李博
- 作品数:12 被引量:17H指数:3
- 供职机构:郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河南省自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 综合性大学医学教育教学相关激励与约束机制的研究与实践
- 医学教师是医学院教学质量建设的主体,高校只有吸引和培养最优秀的教师从事教育和科研事业,才能培养出优秀医生.本文从综合性大学医学院教师由于其自身的特殊性出发,探讨现存医学教育教学相关激励与约束机制的不足之处,并与医学院管理...
- 李博段萍赵松田晨光鄢文海
- 关键词:教学策略激励机制
- 自噬对骨髓间充质干细胞增殖中的作用及其机制探讨
- 本实验研究了骨髓间充质干细胞神经分化前后自噬水平的变化,检测了自噬水平变化对其增殖凋亡分化的影响,并探讨了其可能性的调控机制。采用RT-PCR方法检测了骨髓间充质干细胞神经分化前后自噬相关基因LC3B、Beclin1、A...
- 邢莹李博黄春田鄢文海
- 关键词:间充质干细胞NOTCH1自噬增殖
- 文献传递
- Wnt信号通路诱导胚胎干细胞向皮层神经元的分化
- 目的经典Wnt信号通路对于胚胎皮质神经元的产生和类型分化具有重要影响,本实验拟在体外培养条件下,观察Wnt信号通路在胚胎干细胞向皮质神经元/前体细胞的诱导分化中的可能作用。方法通过类胚体的方法诱导小鼠胚胎干细胞的悬浮生长...
- 景莹李博鄢文海邢莹
- 关键词:小鼠胚胎干细胞神经元发生
- 文献传递
- 人参皂苷Rb1减轻Aβ_(25~35)所致新生神经细胞损伤被引量:3
- 2010年
- 目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导新生大鼠神经细胞中蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶系统失衡及人参皂苷Rb1对此作用的干预效应。方法从新生大鼠海马分离神经干细胞(NSCs)体外培养,诱导分化7 d后收获新生神经细胞,分3组:Aβ25~35组的培养基中加入20μmol/L Aβ25~35处理12 h;Rb1+Aβ25~35组先在含10μmol/L Rb1的培养基中预处理24 h后,再用20μmol/L Aβ25~35处理12 h;对照组不加任何其他处理因素。RT-PCR和免疫细胞化学法检测各组新生神经元的蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶和磷酸化Tau蛋白的表达。结果Aβ25~35处理组与对照组相比,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK-5)的mRNA表达增加,蛋白磷酸酶2A(PP2A)的mRNA表达减少;荧光显微镜下,活化型GSK-3β(pY279,216)表达增加,PP2A表达降低;微管相关蛋白Tau(pS396)和Tau(pS262)的阳性细胞率明显增高。Rb1预处理可以显著降低Aβ25~35引起的上述蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶和Tau改变。结论Aβ25~35诱导体外分化的新生大鼠神经细胞的蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶系统失衡和Tau蛋白过度磷酸化,人参皂苷Rb1可减轻Aβ25~35引起的上述作用。
- 段萍邢孟韬许燕韩雪飞李博赵庆霞鄢文海
- 关键词:新生神经元人参皂甙RB1淀粉样蛋白TAU
- 大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后自噬水平的变化被引量:4
- 2015年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经细胞分化前后自噬水平的变化,进一步研究BMSCs神经分化机制。方法:原代培养大鼠BMSCs,三代后用L-DMEM(2%DMSO+200μmol/L BHA)诱导其向神经细胞分化,采用免疫细胞化学方法检测神经元特异标记物NSE表达,采用RT-PCR方法检测自噬相关基因LC3B、Beclin1、Atg5、Atg7、Atg10的表达,用Western blot及流式细胞术检测了自噬标志蛋白LC3B的表达。结果:大鼠BMSCs传3代后,贴壁的BMSCs可达90%以上,类成纤维细胞样梭形生长,经诱导剂作用5 h后,细胞呈现神经细胞样改变,NSE阳性率为(83±5)%。RT-PCR结果表明BMSCs向神经细胞分化后LC3B,Beclin1,Atg5,Atg7,Atg10的表达升高,流式细胞术检测LC3B的平均荧光强度升高,Western blot结果表明神经分化后LC3B-Ⅱ表达增加。结论:大鼠BMSCs向神经细胞分化后自噬水平增加。
- 李博黄春田李彩芳段萍韩雪飞鄢文海邢莹
- 关键词:骨髓间充质干细胞自噬分化神经细胞
- Wnt信号通路诱导胚胎干细胞向皮层神经元的分化
- 目的 经典Wnt信号通路对于胚胎皮质神经元的产生和类型分化具有重要影响,本实验拟在体外培养条件下,观察Wnt信号通路在胚胎干细胞向皮质神经元/前体细胞的诱导分化中的可能作用。方法 通过类胚体的方法诱导小鼠胚胎干细胞的悬浮...
- 景莹李博鄢文海邢莹
- 关键词:小鼠胚胎干细胞神经元发生
- Aβ和人参皂苷对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响
- 神经干细胞/(neural stem cells,NSCs/)是具有增殖和自我更新能力的细胞,在一定条件下可诱导分化成神经元、星型胶质细胞及少突胶质细胞。近十年的研究表明,胚胎和成人脑组织中均存在神经干细胞,这为神经干细...
- 李博
- 关键词:神经干细胞TAU蛋白AΒ25-35人参皂苷RB1WESTERN-BLOT
- 文献传递
- 慢病毒Tet-On系统调控Notch1-EGFP融合蛋白在PC12细胞中表达的研究被引量:5
- 2013年
- 目的:构建Te-t On系统调控的人源性Notch1胞内段(NICD)和EGFP融合蛋白的慢病毒真核表达载体,并探讨Notch1-EGFP在PC12细胞中的表达条件。方法:采用RT-PCR从人胎盘组织中获得NICD的cDNA,利用PCR扩增pEGFP-C1质粒中EGFP的编码序列,两者均定向克隆到pcDNA3.1(+)质粒中组成Notch1-EGFP片段,将该片段进一步酶切回收,并定向克隆到pLVX-Tigh-t puro载体获得pLVX-Notch1-EGFP。将构建好的质粒进行病毒包装并感染PC12细胞,抗性筛选2周。在不同时间点和不同浓度Dox作用下,用荧光显微镜观察EGFP表达,流式细胞术检测Notch1表达。结果:酶切和DNA测序均证实pLVX-Notch1-EGFP质粒构建成功。镜下可见感染后的PC12细胞在500 ng/ml Dox诱导36 h时90%以上细胞均表达EGFP。流式细胞术检测Notch1表达结果显示,随着Dox浓度增加,Notch1阳性细胞百分比逐渐增加;随着Dox诱导时间延长,Notch1阳性细胞百分比逐渐增高,到36 h时达到最高(81.5%)。结论:成功构建携带Notch1-EGFP融合蛋白的Te-t On调控的慢病毒真核表达载体,实现在PC12细胞中调控Notch1-EGFP融合蛋白的表达。
- 刘永敏段萍黄春田李博韩雪飞许燕鄢文海邢莹
- 关键词:NOTCH1PC12细胞
- Aβ_(25-35)对体外培养大鼠神经干细胞分化的影响
- 2014年
- 目的探讨β淀粉样蛋白(Aβ25-35)对体外培养神经干细胞分化的影响和机制。方法分离培养新生SD大鼠经干细胞,加入10%的胎牛血清使其分化7 d时,一部分细胞用Aβ25-35作用12 h,观测细胞生长状态,运用免疫细胞化学和免疫蛋白印记迹术研究各组Tau蛋白在Ser396,Ser262位点磷酸化水平变化及活化型GSK-3β[pTyr279,216]的表达水平。结果呈球形生长的神经干细胞在加入胎牛血清培养液后,逐渐从球的周边分化出神经细胞,长出神经细胞样的触突,在Aβ25-35作用下,分化细胞的突起粗大且生长速度较快。免疫细胞化学染色和Western-blot结果显示,所有分化细胞都有Tau[pS396]、Tau[pS262]、GSK-3β[pTyr279,216]表达,但经Aβ处理后表达量增高。结论 Aβ25-35可通过上调GSK-3β的表达提高Tau蛋白磷酸化水平,促进神经干细胞向神经细胞分化。
- 蒋珂李博郭思段萍韩雪飞许燕鄢文海邢莹
- 关键词:Β淀粉样蛋白25-35TAU蛋白
- β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响被引量:5
- 2011年
- 背景:通过调节神经干细胞分化过程中的tau蛋白磷酸化水平可提高神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的效果。目的:观察β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响。方法:分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,诱导第3代神经干细胞分化1周后,分别采用免疫荧光细胞化学和Western-blot检测Tau[pS396]、Tau[pS262]及GSK-3β[pTyr279,216]表达情况。结果与结论:正常神经干细胞分化过程中有Tau[pS396]和Tau[pS262]的表达,β-淀粉样蛋白25~35可以使Tau[pS396]、Tau[pS262]和GSK-3β[pT279/216]表达上调,而人参皂苷Rb1可以逆转β-淀粉样蛋白25~35的作用。提示β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1通过调节GSK-3β的活性对tau蛋白的磷酸化水平产生调控作用。
- 赵庆霞刘小转李博鄢文海韩雪飞邢莹
- 关键词:人参皂苷RB1神经干细胞TAU蛋白磷酸化海马