导36 h时90%以上细胞均表达EGFP。流式细胞术检测Notch1表达结果显示,随着Dox浓度增加,Notch1阳性细胞百分比逐渐增加;随着Dox诱导时间延长,Notch1阳性细胞百分比逐渐增高,到36 h时达到最高(81.5%)。结论:成功构建携带Notch1-EGFP融合蛋白的Te-t On调控的慢病毒真核表达载体,实现在PC12细胞中调控Notch1-EGFP融合蛋白的表达。
- 刘永敏段萍黄春田李博韩雪飞许燕鄢文海邢莹
- 关键词：NOTCH1PC12细胞
- Notch1对PC12细胞自噬和生物学特性的影响
- Notch基因在无脊椎动物和脊椎动物中都广泛存在且高度表达，并且在不同物种间都具有高度的进化保守性。Notch信号通路的功能复杂多样，调控正常细胞的生长分化，决定细胞的命运，参与调控细胞生命活动的方方面面，在哺乳类动物中...
- 黄春田
- 关键词：NOTCH基因PC12细胞细胞自噬生物学特性
