苟克勉
- 作品数：46 被引量：190H指数：8
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>
- 兔转基因单细胞克隆株的分离培养及其染色体倍性分析被引量：4
- 2002年
- 为检测原代二倍体细胞转基因后单细胞克隆的增殖能力及其染色体倍性稳定性 ,用脂质体介导的转染方法将质粒DNApEGFP -C1(带有报告基因GFP和Neor)导入体外培养的兔胎儿成纤维细胞中 ,经G4 18药物筛选后 ,分离出 73个GFP阳性细胞克隆 ,最后存活 13个 (18% ) ,对其中 9个克隆的染色体倍性进行分析 ,结果只有 2个 (2 2 % )克隆的染色体倍性正常率在 75 %以上 ,分别为 80 %和 75 % ,其余 7个克隆的染色体倍性正常率均在 70 %以下。这表明 ,当使用转基因单细胞克隆株作为供核细胞生产克隆动物时 ,单细胞克隆的增殖代数和染色体倍性的稳定性需要进一步研究提高。
- 侯健安晓荣关宏苟克勉林爱星陈永福
- 关键词：染色体倍性核型分析
- 精子头后部质膜融合蛋白fertilin的研究进展被引量：1
- 1998年
- 精子头后部(或赤道区)表面fertilin糖蛋白由相关的两个跨膜亚基α和β构成异二体形式。这两个亚基前体均含有金属蛋白酶区(met-alloprotease domain)和整联蛋白配体区(disin-tegrin domain),属于ADAMs gene家族。α和β前体分别在睾丸和附睾中从上述两区域连接处水解后,得到成熟型亚基。受精时,穿过透明带的顶体反应后精子借助β亚基的disintegrin肽段与卵母细胞表面的整联蛋白结合,同时fertilin结构发生变化,暴露出α亚基上潜在的融合肽段(90—111aa),并介导精子与卵母细胞发生质膜融合,最终完成受精过程。
- 苟克勉邓继先陈永福
- 关键词：精子
- 特定电磁波(TDP)对鸭蛋孵化效果的影响
- 1993年
- 前言 TDP是特定电磁波的简称,该电磁波为2～25微米,最大峰值波长为9微米左右的红外波谱。实践证明,它对生物具有特殊的有益的生物效应,已被广泛应用于医疗、农牧业,取得较好效果。自1986年以来先后由王松青等用TDP照射种鸡蛋,都分别提高了孵化率。但目前尚无TDP对鸭卵照射后孵化效果的报道。本实验目的在于探讨TDP照射,对鸭蛋孵化的影响。 材料和方法 (一)主要仪器 CQ-JI型TDP辐射器(250W50Hz 220V重庆医疗器械研究所生产) (二)实验材料 莲花池种鸭场提供的7日内合格种蛋。 (三)实验方法 随机抽取800枚合格种蛋。
- 苟克勉黄锋傅立志吴培安民
- 关键词：鸭蛋孵化电磁波TDP
- 体细胞克隆法生产绵羊转基因囊胚
- pEGFP-N1质粒DNA分别转染5个绵羊卵巢的原代颗粒细胞后,用0.5 mg/mL G418连续筛选10天,阳性细胞出现集落生长,平均每个35-mm转染盘能得到4～5株阳性细胞,它们均表达GFP基因。从每个卵巢的转基因...
- 苟克勉安晓荣陈永福
- 文献传递
- 哺乳类动物受精的分子基础
- 2000年
- 苟克勉安晓荣陈永福张忠诚
- 关键词：哺乳动物受精分子生物学
- 基因打靶技术及其应用前景被引量：8
- 2002年
- 基因打靶是近年来发展起来的对细胞基因组中的某一基因进行定点操作的生物技术。综述了基因打靶的筛选系统 ,影响基因打靶效率的几个主要因素及其解决方法 ,总结了基因打靶在各个学科领域中的应用。
- 李瑞国安晓荣苟克勉陈永福
- 关键词：基因打靶技术靶细胞
- 胞浆内精子注射技术生产小鼠被引量：11
- 2005年
- 以piezo操作系统为技术支撑 ,在掌握小鼠卵母细胞胞浆内精子注射技术 (ICSI)的基础上 ,进行了ICSI技术生产试管小鼠的尝试。来自成年昆明 (KM)小鼠附睾尾的新鲜精子 ,剪切去尾后 ,直接将精子头注射到B6D2F1小鼠卵母细胞质中 ,注射后 1h ,83 .3%的卵母细胞存活。6h时 ,84 . 0 %的成活卵子成功受精 ,形成原核 ,排出PB2 体外培养的ICSI胚胎 ,卵裂率 (98%vs 94 . 7% )和 4_细胞期胚胎比率 (89 5 %vs 92 . 1% )均与培养的体内受精卵没有差异 (P >0 . 0 5 ) ;但是 ,桑椹胚(6 3 8%vs84 . 2 % )和囊胚发育率 (2 5 .7%vs 6 8. 4 % )极显著地 (P <0 . 0 1)低于对照组。12 0枚原核期胚胎移植给 7只假孕受体后 ,4只受孕小鼠共产出 2 8只ICSI小鼠 (2 3. 3% )。健康成年的 2 5只ICSI小鼠都没有明显的生理和行为异常。随机选择其中的 2 0只小鼠 ,分别进行ICSI小鼠间、ICSI与KM小鼠间共 12组的交配 ,结果所有雌鼠妊娠产仔。在成功建立小鼠ICSI技术的基础上 ,成功获得了我国的首例ICSI小鼠 ,并且证明这些ICSI小鼠都具有正常的繁殖后代的能力。
- 严阿勇李明安晓荣侯健关宏陈永福苟克勉
- 关键词：ICSI囊胚小鼠生殖力
- 硬脂酰-辅酶A脱氢酶基因在食品级乳酸菌中的表达被引量：4
- 2012年
- 为了实现硬脂酰-辅酶A脱氢酶1编码基因在乳酸乳球菌中的表达,采用PCR技术扩增获得人类scd1的编码序列。Nco I和Xba I双酶切后定向插入到食品级表达载体pNZ8149中,构建表达载体pNZ8149-scd1。电转化乳酸乳球菌NZ3900,经菌落PCR和测序鉴定scd1基因成功插入到乳酸乳球菌中。在乳链菌肽诱导下进行scd1的表达,转化株提取脂肪酸,进行脂肪酸含量的气相色谱分析。结果显示,SCD1转化菌株中的C16∶1n-7和C18∶1n-7脂肪酸组分比转化pNZ8149的对照组乳酸菌分别提高了92%~169%和53%~127%。文中以scd1基因为例,尝试并证明了脂肪酸脱氢酶类基因能够在食品级乳酸菌中有效表达,为后续研究奠定了基础。
- 王腊梅李世丽苟克勉罗玉柱
- 关键词：乳酸乳球菌
- 卵丘细胞核移植技术生产克隆牛犊被引量：41
- 2002年
- 分别以短期培养的5头牛卵丘细胞（1～5 BCC）为细胞核供体,共用1188枚体外成熟的去核卵母细胞构建了931枚重构胚（78.4％）.体外培养后,763枚（82％）发育至2-细胞期,627枚（67.3％）发育至8-细胞期,最后获得囊胚275枚（29.5％）.囊胚的平均细胞数为124±24.5（n=20）.分析不同个体来源的卵丘细胞,同一个体卵丘细胞饥饿与否以及饥饿时间的长短、融合后核/质相容时间（融合到激活的时间长短）等因素对核移植效率的影响发现,5个个体的体细胞核移植囊胚率（14.1％,45.2％,27.3％,34.3％vs1.5％）有显著差异（P<0.05）.同一供体细胞饥饿与否（47.1％vs44.4％）、饥饿11～12 d（52.5％）和18～19 d（41.6％）均不影响核移植囊胚率（P≥0.05）.核/质相容2～3h的囊胚率（20.3％）显著低于3～6h组（31.0％,P<0.05）.3～6h范围内,囊胚率无差异（P≥0.05）.其中63枚冷冻的核移植囊胚解冻后移植给31头受体牛,妊娠4例,最后顺利获得2头克隆牛犊.结果表明,牛卵丘细胞饥饿不是核移植成功的关键因素,核质相容程度和供体细胞的个体差异对核移植效率有一定影响.卵丘细胞能够获得全程发育的克隆牛犊.
- 安晓荣苟克勉关宏侯健林爱星陈永福朱士恩曾申明田见晖
- 关键词：卵丘细胞囊胚牛犊克隆
- 牛精子头后部sp18族膜蛋白的分离及其功能的研究
- 苟克勉
- 关键词：精子单克隆抗体精子活力
