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氧化葡糖杆菌sndh-sdh基因簇的克隆表达被引量：1: 2012年; 目的:从氧化葡糖杆菌H763中克隆sndh-sdh基因簇,在大肠杆菌和氧化葡糖杆菌621H中分别表达山梨酮脱氢酶-山梨糖脱氢酶(SNDH-SDH),并检测其活性。方法与结果:以氧化葡糖杆菌H763基因组DNA为模板,PCR扩增包括启动子、结构基因及终止序列在内的sndh-sdh基因簇,回收3533 bp的扩增产物,连入pMD18T载体,转化至大肠杆菌DH5α中表达;以山梨糖或木糖为底物,DCIP法检测菌体裂解液,DCIP检测液颜色由蓝绿色变为黄色,表明大肠杆菌表达产物具有脱氢酶活性。构建pBBR1MCS2-sndh-sdh载体,通过接合转移导入氧化葡糖杆菌621H,重组葡糖杆菌在以山梨醇或山梨糖为底物的培养基中培养,采用薄层层析检测法检测其培养上清中的代谢产物,层析板上显示了2-酮基-L-古龙酸斑点。结论:重组大肠杆菌DH5α和氧化葡糖杆菌621H中均表达了有脱氢酶活性的SNDH-SDH。; 侯伟熊向华陈微微汪建华舒伟袁志刚张惟材; 关键词：山梨糖脱氢酶 2-酮基-L-古龙酸

小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析被引量：2: 2012年; 克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc。报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48 h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况。构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性。成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性。; 陆俊佳袁志刚许淑茹廖明赖青鸟畅荣妮袁广之侯伟舒伟; 关键词：TIE2 启动子

富钟瘰螈和广西瘰螈泄殖系统研究被引量：3: 2012年; 用解剖学技术研究和比较了富钟瘰螈Paramesotriton fuzhongensis和广西瘰螈Paramesotriton guangxiensis的泄殖系统。结果显示两种瘰螈的泄殖系统基本相同,仅生殖腺在颜色和形状上稍有差异。它们具有后位肾,雄螈肾脏由副睾肾和尾肾组成。但雄螈尾肾发出的多条集尿管并不通往后位肾管而是向后汇合成副尿管通往泄殖腔。后位肾管主要起输精作用,而副尿管则负责输尿。结果揭示雄性泄殖管道有功能分离的趋势,这在两栖类中处于较高进化水平。; 马军胡启平方玲陆俊佳侯伟袁志刚; 关键词：两栖动物泄殖系统解剖学

一种促进酮古龙酸菌生长和产酸的方法: 本发明提供了一种促进酮古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare)生长和产酸的方法。通过在酮古龙酸菌培养基中添加营养因子硫辛酸，能够提高酮古龙酸菌的生长速度和产酸能力，从而达到用单菌发酵的方法实现糖酸转化...; 熊向华张惟材汪建华韩双侯伟; 文献传递

小鼠载脂蛋白E基因的组织表达谱分析被引量：6: 2013年; 目的:探讨小鼠载脂蛋白E(apoE)基因的组织表达特点。方法:提取小鼠的肝、脑和心等17个组织的RNA,采用RTPCR的方法对apoE基因在上述组织中的表达进行研究。结果:apoE基因在肝组织表达最强,其次是脊髓和脑,肺、肾、心、脾、胸腺、小肠、胃、膀胱、血液、肾上腺、子宫、胰腺和主动脉也有不同程度的表达,但在腹肌中几乎不表达。结论:小鼠的apoE基因组织表达谱与人的apoE基因组织表达谱有较高的一致性,与猪的相比差异也不大。; 赖青鸟畅荣妮袁广之马军杨益金陆俊佳侯伟舒伟袁志刚; 关键词：小鼠载脂蛋白E 组织表达谱

山梨糖脱氢酶和山梨酮脱氢酶及其应用: 本发明提供氧化葡糖杆菌CGMCC No.1.637的山梨糖脱氢酶和山梨酮脱氢酶，其氨基酸序列分别如SEQ ID No.2和4所示。本发明还提供编码上述蛋白的基因或基因簇。本发明将带自身调控序列的SNDH-SDH基因簇连入...; 张惟材熊向华汪建华葛欣陈微微侯伟; 文献传递

医学遗传学教学优化路径探讨: 2019年; 本文论述医学遗传学教学优化路径,提出优化课程内容、充分利用教学资源、多种教学方法相结合、丰富实验教学内容、建立多层次的考核制度、提高教师素质等策略,以提高医学遗传学教学效果。; 吴华裕方玲李晓龙侯伟胡启平; 关键词：医学遗传学教学

人与鼠源内皮抑制素不同标签重组蛋白的表达纯化及活性分析被引量：1: 2014年; 根据文献报道和NCBI数据库确定人源内皮抑制素(HE)和鼠源内皮抑制素(ME)DNA序列,以DNA合成法分别获得长度为554 bp的人源内和长度为565 bp的鼠源内皮抑素基因;分别构建携带谷胱甘肽巯基转移酶(GST)表达标签的原核表达质粒pGEX-4T1-HE和携带硫氧还蛋白A(TrxA)表达标签的原核表达质粒pET-32a-ME,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得不同表达标签的HE、ME重组蛋白.最后通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验验证重组蛋白的抗血管生成活性.结果表明,构建了人与鼠源内皮抑制素基因不同标签表达载体,在大肠杆菌中成功诱导表达.获得具有活性的人与鼠源ES重组蛋白.纯化复性后的重组蛋白能明显抑制新生血管的生长.GST和TrxA标签对增进重组ES可溶表达没有显著差异,两组标签的重组蛋白都主要存在于包涵体内.; 杨益金陆俊佳覃霞畅荣妮赖青鸟华荣方玲吴华裕侯伟吴飞翔谢彤袁志刚舒伟; 关键词：内皮抑素 DNA序列纯化

大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定被引量：3: 2014年; 目的：研究大鼠乳鼠腹主动脉血管内皮细胞的培养与鉴定方法。方法：取出生5~7d左右的大鼠乳鼠的腹主动脉血管,用组织块法在含20%胎牛血清及内皮细胞生长添加剂和肝素的DMEM培养基中培养,倒置相差显微镜观察内皮细胞形态和生长特征,免疫荧光方法进行血管内皮细胞Tie2相关抗原的鉴定。结果：来自于大鼠乳鼠腹主动脉的血管内皮细胞在改良的培养基中进行体外培养,能够保持增殖和传代的能力,且Tie2抗原鉴定呈阳性。结论：成功分离大鼠乳鼠腹主动脉组织并且获得体外原代培养大鼠乳鼠腹主动脉内皮细胞。用组织培养方法可以获得较满意的血管内皮细胞。; 侯伟魏红玉罗彦彦许淑茹陆俊佳畅荣妮舒伟; 关键词：血管内皮细胞细胞培养 TIE2

一种促进酮古龙酸菌生长和产酸的方法: 本发明提供了一种促进酮古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare)生长和产酸的方法。通过在酮古龙酸菌培养基中添加营养因子硫辛酸，能够提高酮古龙酸菌的生长速度和产酸能力，从而达到用单菌发酵的方法实现糖酸转化...; 熊向华张惟材汪建华韩双侯伟

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侯伟