邓飞
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中山大学中山眼科中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- BrdU标记小鼠视网膜祖细胞的研究被引量：1
- 2013年
- 为了探讨BrdU(5-Bromo-2′-deoxyuridine)体外标记视网膜祖细胞(RPCs)的适宜浓度,将不同浓度BrdU(0.2、1、5和10μmol/L)与小鼠孕龄(E)17.5dRPCs共培养48h后,进行增殖或分化培养。用免疫荧光检测BrdU标记百分率及细胞分化潜能,用细胞计数法检测其增殖能力,用乳酸脱氢酶(LDH)法检测其细胞毒性。结果发现,0.2μmol/L BrdU不能明显标记RPCs,而1、5和10μmol/L 3种浓度BrdU均可有效标记RPCs,且三者的标记率相近(P>0.05),1μmol/L BrdU无明显细胞毒性,对RPCs增殖、分化亦无明显影响,而5μmol/L和10μmol/L Br-dU均能抑制细胞增殖,并引起LDH释放增加,说明有明显的细胞毒性,10μmol/L BrdU还会阻碍RPCs向MAP2+神经元方向分化,但对其向GFAP+或glutamine synthetase+神经胶质细胞分化无明显影响。本研究表明,1μmol/L BrdU既能有效标记E17.5RPCs,又无显著毒副作用,是较适宜的浓度。
- 孙雪荣董志章邓飞胡惠玲葛坚
- 关键词：BRDU细胞毒性分化
- 诱导RB细胞重编程为多潜能干细胞的实验研究
- 胡慧玲葛坚陈梦飞邓飞
- 视网膜发育基因Six3表达载体的构建
- 2011年
- 目的:Six3在视网膜发育中起着关键性的调节作用,然而商品化的Six3表达载体尚鲜见,本研究拟以pBaBb-puro为骨架,构建Six3真核表达载体。方法:以新生乳鼠眼cDNA为模板,通过PCR扩增出Six3编码序列,经酶切后,用T4 DNA连接酶将其与pBaBb-puro进行连接,经过转化、筛选后,进行酶切和测序鉴定。结果:经RT-PCR扩增获得了含1002bp的Six3基因编码序列,经过酶切、连接、转化后,挑选12个菌落进行PCR检测,筛查到9个菌落含有重组质粒,对其中2个菌落进一步行酶切和测序鉴定,结果与理论预期完全相符。结论:成功构建了pBaBb-puro-Six3真核表达载体,为进一步研究Six3的功能奠定了基础。
- 孙雪荣葛坚章晓霜邓飞胡惠玲
- 关键词：视网膜
- 定向诱导人Tenon's囊成纤维细胞源iPS细胞分化为视网膜神经节样细胞
- 邓飞刘颖刘玉淳李康寯葛坚
