牛坚
- 作品数：56 被引量：248H指数：9
- 供职机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 腹腔镜与开腹脾切除术治疗非创伤性脾脏疾病的疗效分析被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨腹腔镜脾切除术(laparoscopic splenectomy,LS)治疗非创伤性脾脏疾病的安全性、可行性及临床疗效。方法:回顾分析2009年6月至2013年1月收治的48例因非创伤性脾相关疾病行单纯性脾切除术患者的临床资料,其中23例行LS(LS组),25例行开腹脾切除术(open splenectomy,OS)(OS组),对比两组患者术中、术后情况,评价其手术疗效。结果:LS组中1例因术中出血中转开腹,余均顺利完成手术。LS组术中出血量、术后进食时间、术后住院时间、切口长度显著优于OS组(P<0.05),手术时间稍长于OS组。LS组术后发生并发症2例,术中切除副脾3例;OS组发生并发症9例,术中切除副脾4例。术后随访5～48个月,平均(22.0±10.4)个月,均无远期并发症发生。结论:在严格掌握手术适应证的前提下,LS治疗非创伤性脾脏疾病安全、有效,与传统开腹手术相比,具有患者创伤小、术后康复快、并发症少等优点,值得推广、应用。
- 汪正伟牛坚魏鑫王飞通周兵刘斌
- 关键词：脾切除术腹腔镜检查剖腹术疗效比较研究
- T细胞免疫球蛋白及黏蛋白家族-3对干扰素-γ活化的小鼠肝Kupffer细胞分泌炎性细胞因子的调节作用及机制被引量：2
- 2015年
- 目的探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白家族-3(Tim3)对IFN-γ活化的小鼠Kupffer细胞的调节作用并探讨其相关机制。方法将真核表达质粒pc DNA3.1-Tim3转染小鼠肝Kupffer细胞,以Real-time PCR和Western blot检测Tim3在小鼠肝Kupffer细胞的表达。通过ELISA检测质粒pc DNA3.1-Tim3、Tim3阻断型抗体对IFN-γ活化的小鼠肝Kupffer细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)产生的影响,Western blot检测JAK2/STATl蛋白表达。结果 Real-time PCR检测结果显示,IFN-γ能够显著提高小鼠肝脏Kupffer细胞中Tim3 m RNA的表达水平(P<0.05);pc DNA3.1-Tim3组的TNF-α、IL-6和IL-1β分泌较对照组显著下降(P<0.01);ELISA结果显示,Tim3阻断型抗体组与对照组相比,TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌增加(P<0.01);Western blot检测显示,与对照组相比,Tim3阻断型抗体预处理的小鼠Kupffer细胞JAK2及STAT1蛋白的表达上调(P<0.05)。结论Tim3通过调控Jak2/Stat1蛋白表达参与了Kupffer细胞活化的调节。
- 牛坚王月李克清朱志军刘斌
- 关键词：KUPFFER细胞小鼠
- 腹腔镜与开放性肝切除术治疗小肝癌的近期疗效比较被引量：32
- 2013年
- 目的:比较腹腔镜与开腹小肝癌切除术的近期疗效。方法:分析2011年8月—2012年11月收治的52例小肝癌患者的临床资料,其中20例行腹腔镜肝切除术(腔镜组),32例行开腹肝癌切除术(开腹组)。比较两组术前、术中接术后情况。结果:两组术前资料具有可比性。两组手术时间差异无统计学意义(P>0.05),但腔镜组术中出血量明显低于开腹组(t=5.568,P=0.003);腔镜组术后各项肝功能指标均明显优于开腹组(均P<0.05),白细胞、中性粒细胞、C反应蛋白水平明显低于开腹组(t=0.727,2.191,5.691,均P<0.05),术后禁食时间、下床活动时间及住院天数均明显少于开腹组(t=15.838,3.896,7.638,3.663,均P<0.01)。腔镜组无术后并发症发生,开腹组8例出现并发症(χ2=5.909,P=0.017)。结论:腹腔镜肝切除术治疗小肝癌是安全、可行的且近期疗效优于传统开放手术。
- 周兵汪正伟牛坚王飞通魏鑫刘斌
- 关键词：肝肿瘤
- CD90和IGF1R蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨CD90、IGF1R蛋白产物在原发性胆囊癌中的表达特点及关系。方法：应用免疫组化S-P法检测36例原发性胆囊癌中CD90、IGF1R的阳性表达率,并以同期20例慢性胆囊炎作对照（对照组）。结果：（1）原发性胆囊癌CD90蛋白阳性表达率63.89%、IGF1R蛋白阳性率47.22%,均显著高于对照组的0%、10%：（2）CD90蛋白在有淋巴结远处转移、NevinⅣ-Ⅴ期患者中阳性率（79.17%）高于无转移、NevinⅠ-Ⅲ期的患者（33.33%）：IGF1R在低分化、有淋巴结远处转移阳性率（84.62%、62.50%）高于高中分化、无转移（26.09%、16.67%）：（3）IGF1R与CD90两者呈正相关（P〈0.05）：（4）CD90阳性（IGF1R阳性）患者生存率明显低于CD90阴性（IGF1R阴性）患者。结论：联合检测CD90、IGF1R蛋白在原发性胆囊癌中表达有助于反映原发性胆囊癌生物学特性、为预后判断提供参考指标。
- 牛坚王月刘斌朱志军申海莲
- 关键词：原发性胆囊癌肿瘤干细胞
- 慢病毒介导的双干扰RNA同时沉默IGF1R和EGFR蛋白治疗肝癌的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究双靶向IGF1R和EGFR基因的小干扰RNA(si RNA)慢病毒对肝癌细胞SMMC7721中IGF1R和EGFR表达的影响及其对细胞生长的作用。方法针对已经筛选确定的IGF1R和EGFR基因干扰有效序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与pLVTHM载体连接产生pLVTHM-IGF1R。RT-PCR合成含H1启动子EGFR-si RNA表达框,克隆入pLVTHM-IGF1R中形成pLVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA。用pLVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA、psPAX2和pMD2G 3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒LVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA,大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。用LVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA感染SMMC7721细胞(感染组),以未经处理的SMMC7721细胞(细胞对照组)及空载体质粒LVTHM(空载体对照组)作为对照。RT-PCR及Western blot法检测细胞中IGF1R和EGFR的表达,Cell Counting Kit-8法检测细胞生长,TUNEL法检测细胞凋亡。结果成功构建慢病毒LVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA;病毒滴度为4.58×109pfu/ml;LVTHM-IGF1R-EGFR-si RNA明显抑制肝癌细胞中IGF1R和EGFR的mRNA和蛋白的表达,分别为细胞对照组及空载体对照组的5%、4%和4%、3%以及10%、11%和8%、9%(P<0.05),同时能抑制肝癌细胞生长(P<0.05),促进肝癌细胞凋亡(P<0.05)。结论靶向IGF1R和EGFR基因siRNA慢病毒可同时有效封闭肝癌细胞中的IGF1R及EGFR,降低肝癌细胞的增殖能力,为以IGF1R和EGFR基因为靶点的肝癌生物治疗奠定了理论基础。
- 牛坚刘斌潘晴于彬李向农
- 关键词：慢病毒肝癌
- Survivin-pPRIME-IGF1R-miR30慢病毒载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制
- 2010年
- 目的:探讨survivin启动子调控的重组慢病毒survivin-pPRIME-IGF1R-miR30载体(简写为sur-IGF1R-miR30)对肝癌Hep3B细胞IGF1R表达和细胞生长的影响。方法:PCR扩增survivin启动子,构建sur-pPRIME;将针对IGF1R基因的干扰序列与sur-pPRIME载体连接,构建sur-IGF1R-miR30慢病毒载体。将sur-IGF1R-miR30、psPAX2和pMD2G质粒共转染293T细胞,扩增慢病毒,检测病毒滴度。以sur-IGF1R-miR30感染人肝癌Hep3B细胞和胎肝L-02细胞,RT-PCR、Western blotting检测Hep3B细胞IGF1R的表达,CCK-8法检测Hep3B细胞的生长。结果:成功构建survivin启动子调控的慢病毒载体sur-IGF1R-miR30,滴度为4.58×109PFU/ml。Sur-IGF1R-miR30感染后,Hep3B细胞中特异表达荧光蛋白,L-02细胞中基本没有表达。Sur-IGF1R-miR30感染Hep3B细胞可阻断IGF1RmRNA和IGF1R蛋白的表达。Sur-IGF1R-miR30感染抑制肝癌细胞的生长,第7天时的抑制率达60%(P<0.05)。结论:成功构建的重组慢病毒载体sur-IGF1R-miR30可有效地降低肝癌细胞中IGF1R的表达,抑制肝癌细胞的增殖。
- 牛坚刘斌于彬王月李向农
- 关键词：SURVIVIN启动子慢病毒RNA干扰
- 银离子杀菌液预防腹部手术切口感染的应用被引量：6
- 2010年
- 目的研究银离子杀菌液用于预防腹部手术切口感染的实用价值。方法通过临床评价方法和放射免疫法,对银离子杀菌液用于不同手术切口预防感染的效果进行了评价。结果用银离子杀菌液清洗手术切口后再缝合伤口的实验组病人,伤口分泌物中白介素2、白介素18和肿瘤坏死因子α含量显著低于用生理盐水清洗手术切口后缝合伤口的对照组病人伤口分泌物者。实验组负压袋引流量少于对照组;实验组渗出期、切口康复期短于对照组。结论银离子杀菌液能有效保护腹部手术切口,对手术切口感染具有一定预防作用。
- 章焱周牛坚刘斌梁磊田力平李向农
- 关键词：手术切口切口感染
- CD90和胰岛素样生长因子1受体在原发性肝癌中的表达被引量：9
- 2012年
- 目的探讨干细胞表面标志物CD90和胰岛素样生长因子1受体（insulin—likegrowthfactor1receptor，IGFlR）在肝癌中的表达情况及其与原发性肝癌的关系。方法应用免疫组化S-P法检测36例原发性肝癌中CD90、IGFlR的表达，并以20例肝脏血管瘤患者的正常肝组织作对照。随访33例患者，Kaplan—Meier法对患者中位生存期和生存率进行分析。结果原发性肝癌组织CD90、IGFlR蛋白的阳性表达率分别为63．89％（23／36）、52．78％（19／36），显著高于正常肝组织（0／20）、5％（1／20），二者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CD90在UICC临床分期Ⅲ、Ⅳ期中阳性表达率（79．17％）比I～Ⅱ期（33．33％）明显增高（P〈0．05），低分化组阳性表达率（76．92％）比高中分化组（56．52％）明显增高（P〈0．05）。IGFlR在UICC临床分期Ⅲ、Ⅳ期的患者中阳性表达率（70．83％）比I～Ⅱ期（16．67％）明显增高（P〈0．05），低分化组阳性表达率（84．62％）比高分化组（37．38％）明显增高（P〈0．05）。CD90阳性表达和IGFIR阳性表达呈显著正相关（P〈0．05）。CD90阳性者术后中位生存期为85d，而阴性者术后中位生存期为505d（P〈0．05），IGFlR阳性者术后中位生存期为100d，而阴性者术后中位生存期为408d（P〈0．05）。结论CD90、IGFlR可能与肝癌的发生发展相关。
- 牛坚赵何伟郑苏文严栋梁张业伟
- 关键词：肝细胞干细胞THY-1受体
- 携带沉默IGFIR shRNA和表达Wtp53的重组慢病毒的构建和鉴定被引量：2
- 2007年
- 牛坚李向农黄建韩泽广
- 关键词：小干扰RNA慢病毒
- hIL-10基因修饰骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠排斥反应的影响被引量：4
- 2009年
- 目的研究hIL-10基因修饰的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对大鼠原位异种肝移植排斥反应的影响及机制。方法利用两套管吻合技术行豚鼠对Wistar大鼠的非协调性异种原位肝移植构建模型,按照构建模型过程中处理方式的不同(生理盐水+地塞米松、MSC+地塞米松、hIL-10-MSC+地塞米松)分为空白对照组、MSC组、hIL-10-MSC组。观察受鼠存活时间、肝功能、术后24h移植肝组织IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、IL-15、IL-18及TNF-α的含量及其mRNA表达。结果与空白对照组、MSC组相比,hIL-10-MSC组大鼠生存时间延长、肝功能好转,细胞因子IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、TNF-α表达明显降低,IL-4、IL-10表达显著升高(P<0.05)。结论hIL-10-MSC对移植肝保护作用可能与其抑制IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、TNF-α细胞因子的表达,促进细胞因子IL-4的表达有关。
- 牛坚刘斌张业伟李向农
- 关键词：白细胞介素-10肝移植免疫耐受
