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詹林盛

作品数:113 被引量:357H指数:10
供职机构:军事医学科学院更多>>
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相关领域:医药卫生生物学一般工业技术自动化与计算机技术更多>>

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  • 1篇2000
113 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
SEN病毒中国分离株基因克隆及序列分析
2003年
目的 :测定SENV_D亚型中国分离株的基因组序列 ,并对其进行初步分析。方法 :根据国外已发表的SEN病毒基因序列设计特异性引物 ,应用套式PCR方法从一份非甲_非戊型 (non_A_E)肝炎患者血清中 ,分段扩增了包括SENV_D型所有编码区 (ORFs)长 3175bp的DNA片段 ,将其克隆到T载体后测序。结果 :测序结果经BLAST软件分析 ,与国外发表的 3株D型SEN病毒SENV_D(AX0 2 5 730 ) ,SENV_D(AB0 5 935 2 ) ,TTV(AB0 2 86 6 8)的核苷酸序列同源性分别为 90 % ,88%和 91% ;与 2株D型SEN病毒SENV_D(AX0 2 5 730 ) ,TTV(AB0 2 86 6 8)ORF1所编码蛋白的氨基酸同源性分别为 93%和 92 %。ORF1蛋白中含有Rep蛋白 (在病毒复制中起作用的一种蛋白 )的两个保守基序 ,此外还有一个保守的ATP GTP结合基序 (P_loop)以及若干个高度保守的蛋白激酶磷酸化位点。结论 :测定得到了SENV_D亚型中国分离株的基因组序列 ,有助于其检测方法及致病性的研究 ,并为研究SEN病毒的进化地位提供方便。
杜娟王海平孟庆华李娅詹林盛王全立
关键词:基因组病毒SEN病毒聚合酶链反应
血液安全与保障——军事医学科学院输血研究进展被引量:6
2011年
"血液安全及保障"是个永恒的主题,军事医学科学院从建院之初到现在的60年间,开展了包括血液采集、检验,血液筛查、制备、储存、运输、输注及新型血源开辟等多个方面的研究.从20世纪50年代初的血浆代用品开始,先后在输血传播(病毒)传染病的检测、相关灭活方法与装置、临床输血安全、血液制品与代用品及其新型血液成分等方面均取得了良好的进展,形成了一系列理论、技术、产品、装置与标准,力求为形成整体、灵活、精确、高效、优质的安全血液供应链提供科技支撑.
周虹王全立詹林盛许金波章金刚王字玲宫锋岳文
关键词:血液质量血液制品血液代用品输血治疗
小鼠NK细胞体内扩增、分离纯化的方法研究被引量:1
2017年
目的为获得一定数量高纯度的自然杀伤细胞(natural killer cells,NK),拟采用水动力高压转染技术实现Flt-3配体(Flt-3 ligand,FL)基因在小鼠肝的高效表达,以刺激脾NK细胞体内扩增,随后通过优化免疫微磁珠分选(MACS)技术获取大量、高纯度NK细胞,为细胞治疗提供支撑。方法 C57BL/6小鼠经多次水动力高压转染FL表达质粒后,流式细胞术检测脾NK细胞的扩增程度及表型变化,并通过MACS技术分离纯化NK细胞。结果与一次水动力高压转染FL目的质粒的结果相比,两次水动力转染后小鼠脾明显增大,淋巴细胞绝对数量增加(6.02±1.15)倍,NK细胞亚群比例增加(2.07±0.39)倍,NK细胞亚群绝对数量增加(12.49±2.39)倍。同时,FL刺激对NK细胞活性及表型无明显影响。最后,经偶联CD5(Ly-1)磁珠阳选和去除T、B等多种杂细胞磁珠阴选相结合的双重分选方法,可获得纯度为(83.81±0.92)%的NK细胞,较单独阴选纯度提高(1.60±0.02)倍。结论经两次FL表达质粒水动力高压转染,可在不影响NK细胞活性及表型的前提下,实现其在小鼠脾的大量扩增。阳选和阴选相结合的双重MACS分选技术能有效去除T、B等杂细胞影响,获取高纯度NK细胞,为肿瘤细胞免疫治疗奠定基础。
安洁王蕾吴涛张玉龙周欠欠付秋霞詹林盛
关键词:杀伤细胞细胞治疗
一种定量分析蛋白质间相互作用的方法及其应用
本发明公开了一种定量分析蛋白质间相互作用的方法及其应用。该方法是将Fluc和Rluc分别与要定量分析相互作用的目的蛋白X和预测蛋白Y融合表达,融合蛋白Fluc-X、Rluc-Y结合纯化后用DLR对相互作用蛋白的量进行精确...
贾帅争詹林盛彭剑淳
HCVIRES介导荧光素酶小鼠体内表达模型的建立被引量:6
2004年
詹林盛饶林彭剑淳王会中贾帅争王全立
关键词:丙型肝炎病毒荧光素酶动物模型
褐藻多糖对氧化应激诱导的淋巴细胞DNA损伤的保护作用被引量:33
1999年
研究褐藻多糖(BSP)对活性氧引起的淋巴细胞DNA损伤的保护作用。方法是敏感的单细胞凝胶电泳(SCGE)。结果表明在不同的介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度不同,在同一介质中H_2O_2对细胞DNA的损伤程度呈一定的量效关系。 100mg/L和 200mg/L的大分子量多糖(BSPh)和小分子量多糖(BSPs)都能明显降低H_2O_2对细胞DNA损伤程度。表明BSP能够清除自由基,减低氧化应激所致的细胞DNA损伤程度,有利于维护细胞的正常结构和功能。提示 BSP可作为一种预防性抗氧化营养素,用于预防氧化应激引起的疾病。
詹林盛张新生吴小红王颖丽王之贤
关键词:单细胞凝胶电泳DNA损伤氧化应激
人补体C3功能片段rC3B的克隆、表达和活性鉴定
2007年
本研究获取人类补体C3上与补体Ⅲ型受体(CR3)结合的功能区rC3B,并进行了表达、纯化和活性鉴定。用基因扩增法获得rC3B基因,并插入原核表达载体pQE30a,转化大肠杆菌E.coli M15进行表达;用SDS-PAGE电泳检验目的蛋白后以Ni2+螯合Sepharose Fast Flow层析进行纯化;用Western blot与单核细胞黏附试验初步确认蛋白活性。结果表明:钓取了人类补体C3的功能片段rC3B,构建了原核表达载体pQE30-rC3B并在E.coli中得了到高效表达;经Ni2+固相化的螯合Sepharose Fast Flow亲和层析纯化蛋白后,蛋白纯度达80%;Western blot检测证明rC3B具有抗原性,单核细胞的黏附试验初步确认了纯化后蛋白的活性。结论:确认了人类补体C3的这一活性区域,并获得了该蛋白的功能片段,为深入研究人类补体C3蛋白的功能和应用奠定了基础。
甘慧周勇孙萍朱晓霞王全立詹林盛
关键词:补体C3原核表达单核细胞
咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性检测被引量:2
2007年
目的:初步证实咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性。方法:通过PCR扩增得到咖啡豆α-半乳糖苷酶基因克隆到载体pGEM-T easy,目的片段与预期的大小一致。咖啡豆α-半乳糖苷酶基因与分泌性原核表达载体pAS18连接,转化到宿主菌E.coli JM83。经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳分析,Western-blot印迹证实蛋白表达的特异性。结果:PCR扩增得到目的片段测序结果正确。SDS-PAGE电泳分析得到目的蛋白41kD,经过Western blot鉴定正确。ELISA检测证实咖啡豆α-半乳糖苷酶具有生物活性。结论:优化诱导条件,初步证实重组咖啡豆α-半乳糖苷酶基因具有生物活性。
崔玉杨军詹林盛
关键词:Α-半乳糖苷酶活性
乙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞在病毒清除过程中的作用被引量:1
2011年
在乙型肝炎病毒(HBV)感染过程中,适应性免疫与病毒的致病和清除密切相关。一般认为,体液免疫产生的抗体可以清除外周循环的病毒颗粒,从而阻止病毒在宿主体内的传播,细胞免疫主要清除被感染细胞中的病毒。HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)在抑制HBV复制过程中发挥着重要的作用。CTL在肝内主要通过分泌γ干扰素抑制病毒,同时,当CTL识别HBV抗原后,HBV特异性CTL募集抗原非特异性炎症细胞对肝组织浸润,造成肝细胞的损伤。对CTL抗病毒作用进行深入研究,将为乙型肝炎的治疗开辟新的途径。
梁声强杜娟詹林盛
关键词:乙型病毒性肝炎细胞毒性T淋巴细胞Γ干扰素
腺病毒转染法构建表达乙型肝炎病毒核心蛋白小鼠肝癌细胞系及其在乙肝疫苗评价中的应用被引量:8
2013年
目的构建一种可高效表达乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)核心蛋白(HBc)C57BL/6小鼠来源肝癌细胞系,并以其作为靶细胞评价乙肝基因疫苗在C57BL/6小鼠体内所引起的HBe特异性细胞毒性T细胞(CTL)的活性。方法以HBV全基因组为模板,采用PCR方法扩增HBe基因,插入AdEasy腺病毒穿梭载体,构建携带HBe蛋白的腺病毒穿梭载体AD—HBe,电转携带有腺病毒骨架质粒(Ad—Easy)的EcoliBJ5183感受态细胞,获得重组腺病毒质粒AD-CMV.HBc,经Pme,线性化处理后转染HEK293细胞进行包装得到相关的重组腺病毒,再感染C57BL/6小鼠来源肝癌细胞系Hepal-6。结果成功构建表达HBc蛋白的重组腺病毒,在体外对Hepal一6细胞的感染率几乎为100%,并且HBc蛋白得到高效表达。以此为靶细胞用于pVAX1-HBe基因疫苗免疫C57BL/6小鼠产生的CTL活性的体外检测。结论我们成功构建HBe蛋白表达的靶细胞系,对研究乙肝病毒核心抗原(HBcAg)所引起的细胞免疫反应及乙肝发病机理等方面有重要意义。
苑振楠周欠欠闫虎杜娟詹林盛吴德全
关键词:重组腺病毒
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