李育阳
- 作品数:93 被引量:662H指数:12
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 脆壁克鲁维酵母KfPDI基因高表达菌株的构建被引量:1
- 2001年
- 通过构建脆壁克鲁维酵母 (Kluyveromycesfragilis)蛋白二硫化物异构酶基因KfPDI强表达单元并克隆到不同类型的酵母载体上转化酵母菌株 ,经筛选得到了带有不同拷贝数KfPDI基因的酵母转化子。酶活性测定结果表明这些转化子中的蛋白二硫化物异构酶表达水平不仅与其KfPDI基因拷贝数有关 ,而且与该基因是否整合入宿主染色体也密切相关。
- 苏燕霍克克赵翔李育阳
- 关键词:PDI基因表达菌株基因工程宿主菌
- 从酵母基因组测序得到的启示被引量:3
- 1997年
- 从酵母基因组测序得到的启示高向东李育阳(复旦大学遗传学研究所,上海200433)关键词酵母基因组计划孤儿基因基因置换反向遗传学酵母基因组计划从1989年1月开始启动,经历了近七年时间,已于1996年1月测完了酿酒酵母(Saccharomycescer...
- 高向东李育阳
- 关键词:酵母基因组计划
- 遗传丰余与酵母后基因组研究被引量:1
- 1998年
- 遗传丰余与酵母后基因组研究潘辉李育阳(复旦大学遗传学研究所,上海200433)关键词酿酒酵母遗传丰余后基因组研究酿酒酵母(以下简称酵母)基因组DNA全序列测定后,人们从中发现了很多DNA重复序列,其中一部分为完全相同的DNA序列。如rDNA与CUP1...
- 潘辉李育阳
- 关键词:酿酒酵母后基因组研究
- 酵母ADH2-SUC2融合启动子的构建及其对基因表达的调控被引量:4
- 1997年
- 将ADH2基因的UAS与带有不同长度缺失上游区的SUC3基因融合,构建成4种具有不同融合启动子的SUC2基因的表达质粒YRD1101.YFD110△9.YFD110△17、YFD110△11。将这些质粒及对照表达质粒YFD26△1.YFD25转化酵母菌Y33,在阻遏与去阻遏培养条件下,对各种转化子所产生的蔗糖酶进行了活性测定和组分分析。结果表明:在葡萄糖去阻遏生长条件下,YFD110△1的启动子组合中UASsuc2和UASADH2对SUC2基因的表达有协同激活作用。在阻遏条件下Y33/YFD110△1与Y33/YFD110△9、Y33/YFD26△1、Y33/YFD25一样,均表达很低的糖基化蔗糖酶,3种去阻遏培养条件比较说明。
- 李蔚李育阳
- 关键词:酵母基因表达
- 一种利用菊芋原料糖化和发酵同步进行生产乙醇的方法
- 本发明属于生物技术领域,具体为一种利用菊芋原料生产乙醇的方法。该方法包括,原料处理:鲜菊芋清洗干净,榨汁,或切片,烘干,磨粉;种子液制备:克鲁维酵母在以菊芋粉或菊芋汁为完全组分的种子培养液中培养;发酵:全菊芋汁或全菊芋粉...
- 刘建平李育阳俞静江佳稀
- 文献传递
- 一种简便的双链DNA测序法被引量:3
- 1996年
- 袁汉英李纹李育阳
- 关键词:DNA双链DNA测序
- 带His-tag的乙肝病毒融合抗原在毕赤氏酵母中的表达被引量:2
- 2005年
- 乙肝病毒融合抗原SpreS1(简称SS1抗原)较S抗原有更强的免疫原性,可望有更好的临床应用前景.为了便于表达产物的纯化,利用化学合成的寡聚核苷酸链和PCR扩增,在SS1基因的5’端和3’端分别融合了6His-EK和6His的编码序列,将其重组质粒pPIC3.5k-6His-EK-SS1、pPIC3.5k-SS1-6His转化毕赤氏酵母菌GS115,筛选鉴定得到的重组酵母工程菌进行诱导培养,然后采用镍离子柱(Ni-NTABasin)纯化表达产物,纯化的蛋白样品经ELISA效价测定、SDS-PAGE和WesternBlot分析,结果表明融合抗原基因6His-EK-SS1和SS1-6His在毕赤氏酵母中均能表达,纯化的产物仍有免疫原性,所用的纯化方法简便有效.
- 胡翔华刘南松吕红袁汉英李育阳
- 关键词:融合抗原毕赤氏酵母乙肝病毒HIS-TAGSDS-PAGE
- 基于体内同源重组的构建遗传工程生物体的方法
- 本发明提供了一种将所需要的、两端带有载体片段同源序列的线性化外源基因表达单元与线性化的特定表达载体共转化特定生物体,通过体内同源重组构建遗传工程生物体的方法,以及用该方法获得的遗传工程生物体及其用途。
- 李育阳陈向岭何炜袁汉英霍克克
- 文献传递
- 利用一步基因中断法构建克鲁氏乳酸酵母leu2突变体被引量:1
- 1994年
- 将克鲁氏乳酸酵母LEU2基因编码区的部分序列用酒酵母的URA3基因替换,然后用此片段转化两株克鲁氏乳酸酵母。通过体内同源重组,部分缺失的外源leu2片段取代下了酵母染色体上的正常的LEU2基因,由此得到leu2的转化子。经对这些转化子在非选择条件下的稳定性测定,没有发现回复子。结果表明,用一步基因中断法成功地建立了稳定的LEU2基因突变体。这为在克鲁氏乳酸酵母中构建有效的宿主-载体系统提供了一个很有用的营养缺陷型选择标记。
- 虞兰兰李育阳
- 脆壁克鲁维酵母LAC4基因的克隆与表达被引量:7
- 1995年
- 在大肠杆菌有E.coli TG1中构建了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis,CBS 397)的基因文库,并通过补偿乳酸克鲁维酵母(K.lactis)lac4-8突变,从该文库中获得了5个β-半乳糖苷酶基因(LAC4)克隆.对该基因结构与功能的初步研究结果表明:(1)该基因也能补偿大肠杆菌的lacZ突变;(2)脆壁克鲁维酵母LAC4基因与乳酸克鲁维酵母LAC4基因的物理图谱非常相似;(3)克隆株产生β-半乳糖苷酶的水平明显高于原始菌株;(4)不同克隆株之间受乳糖或半乳糖诱导表达β-半乳糖苷酶水平的差异与该基因5'端非编码区结构保留的程度有关;(5)在LAC4基因5'端非编码区可能存在一个乳糖特异的转录激活区域.
- 霍克克李育阳
- 关键词:基因文库基因克隆