魏璨
- 作品数：15 被引量：28H指数：3
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省博士后基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CaSR表达在大鼠糖尿病性肝硬化损伤和纤维化发生中的作用被引量：9
- 2020年
- 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在糖尿病性肝损伤发生中的作用。方法:本实验分别制备糖尿病大鼠和高糖处理HSC系大鼠肝星形细胞模型。40只Wistar大鼠随机分为正常对照组(Control,n=10),糖尿病组(T1D,STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射,n=30),造模成功后分别在2、4、8周检测大鼠的体重、血糖、血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性,观察形态学和超微结构改变,以及Western blot检测CaSR和肝纤维化相关指标表达的变化。HSC系大鼠肝星形细胞随机分为正常对照组(Control,10%FBS-DMEM+5.6 mmol/L葡萄糖),高糖组(HG,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖下培养48 h)和CaSR抑制剂组(HG+Calhex 231,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖+2.5μmol/L CaSR抑制剂(Calhex 231)下培养48 h,每组n=5)。结果:动物模型中,与正常组相比,糖尿病大鼠体重减轻,血糖、AST和ALT显著升高,CaSR和胶原Ⅰ(COⅠ)、胶原Ⅲ(COⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白表达上调;细胞模型结果与大体基本一致,与正常组相比,高糖组细胞分化标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达增加,表明HSC分化成肌成纤维细胞,细胞外间质(ECM)主要成分COⅠ和COⅢ表达增加,降解ECM的关键酶MMP9同样增加,Calhex 231可减轻上述变化。结论:CaSR表达上调参与大鼠糖尿病性肝损伤和纤维化的发生。
- 邵毅英范玉琪李思葳赵冰冰邵小婷扈敬徐长庆魏璨
- 关键词：糖尿病肝纤维化
- 白藜芦醇对血管紧张素Ⅱ诱导的成纤维细胞增殖的作用及其机制被引量：2
- 2017年
- 目的研究白藜芦醇(Resv)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导成纤维细胞增殖的作用和机制。方法体外培养小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3),建立AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖模型。采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,Western blot技术检测Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的表达。结果与Control组相比,AngⅡ组NIH/3T3增殖明显,COLⅠ、COLⅢ、MMP-1和TIMP-1蛋白表达均显著增加,且TIMP-1/MMP-1增大;与AngⅡ组相比,加入10、20、30、100μmol/L白藜芦醇(Resv)对AngⅡ引起的NIH/3T3增殖有抑制作用(后期实验选用Resv的浓度为20μmol/L),COLⅠ、COLⅢ、MMP-1和TIMP-1蛋白表达明显减少,且TIMP-1/MMP-1降低;与AngⅡ组相比,AngⅡ预处理组引起的变化趋势同Resv组,强度不如Resv,且两者具有协同作用。结论白藜芦醇和AngⅡ预处理均可抑制AngⅡ引起的成纤维细胞增殖和活化,前者效果优于后者,两者合用效果更佳,其保护作用的机制与减少胶原蛋白的分泌和下调MMP-1与TIMP-1的比值有关。
- 李悠悠王跃虹李鸿珠魏璨徐长庆
- 关键词：精胺乳鼠心肌细胞氧化应激活性氧
- 钙敏感受体在高糖诱导的人眼小梁网细胞损伤中的作用
- 2022年
- 目的:观察钙敏感受体(CaSR)在高糖(HG)诱导的人眼小梁网细胞(HTMC)损伤中的作用和机制。方法:将HTMC随机分为:对照(control)组(10%胎牛血清-DMEM)、HG组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖)、HG+CaSR激动剂NPS R568组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖+10μmol/L NPS R568)和HG+CaSR抑制剂Calhex231组(10%胎牛血清-DMEM+50 mmol/L葡萄糖+3μmol/L Calhex231),培养72 h。CCK-8法测量不同浓度的葡萄糖刺激下HTMC活力;试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测CaSR、SOD2、凋亡相关蛋白(cleaved caspase-3和Bcl-2)及自噬相关蛋白(ATG7、P62、LC3-I和LC3-Ⅱ)表达;免疫荧光染色观察CaSR细胞定位和表达。结果:葡萄糖浓度为50 mmol/L时,HTMC相对活力由1.00±0.03下降至0.60±0.07(P<0.05);与control组相比,HG使HTMC中CaSR、cleaved caspase-3和P62表达以及MDA含量增加(P<0.05),而SOD活性,SOD2、Bcl-2和ATG7表达,以及LC3-Ⅱ/LC3-I比值下降(P<0.05);NPS R568进一步促进HG诱导的细胞损伤,而Calhex231可减轻上述变化(P<0.05)。结论:CaSR表达参与HG诱导的HTMC损伤,其机制与促进细胞凋亡和氧化应激以及抑制自噬有关。
- 车冰冰孙梦婷王宁宁岑杰李国鹏赵冰冰魏璨
- 关键词：钙敏感受体高糖
- 多巴胺受体(DR2)激活对乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤的保护作用及其机制被引量：7
- 2013年
- 目的:观察多巴胺受体(DR2)激活对乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/再灌注损伤模型,细胞随机分为正常组(Control)、缺氧/再灌注组(H/R)、DR2激动剂组(溴麦角环肽,Bro)、抑制剂组(氟哌啶醇,Hal)。倒置显微镜、透射电镜、流式细胞仪检测细胞凋亡情况;检测细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;RT-PCR和Western blot方法检测心肌细胞促凋亡因子(Cyt C、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Fas及Fas-L)及抑凋亡因子(Bc-l 2)mRNA和蛋白表达。结果:与正常组相比,H/R组细胞凋亡率、LDH活性、MDA含量、促凋亡因子及抑凋亡因子表达均增加,唯有SOD活性降低;与H/R组比较,Bro组可减轻或逆转上述指标的变化;Hal组上述指标变化不明显。结论:DR2激活可抑制缺氧/再灌注所致的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,机制与减少氧自由基有关。
- 魏璨高君陈爱东白淑芝李宏霞柳磊邵洪江彭雪李梅秀徐长庆李鸿珠
- 关键词：乳鼠心肌细胞缺氧再灌注
- 精胺调节POU3F1/PPAR/HMGCS2减轻糖尿病小鼠心肌损伤
- 2021年
- 目的基于RNA-seq对精胺干预的糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)小鼠心肌组织进行转录组分析,探究其心肌保护作用及其相关机制。方法 60只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(CK组),糖尿病心肌病组(DCM组,STZ,60 mg/kg,腹腔注射)和精胺干预组(SPM组,1 mg/(kg·d),腹腔注射),每组20只。饲养至12周,检测各组小鼠血糖、体重、射血分数(ejection fraction, EF)和缩短分数(fractional shortening, FS),并提取小鼠心肌组织的RNA进行转录组学测序,检测差异表达基因(DEGs),筛选其中的转录因子(transcription factors, TF)进行KEGG富集分析,并用Western blot进行验证。结果与CK组相比,DCM组小鼠的血糖显著上升,体重和心脏功能降低;上述指标在SPM组有所改善。RNA-seq结果显示,DCM组与CK组相比,共有373个DEGs,其中有99个表达上调而274个表达下调(其中,HMGCS2变化最为显著);SPM组与DCM组相比,上调253个和下调33个基因的表达。通过对比CK和DCM组的DEGs,筛选到POU3F1等在内的28个TF,KEGG富集分析显示,受其调控的DEGs主要在PPAR等信号通路中显著富集。Western blot结果显示,DCM组POU3F1、PPAR和HMGCS2蛋白表达增加,而SPM抑制上述蛋白表达。结论精胺可减轻糖尿病小鼠的心肌损伤,其机制可能与调节POU3F1/PPAR/HMGCS2有关。
- 李思葳张立车冰冰王宁宁徐长庆魏璨
- 关键词：糖尿病心肌病精胺小鼠RNA-SEQ
- 外源性精胺抑制高尔基体应激减轻高糖诱导的心肌损伤被引量：4
- 2019年
- 目的:观察糖尿病心肌病(DCM)是否有高尔基体应激(GAS)参与及外源性精胺心肌保护作用是否与调控GAS有关。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常对照组(Control),糖尿病组(T1D,STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射)和精胺组(T1D+Sp,精胺5 mg/(kg·d)腹腔注射),饲养12周。H9C2系大鼠心肌细胞随机分为正常对照组(Control,10%的FBS-DMEM培养)、高糖组(HG,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖)和精胺组(HG+Sp,10%FBS-DMEM+40 mmol/L葡萄糖+5μmol/L精胺)。ELISA检测大鼠血清心肌肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT);Western blot测定高尔基体蛋白GOLPH3,GM130以及Cleaved Caspase3蛋白表达;免疫荧光检测GOLPH3细胞定位。结果:动物模型中,与正常组相比,糖尿病组大鼠血糖,血清心肌酶CK-MB和cTnT显著升高明显升高;体重,射血分数(EF)显著降低;心肌超微结构损伤明显(肌丝断裂,润盘消失等);同时GOLPH3和Cleaved Caspase3表达上调,GM130表达下调。细胞模型与大体结果一致,免疫荧光显示高尔基体出现应激性碎片化。外源性精胺处理可显著干预上述改变。结论:给予外源性精胺对糖尿病,诱导的心肌损伤具有干预作用,其机制与减轻高尔基体应激有关。
- 范玉琪王跃虹邵毅英邵小婷扈敬徐长庆魏璨
- 关键词：精胺糖尿病心肌病
- 外源性H_2S恢复老龄大鼠心肌缺血后适应对I/R损伤的缓解作用被引量：2
- 2016年
- 目的探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺血后适应(PC)对老龄大鼠心肌的保护作用及相关机制。方法将青年和老龄大鼠随机分别分为对照组、缺血/再灌注(I/R)组和PC组,老龄大鼠另加Na HS干预组。用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤和PC模型。比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性、MDA含量及H_2S产率;透射电镜检测心肌超微结构;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果无论青年还是老龄大鼠,与对照组比较,I/R降低H_2S产率、SOD活性和CSE表达,增加LDH和CK活性、MDA含量、心肌损伤、细胞凋亡、心肌梗死面积、caspase-3、caspase-9及Bcl-2的表达(P<0.01);与I/R组比较,青年大鼠的PC减轻I/R损伤及细胞凋亡(P<0.01),而老龄大鼠的PC丧失了对心肌的保护作用;外源性H_2S恢复了老龄大鼠的PC对I/R损伤的保护作用。结论外源性H_2S能够恢复老龄大鼠PC对心肌的保护作用,其机制与抗氧化、清除自由基、抑制细胞凋亡有关。
- 李丽娜孙伟铭高君王跃虹魏璨徐长庆李鸿珠
- 关键词：缺血-再灌注损伤缺血后适应老龄大鼠
- 1类多巴胺受体对细胞凋亡的线粒体信号通路的影响被引量：1
- 2013年
- 目的以细胞凋亡的线粒体途径为切入点,探讨1类多巴胺受体(DR1)活性变化对缺氧、复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及可能机制。方法乳鼠心肌细胞以缺氧、缺血清培养2小时,复氧、复血清培养24小时的方法建立心肌细胞缺氧、复氧损伤模型。RT-PCR和Western blotting分别检测Bcl-2、caspase-3、caspase-9和细胞色素C(Cyt c)mRNA和蛋白质的表达;TUNEL、流式细胞仪、MTT检测心肌细胞的凋亡情况;紫外分光光度计检测细胞培养液中LDH、SOD活性和MDA含量;透射电镜观察心肌细胞形态变化。结果与正常组比较,缺氧-复氧组细胞培养液中LDH活性和MDA含量增加,SOD活性降低;心肌细胞凋亡指数增加;心肌细胞超微结构损伤加重;促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达增加,抑凋亡因子(Bcl-2)表达亦增加。与缺氧-复氧组比较,DR1激动剂SKF-38393进一步增加LDH活性和MDA含量,降低SOD活性,增加心肌细胞凋亡指数,加重心肌细胞损伤,上调促凋亡因子表达,下调抑凋亡因子表达;DR1抑制剂SCH-23390对上述指标影响不明显。结论 DR1激活可促进缺氧、复氧诱导的心肌细胞凋亡,其机制与上调线粒体途径有关。
- 高君魏璨陈爱东白淑芝李宏霞彭雪邵洪江徐长庆李鸿珠
- 关键词：缺氧-复氧损伤细胞凋亡心肌细胞
- 大黄提取物对高糖所致心肌成纤维细胞增殖的作用和机制
- 2015年
- 目的观察大黄提取物对高糖引起的心肌成纤维细胞增殖的影响并探讨其可能机制。方法心肌成纤维细胞随机分为正常组、高糖组和大黄提取物处理组(1、2.5、5、7.5、10、20、30和40μg/m L)。用cck-8(cell counting kit-8)试剂盒检测细胞活力,选择大黄提取物的最适浓度。Western blot法检测促凋亡蛋白bax、抗凋亡蛋白bcl-2、胶原蛋白Ⅰ以及cleaved-caspase3的表达。结果与正常对照组相比,高糖组的细胞活力增强,胶原蛋白Ⅰ、bcl-2表达明显增加,bax变化不明显;与高糖组相比,大黄提取物处理组胶原蛋白Ⅰ、bcl-2表达下调,bax和cleaved-caspase 3表达增加。结论大黄提取物可抑制高糖引起的成纤维细胞增殖和活化,其机制与激活线粒体凋亡通路有关。
- 于纯淼王跃虹魏璨徐长庆
- 关键词：高糖心肌成纤维细胞增殖大黄提取物细胞凋亡
- 外源性精胺对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制被引量：2
- 2018年
- 目的:观察外源性精胺对缺氧所致的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧损伤模型(使用pH=6.8的Hank's平衡盐溶液作为细胞培养基,排出氧气,然后在缺氧箱中培养24 h),细胞随机分为正常对照(Control)组、缺氧(Hypoxia)组和精胺干预(Hypoxia+Sp)组。Western blot检测心肌细胞多胺代谢关键酶(ODC、SSAT)蛋白质表达;CCK-8,Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况;光吸收法检测细胞(或培养液)内T-SOD和Caspase-3/-9活性,MDA、GSH含量;DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)生成。结果:与正常组相比,Hypoxia组SSAT蛋白质表达、细胞凋亡率、MDA含量以及细胞内ROS生成增加,而ODC蛋白质表达、SOD活性、GSH含量降低;与Hypoxia组比较,Sp处理可减轻上述指标的变化。结论:外源性精胺可减轻缺氧引起的乳鼠心肌细胞损伤和凋亡,其机制与恢复多胺稳态和清除活性氧有关。
- 袁迪王跃虹袁辉邵毅英范玉琪邵小婷扈敬魏璨徐长庆
- 关键词：精胺心肌细胞活性氧凋亡缺氧乳鼠
