李福洋
- 作品数：37 被引量：102H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金卫生部部属(管)医院临床学科重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 转化生长因子β_1基因转染对胃癌细胞SGC7901体外增殖及凋亡的作用被引量：2
- 1998年
- 转化生长因子β_1(TGF-β_1)是一个较强的细胞生长负调节因子,它可通过自分泌及旁分泌来调节哺乳动物组织细胞的活动,是参与细胞周期调控的重要因子之一.丧失了对TGF-β_1的生长抑制作用,是一些肿瘤发生及发展的关键因素.一些研究表明,TGF-β_1对肺癌,大肠癌等体外增殖有明显的抑制作用.本研究的目的是通过基因转染的手段,将人TGF-β_1基因导入胃癌细胞系SGC7901,试图改变胃癌细胞中TGF-β_1的表达,以观察TGF-β_1对胃癌细胞体外增殖及凋亡的作用.
- 周新民张学庸胡家露惠宏襄李福洋
- 关键词：胃肿瘤转化生长因子Β基因转染细胞凋亡
- 人髓性白血病细胞系U937定向克隆cDNA表达文库的构建及其意义被引量：1
- 2003年
- 本研究的目的是构建髓性白血病U937细胞系表达型cDNA文库 ,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。提取U937细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5′端 ;XhoⅠ酶切后 ,丙烯葡聚糖凝胶 S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与λZAP表达载体连接 ,包装蛋白包装后建成cDNA文库 ;取出 1μl倍比稀释感染大肠杆菌XL1 Blue MRF′ ,测定文库大小、重组率 ;随机挑取 10个噬斑 ,在ExAssist辅助性噬菌体的作用下 ,释放出PBK CMV噬菌粒 ;感染大肠杆菌XLOLR ,铺于卡那霉素抗性的LB平板 ;挑取克隆 ,37℃震摇过夜 ;抽提质粒 ,经EcoRI和XhoI酶切后 ,初步确定片段的大小及多样性。结果 :构建成含 2 .87× 10 6重组子的U937细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.7kb。结论 :所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。
- 陈刚张王刚付杰曹星梅赵万红赵爱志韩月恒李福洋刘新平药立波
- 关键词：U937细胞系CDNA表达文库
- 靶向性DNA甲基化酶在pET32a原核表达载体中的表达和鉴定
- 2008年
- 目的:在pET32a原核表达载体中表达融合myc-6his标签的靶向性甲基化酶B1-3a并进行鉴定。方法:以含有B1-3a基因的pcDNA4.0-B1-3a-myc-6his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc-6his标签序列的目的区段B1-3a,然后克隆入表达载体pET32a;以SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中在分子量43kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带,该条带可被6his标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶B1-3a的原核表达载体,靶向性甲基化酶能够在pET32a中成功表达。
- 吴琳邢克飞张治国张健刘新平药立波李福洋
- 关键词：DNA甲基化酶基因靶向性
- 变形链球菌葡聚糖结合蛋白B的纯化被引量：3
- 2002年
- 目的 :从变形链球菌S .mutansIngbritt (serotypec)培养液上清中纯化葡聚糖结合蛋白B。方法 :SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析。结果 :纯化出约 10 μg具有葡聚糖结合特性的GbpB蛋白。结论 :通过SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析纯化出变链菌葡聚糖结合蛋白B。
- 苏凌云吴补领李福洋卫克文
- 关键词：变形链球菌层析纯化
- 变形链球菌葡聚糖结合蛋白A真核表达质粒pcDNA3.1/GBD在哺乳动物细胞中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 观察变形链球菌葡聚糖结合蛋白A(GbpA)的葡聚糖结合区 (GBD)真核表达质粒pcDNA3 1 GBD在哺乳动物细胞COS_7的表达情况。方法 通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3 1 GBD ,通过脂质体转染法将其转染至COS_7细胞 ,通过免疫组化SABC法检测其在COS_7细胞的表达。结果 pcDAN3 1 GBD质粒转染的细胞质呈棕黄色染色 ,胞核无着色 ,pcDAN3 1空载体转染的细胞质及胞核无着色 ,空白对照组也无着色。结论 质粒pcDAN3 1 GBD转染COS_7后能够在细胞内翻译、表达 ,表达的蛋白质位于细胞质中 ,可与抗GbpA抗体特异性结合 ,具有抗原性 。
- 苏凌云吴补领李福洋陆群
- 关键词：变形链球菌真核表达质粒哺乳动物
- ^(131)I-angiostatin在荷瘤小鼠体内的分布及放射受体显像被引量：15
- 2002年
- 本实验研究131I- angiostatin在荷Lewis肺癌C-57小鼠体内的分布,并进行放射受体显像,为临床应用提供依据。Angiostatin用氯胺-T法行131标记后,尾静脉注入荷肺癌C-57小鼠体内,24、48、96、144h后进行放射受体显像,并于48、96、144h分批处死实验小鼠,测定心脏等11种脏器和肿瘤组织的单位重量放射性比值（T/NT）、各组织摄取百分数（％ID/g）。结果发现,131I-angiostatin尾静脉注射后,48h内以全身分布为主,96h后肿瘤部位显像,并呈高度特异性浓集。γ显像结果与体内分布结果一致,SPECT图像质量与T/NT值有关。本研究证实131I-angiostatin可以特异地与肺癌组织内血管内皮细胞上的受体结合,具有导向肺癌组织的作用。
- 袁梦晖徐海峰邵秋菊周润锁张王峰杨建李福洋
- 关键词：血管生成抑制剂肺肿瘤
- 蛋白凝胶基质的制备与基质内的血管生成反应被引量：1
- 2000年
- 利用肝素亲和层析从血清中提取玻璃粘连蛋白 (vitronectin) ,以硫酸铵沉淀法从血浆中粗提含纤维蛋白原的复合蛋白质组分 ,向血浆蛋白、胎牛血清和DMEM组成的复合成分中加入凝血酶 ,制成蛋白质凝胶 .观察血管内皮细胞在此基质上或在基质中的生长及在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的诱导下形成的血管样结构 .结果表明血管内皮细胞可粘附在此凝胶基质表面正常生长 ,在bFGF的诱导下 ,内皮细胞向胶内迁移、生长并形成管状结构 ,多个管状结构连接。
- 李福洋药立波杨静华
- 关键词：血管生成血管内皮细胞
- K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定
- 2003年
- 目的 构建K5 6 2细胞表达型cDNA文库。方法 提取K5 6 2细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5’端 ,Sephacryl S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与去磷酸化的λgt11噬菌体连接 ,体外包装后建成cDNA文库。取出 1μL倍比稀释感染E .coliY10 90 ,测定文库大小、重组率 ,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果 构建成含 1.0 2× 10 6重组子的K5 6 2细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.3kb。结论 所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。
- 陈刚张王刚付杰李福洋刘新平药立波
- 关键词：K562细胞CDNA文库PCRCDNA免疫治疗
- 提高柱式胶回收试剂盒DNA回收效率的最佳条件被引量：8
- 2002年
- 目的 确定提高柱式胶回收试剂盒 DNA回收效率的最佳条件 .方法 回收的基本步骤遵循试剂盒附带的厂家说明 ,在此基础上 ,改变其中所用试剂的剂量 ,或者添加原试剂盒中没有的试剂 ,并在不同条件组合下分别进行 DNA回收 .电泳后 ,通过比较条带的亮度来比较不同条件下 DNA回收效率的大小 ,逐步确定最佳的胶回收条件 .结果 提高柱式胶回收试剂盒 DNA回收效率的最佳条件为 :切胶要尽量的小 ;每 l g胶用 6 0 0 μL的 S1;溶胶时间 :5 5℃ ,10 min;沉淀时加入 3/ 5总体积的异丙醇和 1/ 10总体积的乙酸钠 (3mol· L- 1 ,p H5 .2 ) ;沉淀时间 2 0 m in;沉淀温度为 2 5℃ (室温 ) ;用 T1液溶解效率高于用水溶 ;溶解时间为 2 0 m in (5 5℃ ) .这些最佳条件中 ,大部分都对原来的条件进行了改良 .结论 应用了改良后的胶回收条件后 ,胶回收的效率提高到原来的3～
- 苏明窦科峰赵爱志李福洋
- 关键词：DNA提纯抗体库
- 远源链球菌可能与细胞分裂相关的新基因ftsK的克隆与序列分析
- 2005年
- 目的 克隆并分析远源链球菌(S .sobrinus)可能与细胞分裂相关的新基因ftsK。方法采用“genomewalkingsystem(基因组步移系统)”克隆远源链球菌可能与细胞分裂相关的新基因ftsK ,与GenBank进行同源性分析,并用蛋白质分析软件分析ftsK的氨基酸序列。结果 所克隆的新基因由2 10 0个碱基组成,编码6 99个氨基酸。用GOR4软件对S .sobrinusftsK的二级结构预测,显示其主要由α螺旋和无规卷曲组成,另有小部分伸展线,但无β折叠,在其N末端有一跨膜区。对氨基酸序列进行保守区分析,氨基酸335～5 30序列具有ftsK SpoⅢE保守序列,同源性分析,除N末端2 2 6个氨基酸外,其余氨基酸序列与大肠杆菌细胞分裂蛋白FtsK的C末端2 3序列同源,2 17～6 35氨基酸与枯草杆菌SpoⅢE的C末端同源。结论 通过“基因组步移系统”克隆出的新基因可能与远源链球菌细胞分裂蛋白FtsK相关。
- 苏凌云吴补领李福洋张文红范继红
- 关键词：细胞分裂克隆
