赵琛
- 作品数：5 被引量：20H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脑源性神经营养因子对无血清培养的神经元保护机制的研究
- 2011年
- 目的探讨在无血清培养条件下脑源性神经营养因子(BDNF)对神经元样细胞存活的影响及其作用机制。方法在无血清条件下培养具有BDNF受体TrkB表达的神经母细胞瘤细胞SY5Y-TrkB,在培养液中单独加入BDNF,或联合加入磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂进行细胞培养,利用细胞活性测定法(MTS)检测活细胞活性。结果与在10%胎牛血清(FBS)培养液中培养的细胞相比,无血清条件下培养24、48 72 h后,SY5Y-TrkB细胞的存活率分别为51%、38%、25%。若细胞在无血清条件下培养24 h,无处理因素的细胞存活率设定为100%,给予BDNF后的细胞存活率为154%;用10μmol/L PI3K抑制剂LY294002预处理1 h,再给予BDNF后的细胞存活率为100%;而应用80μmol/LMAPK抑制剂PD98059预处理1 h,再给予BDNF后的细胞存活率为158%。结论 BDNF通过PI3K信号通路保护SY5Y-TrkB细胞免受无血清培养引起的细胞死亡。
- 谭斐赵琛李桂晨景良郭阳
- 关键词：脑源性神经营养因子酶抑制剂神经母细胞瘤细胞
- 低氧诱导因子-1激活的调节被引量：14
- 2013年
- 低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)是细胞对缺氧反应的关键调节者,能激活100多种与缺氧条件下细胞存活有关的基因转录。它是由α和β两个亚基组成的异源二聚体,而HIF-1α是决定其活性的功能性亚基。HIF-1α的合成主要受PI3K及MAPK通路调节。在常氧条件下,由于氧依赖性的及氧非依赖性的通路HIF-1α被降解,几乎没有活性。当细胞缺氧时,HIF-1α积累,然后通过输入蛋白的转运进入细胞核,与HIF-1β形成HIF-1,后者与辅激活因子一起与靶定DNA结合,从而发挥其转录激活功能。就HIF-1激活的调节作一综述。
- 赵琛谭斐
- 关键词：低氧诱导因子-1
- 硫酸软骨素蛋白多糖抑制神经元轴突生长体外生物模型的建立被引量：5
- 2011年
- 目的利用硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)的生物特性建立抑制神经元生长和轴突再生的体外生物模型。方法将不同浓度CSPG与无生物毒性的德克萨斯红荧光染料混合,取5μl滴在培养板的中心部位,形成边界清楚的红色圆形斑点,称CSPG圆斑(CSPG SPOT)。将神经母细胞瘤SY5Y细胞和小鼠小脑颗粒细胞(CGNs)铺在含有CSPG SPOT的培养板中,48h后观察细胞的生长情况。结果含有1μg/ml和3μg/ml CSPG的SPOT分别使CGNs和神经母细胞瘤SY5Y细胞停止生长、死亡,没有发现细胞的轴突延伸到SPOT上生长。高浓度的CSPG可渗透到SPOT周围区域,使CSPG SPOT周围区域的细胞生长和轴突再生受到抑制。结论该模型可以在体外模拟胶质细胞分泌的CSPG对神经细胞生长的抑制作用,对研究中枢神经系统损伤后神经元的生长和轴突的再生具有广泛的应用前景。
- 谭斐吴晓黎景良李桂晨赵琛郭阳
- 关键词：硫酸软骨素蛋白多糖细胞生长小脑颗粒细胞神经母细胞瘤细胞
- 全反式维甲酸对神经母细胞瘤SY5Y细胞增殖的影响
- 2011年
- 【目的】研究全反式维甲酸(ATRA)对神经母细胞瘤细胞增殖的影响。【方法】神经母细胞瘤细胞SY5Y经全反式维甲酸(ATRA)处理不同时间后(2、4、6 d)分别于显微镜下观察细胞形态学改变及使用MTS方法观察细胞增殖情况。对经ATRA处理4 d的细胞进行溴脱氧尿苷(Brdu)染色观察DNA合成及利用流式细胞仪进行细胞周期分析。【结果】与对照组比较,SY5Y细胞经ATRA处理4 d或6 d后于显微镜下可见明显的轴突延伸,MTS方法显示细胞增殖明显降低。ATRA处理4 d时Brdu染色显示DNA合成减少,利用流式细胞仪对细胞周期的分析表明细胞被阻滞在G1期。【结论】ATRA可抑制神经母细胞瘤细胞增殖。
- 谭斐李桂晨景良赵琛郭阳
- 关键词：全反式维甲酸细胞增殖神经母细胞瘤细胞
- 神经母细胞瘤细胞急性缺氧后不协调类33磷蛋白1和缺氧诱导因子-1α蛋白的表达变化被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨具有神经元特性的神经母细胞瘤细胞在急性缺氧后不协调类33磷蛋白1（Ulip1）与缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达水平的变化.方法 选择具有神经元特性的神经母细胞瘤细胞株KCNR和BE2,将细胞分别置于正常氧浓度（体积分数为20%O2）和缺氧条件下（1%O2）处理4 h,提取蛋白.采用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）定量测定Ulip1和HIF-1α表达.结果 在KCNR和BE2细胞急性缺氧4 h后,HIF-1α表达水平均显著升高,Ulip1的两个异构体Ulip1a和Ulip1b表达水平均降低;其中HIF-1α表达水平在KCNR细胞内升高了1.6倍,在BE2细胞内升高了2.9倍;Ulip1a在KCNR细胞内降低了55%,在BE2细胞内降低了20%;Ulip1b在KCNR细胞内降低了44%,在BE2细胞内降低了13%.结论 Ulip1可能通过影响HIF-1α参与了缺氧诱导的神经细胞损伤及之后的修复过程.
- 谭斐刘静赵琛景良郭阳
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α神经母细胞瘤细胞
