陆俊佳 作品数:15 被引量:22 H指数:3 供职机构: 南宁市第二人民医院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 南宁市科学研究与技术开发计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
小鼠TIE2基因启动子的克隆及转录活性分析 被引量:2 2012年 克隆小鼠TIE2基因的启动子并分析其转录活性。设计并合成引物,以小鼠肝脏组织DNA为模板,巢式PCR扩增小鼠TIE2基因启动子区。将扩增获得的系列截短片段克隆入荧光素酶(Luc)报告基因表达载体pGL3-Basic中,构建系列启动子区转录活性报告质粒pGL3-TIE2-Luc。报告质粒与内参质粒共转染SVEC4-10、NIH3T3、HUVEC及NIT-1细胞系,48 h后收获细胞检测双荧光素酶的表达情况。构建的pGL3-TIE2-Luc系列报告质粒经过酶切鉴定及DNA测序分析都显示正确;转染4种细胞系后进行双荧光素酶活性检测的结果表明,TIE2基因启动子区域(-2056-+1)具有较强的转录活性。成功构建小鼠TIE2基因启动子报告质粒,证实TIE2基因上游区域(-2056-+1)具有较强的启动子活性。 陆俊佳 袁志刚 许淑茹 廖明 赖青鸟 畅荣妮 袁广之 侯伟 舒伟关键词:TIE2 启动子 脊髓小脑性共济失调DNA规范化检测流程的建立 2011年 目的探讨建立遗传病检测规范化的实验流程,以避免因实验流程不规范造成的失误。方法以脊髓小脑性共济失调3型(spinocerebellar ataxia type 3,SCA3)为例,应用PCR和测序等技术检测其基因型,并对标本采集、结果诠释、保存和个人遗传信息的保护等方面做了详细的描述。结果所检测的6个家系21例患者的CAG均出现异常扩增,他们的基因型与临床诊断吻合。结论遗传检测实验流程的规范化在受检者的基因隐私得到保护的情况下,不仅可以作为某些疾病诊断的依据,还能综合评估受检者的患病风险程度,对于疾病的早期预防具有重要积极的意义。 丁晔 谭建强 华荣 王进 罗曼 舒伟 陆俊佳 袁志刚关键词:脊髓小脑性共济失调 DNA检测 富钟瘰螈和广西瘰螈泄殖系统研究 被引量:3 2012年 用解剖学技术研究和比较了富钟瘰螈Paramesotriton fuzhongensis和广西瘰螈Paramesotriton guangxiensis的泄殖系统。结果显示两种瘰螈的泄殖系统基本相同,仅生殖腺在颜色和形状上稍有差异。它们具有后位肾,雄螈肾脏由副睾肾和尾肾组成。但雄螈尾肾发出的多条集尿管并不通往后位肾管而是向后汇合成副尿管通往泄殖腔。后位肾管主要起输精作用,而副尿管则负责输尿。结果揭示雄性泄殖管道有功能分离的趋势,这在两栖类中处于较高进化水平。 马军 胡启平 方玲 陆俊佳 侯伟 袁志刚关键词:两栖动物 泄殖系统 解剖学 小鼠载脂蛋白E基因的组织表达谱分析 被引量:6 2013年 目的:探讨小鼠载脂蛋白E(apoE)基因的组织表达特点。方法:提取小鼠的肝、脑和心等17个组织的RNA,采用RTPCR的方法对apoE基因在上述组织中的表达进行研究。结果:apoE基因在肝组织表达最强,其次是脊髓和脑,肺、肾、心、脾、胸腺、小肠、胃、膀胱、血液、肾上腺、子宫、胰腺和主动脉也有不同程度的表达,但在腹肌中几乎不表达。结论:小鼠的apoE基因组织表达谱与人的apoE基因组织表达谱有较高的一致性,与猪的相比差异也不大。 赖青鸟 畅荣妮 袁广之 马军 杨益金 陆俊佳 侯伟 舒伟 袁志刚关键词:小鼠 载脂蛋白E 组织表达谱 血清Cys C及其+73、-82位点基因多态性与广西壮族人群代谢综合征发病的关系 2017年 目的探讨血清胱抑素C(Cys C)及其+73和-82位点基因多态性与广西壮族人群代谢综合征(MS)发病的关系。方法选择壮族MS患者和汉族MS患者各100例(分别为壮族MS组和汉族MS组),同期体检健康的壮族和汉族志愿者各100例(分别为壮族健康组和汉族健康组)。采用免疫比浊法检测各组血清Cys C、肌酐(Cr),聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测Cys C+73、-82位点基因多态性。结果血清Cys C、Cr水平:壮族MS组均高于壮族健康组,汉族MS组均高于汉族健康组(P均<0.01);壮族MS组与汉族MS组比较、壮族健康组与汉族健康组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。血清Cys C与Cr水平呈正相关(r=0.634,P<0.01)。四组Cys C+73、-82位点等位基因频率两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论广西壮族MS患者血清Cys C水平升高,可反映患者的肾功能状态;Cys C+73、-82位点基因多态性可能与MS的发病及民族情况均无关。 俞开敏 杨兰 陆俊佳关键词:代谢综合征 胱抑素C 壮族 广西地区壮族和汉族冠心病患者胱抑素C水平及其基因多态性的比较研究 被引量:1 2017年 目的探讨广西地区壮族冠心病患者血清中胱抑素C(Cys C)水平及其基因位点+148 G/A和-82 G/C的多态性与同地区汉族冠心病(CHD)患者及两个民族正常人的不同。方法采用免疫比浊法检测壮族、汉族CHD患者和壮族、汉族正常个体(各100例)血清中Cys C水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测Cys C基因位点+148和-82的多态性,并分析上述数据和临床资料。结果①两组CHD组血清中Cys C水平和临床资料与两组正常组间的差异有统计学意义(P值均<0.05);②四组中Cys C基因位点+148和-82等位基因分布频率符合H-W群体遗传平衡法则(P值均>0.05),具有群体代表性。CHD组Cys C基因+148和-82位点不同基因型分布频率较同民族正常组虽有差异,但差异均无统计学意义(X^2=0.760~2.090,P>0.05);③CHD病组血清中Csy C水平与Cr呈正相关(r=0.597,P<0.001)。结论 Cys C基因位点+148和-82的多态性与广西地区的壮族、汉族CHD相关性需作进一步研究,但肾损伤引起的高Cys C血清水平可能是广西地区壮族、汉族CHD患者的一个危险因素。 黄生金 郑利平 陆俊佳 朱旭关键词:胱抑素C 基因多态性 壮族 冠心病 广西地区胱抑素C及其单核苷酸多态性与冠心病的关系 被引量:1 2017年 目的探讨广西地区胱抑素C(Cys C)水平及其基因位点+73A/G和-82G/C多态性与冠心病(CHD)的相关性。方法选择壮族CHD患者、壮族体检健康者(壮族正常对照组)、汉族CHD患者和汉族体检健康者(汉族正常对照组)各100例,采用免疫比浊法检测血清Cys C水平,聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)检测Cys C+73A/G和-82G/C位点的基因多态性,同时收集一般临床资料。结果CHD组与同民族正常对照组之间血清Cys C水平及一般临床资料差异均有统计学意义(P<0.05);CHD组Cys C+73A/G位点基因型频率与同民族正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且GG基因型的CHD患者Cys C水平明显低于AG和AA型(P<0.05),而AG与AA基因型之间差异无统计学意义(P>0.05)。CHD组血清Cys C水平与肌酐(Cr)水平、Cys C+73A/G基因位点呈正相关(r=0.60,P<0.01;r=0.42,P<0.01)。结论 CHD患者肾功能下降引起的Cys C水平升高掩盖了Cys C+73A/G基因多态性所致的低Cys C水平。Cys C+73A/G基因多态性所致的低Cys C水平可能是广西地区人群CHD的易感因素。 黄胜贤 郑利平 杨兰 陆俊佳 朱旭关键词:胱抑素C 基因多态性 汉族 壮族 冠心病 脂联素及其基因单核苷酸多态性与广西壮族代谢综合征的相关性研究 被引量:2 2017年 目的探讨脂联素(APN)及其基因位点+45、+276和-11377的单核苷酸多态性与广西壮族代谢综合征(MS)的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测壮族MS组、壮族健康组、汉族MS组和汉族健康组(各100例)血清中APN浓度,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测APN基因位点+45T/G、+276G/T和-11377C/G的多态性。结果 (1)较同民族健康组,两个民族的MS组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和APN均显著降低,而BMI、空腹血糖(FPG)、收缩压、舒张压、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)壮族、汉族MS组APN+45基因位点的TG和GG基因型频率明显比同族健康组升高,差异有统计学意义(χ2=14.319,P=0.001;χ2=11.631,P=0.003)。壮族、汉族MS组的APN+276位点TG和GG基因型明显高于同族健康组,差异有统计学意义(χ2=25.058,P=0.000;χ2=25.425,P=0.003)。4组的APN-11377位点绝大部分是野生型,虽等位基因分布频率略有差异,但差异均无统计学意义(P>0.05);(3)两个MS组中APN+45位点为TT基因型的患者血清APN水平显著高于基因型为TG和GG型的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。APN+276位点为GG型的患者血清APN水平明显高于基因型为GT和TT型的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 APN+45位点G基因型和+276位点T基因型导致血清中APN水平降低可能与广西地区壮族和汉族MS发生有相关性。 郑利平 杨兰 陆俊佳 朱旭关键词:脂联素 基因多态性 壮族 代谢综合征 脂联素及其基因多态性与广西壮族代谢综合征的相关性研究 郑利平 黄生金 杨兰 黄胜贤 马升俊 颜新 陆俊佳 曾江辉 宋启灵 朱旭 该项目是2012年南宁市科技局科技技术开发课题,合同编号是20123135。项目通过聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性( PCR-RFLP)技术检测广西壮族、汉族的代谢综合征患者(MS)和壮族、汉族健康人群各100...关键词:关键词:代谢综合症 脂联素 人与鼠源内皮抑制素不同标签重组蛋白的表达纯化及活性分析 被引量:1 2014年 根据文献报道和NCBI数据库确定人源内皮抑制素(HE)和鼠源内皮抑制素(ME)DNA序列,以DNA合成法分别获得长度为554 bp的人源内和长度为565 bp的鼠源内皮抑素基因;分别构建携带谷胱甘肽巯基转移酶(GST)表达标签的原核表达质粒pGEX-4T1-HE和携带硫氧还蛋白A(TrxA)表达标签的原核表达质粒pET-32a-ME,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得不同表达标签的HE、ME重组蛋白.最后通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验验证重组蛋白的抗血管生成活性.结果表明,构建了人与鼠源内皮抑制素基因不同标签表达载体,在大肠杆菌中成功诱导表达.获得具有活性的人与鼠源ES重组蛋白.纯化复性后的重组蛋白能明显抑制新生血管的生长.GST和TrxA标签对增进重组ES可溶表达没有显著差异,两组标签的重组蛋白都主要存在于包涵体内. 杨益金 陆俊佳 覃霞 畅荣妮 赖青鸟 华荣 方玲 吴华裕 侯伟 吴飞翔 谢彤 袁志刚 舒伟关键词:内皮抑素 DNA序列 纯化