黄建
- 作品数：13 被引量：17H指数：3
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 建立转基因小鼠突变研究模型的研究被引量：1
- 1995年
- 建立转基因小鼠突变研究模型的研究黄建，成国辉，陈耀富，印木泉（上海第二军医大学卫生毒理教研室２００４３３扬州大学农学院生物所扬州２５０００９）本研究的目的是建立一个以ＸｙｌＥ（邻苯二酚氧化酶）基因为诱变靶基因，ｐＥＳｎｘ（１２．７ｋｂ）穿梭质粒为载体...
- 黄建成国辉陈耀富印木泉
- 关键词：转基因小鼠基因突变动物模型
- xylE-ICR转基因小鼠模型体内致突变试验的规范化研究
- 1999年
- 本文通过ＭＮＮＧ作用于ｘｙｌＥＩＣＲ转基因小鼠，按１／１０ＬＤ５０给药，每天１次，连续５ｄ，最后一次给药后２１ｄ，测小鼠肝组织突变率为２１．４６×１０－５，与对照组（＜４．３８×１０－５）比相差极其显著（Ｐ＜０．０１），表明该检测方法可作为规范化程序，对诱变物进行致突变研究的系统分析。
- 杨志峰黄建郑怡文陈耀富印木泉
- 关键词：转基因小鼠致突变
- 乙基亚硝基脲诱导转基因小鼠基因突变的研究被引量：2
- 2001年
- [目的 ]用乙基亚硝基脲 (ENU)进一步验证携带xylE基因的转基因小鼠在体内基因突变研究中的应用价值。 [方法 ]用ENU对转基因小鼠进行诱变处理 (i.p .5 0mg/(kg·d) ,连续 5d)后 ,从脾脏组织DNA中回收带有靶基因xylE的pESnx质粒 ,通过电穿孔法转化大肠杆菌 ,筛选突变体 ,检测突变率 ,并对突变靶基因进行测序分析以确定突变类型。 [结果 ] (1)ENU诱发转基因小鼠脾脏组织xylE基因的突变率为 1 2 48× 10 -4 ,显著高于自发突变率 ;(2 )ENU诱发基因突变的类型包括碱基的颠换、转换以及由于碱基的缺失或插入所引起的移码突变。 [结论 ]该转基因小鼠是检测体内基因突变的一种有效的动物模型。
- 郑怡文印木泉黄建杨志峰陈耀富陈建泉成国祥徐少甫
- 关键词：小鼠转基因致突变
- 携带xylE的转基因小鼠的制备被引量：3
- 1999年
- 建立了一种新的转基因小鼠致突变检测模型．选用ｘｙｌＥ基因作为诱变的靶基因，以ｐＥＳｎｘ穿梭质粒作为载体，通过显微注射法将线状ｐＥＳｎｘ导入ＩＣＲ小鼠制备Ｇ０小鼠．将显微注射后存活的３５２／５４９枚受精卵分别移入２４只受体雌鼠的输卵管中，共产生４１只仔鼠，存活３０只（Ｇ０），经过整合检测，检测出转基因小鼠１７只，阳性率为５７％．从中筛选出２只完整整合了ｐＥＳｎｘ的转基因小鼠作为首建鼠（ｆｏｕｎｄｅｒｍｏｕｓｅ）进行繁育，目前已繁殖到第三代（Ｇ３）．经过逐代整合检测，证明转入的基因可稳定地遗传．上述结果表明已成功地制备了在基因组中整合了ｐＥＳｎｘ质粒携带ｘｙｌＥ的转基因小鼠．
- 黄建印木泉陈耀富陈耀富成国祥陈建泉邱信芳成国祥
- 关键词：小鼠转基因
- 突变靶基因xylE转基因小鼠被引量：4
- 1997年
- 本研究以ｐＥＳｎｘ穿梭质粒为载体，选用恶臭假单孢杆菌ＴＯＬ质粒上的ｘｙｌＥ基因作为突变靶基因组构建的重组构件，经微注射导入ＩＣＲ小鼠５４９枚受精卵雄原核，将存活的３５２枚卵移入２４只假孕鼠输卵管内，７只妊娠，共产仔４１只，其中７只死胎，出生后死亡４只，３０只存活。注射卵存活率为６４％（３５２／５４９），出生率为１１．６％（４１／３５２）。存活鼠经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，整合率为５７％（１７／３０）。在整合阳性鼠中选择了杂交信号较强的２只当代公鼠，通过回收载体和转化试验，结果表明整合基因完整，具有转化的功能，由此，建立了突变靶基因ｘｙｌＥ转基因小鼠模型。
- 陈建泉成国祥成勇徐少甫黄建印木泉
- 关键词：靶基因突变E基因转基因小鼠孕鼠假孕
- xylE转基因小鼠的实验研究及转基因小鼠致突变检测模型的应用现状被引量：3
- 1997年
- 黄建陈建泉等
- 关键词：转基因小鼠致突变性动物模型
- 携带xylE的转基因小鼠突变检测模型的建立
- 黄建
- 关键词：转基因小鼠靶基因致突变
- 携带 xylE 的转基因小鼠致突变检测模型的建立及用于常规测试现状被引量：3
- 1997年
- 携带ｘｙｌＥ的转基因小鼠致突变检测模型的建立及用于常规测试现状印木泉黄建（第二军医大学卫生毒理教研室，上海２００４３３）人们建立了许多测试系统来检测突变以及最终导致突变的分子事件．常用的有：细菌系统，细胞系统和啮齿类动物系统等．然而，离体的实验系统难...
- 印木泉黄建
- 关键词：转基因肿瘤
- xylE转基因小鼠的繁育及其纯合子的筛选被引量：2
- 2003年
- 目的 进行转基因小鼠的繁育与纯合子转基因小鼠的筛选。方法 选用致突变xylE转基因原代小鼠 31号和 9号进行传代 ,自F2 起采用全同胞交配繁育至F3。结果 转基因能遗传且各世代转基因小鼠表型无异常 ,亦未见近交衰退现象。经不同世代载体回收和转化检验表明 ,靶基因功能未因世代传递而改变 ,并从 31号系的F3中筛选出一只纯合雄鼠 ,经与非转基因雌鼠交配所产 4窝 2 8只小鼠 ,PCR Southern检测均呈阳性 ,证实为一纯合子。结论 xylE转基因能遗传 ,4个世代内便筛选出纯合子小鼠 ,极大地缩短了育种周期。
- 陈建泉罗金平黄建成国祥曹洁印木泉徐少甫
- 关键词：转基因小鼠纯合子染色体
- xylE 转基因小鼠突变检测系统的建立被引量：3
- 1999年
- 为了验证ｘｙｌＥ转基因小鼠能否用于体内基因突变检测，首先对从小鼠体内回收目的质粒的影响因素（电压，基因组ＤＮＡ浓度和Ｔ４连接酶浓度）进行了研究，结果发现用ＨｉｎｄⅢ酶切后的０．５μｇ组织ＤＮＡ在４００μＬ反应体系中以０．３ＵＴ４连接酶连接后，以１６ｋＶ，２００Ω，２５μＦ的参数用电穿孔法转化大肠杆菌ＤＨ１０Ｂ菌株是回收目的质粒效率最高的方法．在此基础上观察了致突变剂ｎ－甲基－ｎ′－硝基－ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）对转基因小鼠（ｉｐ１０ｍｇｋｇ－１ｄ－１，连续４ｄ）外周血正染红细胞（ＮＣＥ）的微核率和肝组织中ｘｙｌＥ基因的自发和诱发突变率，并对突变的ｘｙｌＥ基因进行序列分析，结果ＭＮＮＧ使外周血ＮＣＥ的微核率从（２．２０±１．４８）‰上升为（６．８０±２．２８）‰（Ｐ＜０．０１），ｘｙｌＥ基因的突变率从小于１／２２８４３增至４／１８６４１，表明ＭＮＮＧ可诱发转基因小鼠ＮＣＥ微核率和肝组织中ｘｙｌＥ基因突变率显著升高．序列分析显示ＭＮＮＧ诱发的ｘｙｌＥ基因突变主要是单碱基缺失．上述结果表明ｘｙｌＥ转基因小鼠是检测体内基因突变的有效模型．
- 黄建印木泉陈耀富陈耀富成国祥陈建泉邱信芳成国祥
- 关键词：转基因小鼠突变检测系统
