冼静雯
- 作品数：3 被引量：24H指数：2
- 供职机构：深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 淡水小龙虾主要过敏原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫活性鉴定被引量：18
- 2011年
- 目的:克隆、表达淡水小龙虾肌肉中主要过敏原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫活性进行鉴定。方法:根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的高度保守性设计简并引物,通过RT-PCR克隆出淡水小龙虾虾肉中过敏原tropomyosin的全长基因。将该基因与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经诱导异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni2+亲和层析柱纯化后,用Western blot检测该重组蛋白的免疫活性。结果:序列分析显示该基因包括一个编码284个氨基酸的开放阅读框,与已知虾、蟹、龙虾等的过敏原tropomyosin基因有较高同源性(>80%)。根据过敏原的命名规则,将其命名为Proc 1,并提交GenBank数据库,登录号为FJ769183。重组小龙虾tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,Western blot检测结果显示该重组蛋白具有良好的免疫活性。结论:研究成功表达了具有免疫活性的淡水小龙虾原肌球蛋白,为虾过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 黄素文杨文潮朱海王建峰倪健波吕志平冼静雯刘志刚
- 关键词：淡水小龙虾原肌球蛋白免疫活性
- 河虾泛过敏原tropomyosin克隆、表达纯化及免疫学鉴定
- 目的淡水小龙虾(Procambarus clarkii)是重要的食物过敏原,克隆、表达淡水小龙虾中变应原原肌球蛋白(tropomyosin),并对其免疫学特性进行鉴定。方法根据甲壳类的泛过敏原tropomyosin基因的...
- 冼静雯刘志刚
- 文献传递
- 小麦和荞麦过敏原的分离与免疫学特性初步鉴定被引量：6
- 2008年
- 为了提取、分离小麦(Triticum aestivum)和荞麦(Fagopyrum esculentum)的主要过敏原并对其免疫学特性进行鉴定,以磷酸盐缓冲液(PBS)制备小麦和荞麦总蛋白粗提液,通过SDS-PAGE分析总蛋白组成,利用麦类食品过敏患者血清中的IgE能特异性结合过敏原的特性,通过免疫印迹(Western-Blotting)鉴定其中的过敏原成分,然后用离子交换层析(DE-52)对总蛋白进行初步分离,并用Western-Blotting鉴定分离后组份的免疫学特性。SDS-PAGE分析显示,小麦蛋白条带共有18条,其中主要条带有12条(55、42、39、36、29、27、23、21、18、15、12、9 kD);荞麦蛋白条带共有17条,其中主要条带有8条(55、44、36、32、22、16、13、10kD)。Western-Blotting鉴定表明,小麦阳性条带有9条(36、32、29、26、23、18、15、12、9 kD),其中23 kD的过敏原特异性最强;荞麦阳性条带有5条(55、36、32、292、2 kD),其中22 kD的过敏原特异性最强。DE-52阴离子交换层析分离后经Western-Blotting分析显示,分离后过敏原的相对含量均有显著提高,且依然具有较强的免疫学活性,如经纯化后荞麦22 kD的过敏原相对含量由10.73%提高到21.07%。初步鉴定出小麦的主要过敏原为23 kD蛋白,而荞麦的主要过敏原为22 kD蛋白。
- 冼静雯吴海强简晓莉刘志刚
- 关键词：小麦荞麦免疫学特性
