谢飞
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 超滤技术去除重组MUC1-MBP融合蛋白中内毒素的效果评价被引量：3
- 2014年
- 目的:评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白(MUC1-MBP)溶液中内毒素的效果,阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法:选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌,分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6FF疏水层析(C6)(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化,并去除内毒素;采用SDS-PAGE分析蛋白纯度;鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果:SDS-PAGE分析,在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带,Quantity One分析纯度>96%;CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高,但2组比较差异无统计学意义(P>0.05);与CM组比较,CM+超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);与CM+C6组比较,CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低(P<0.01);CM+超滤组与CM+C6+超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素,其中C6对去除内毒素几乎无作用;CM加超滤可有效去除内毒素,超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。
- 王娟谢飞陈潭琇孙霞霞李琼书台桂香
- 关键词：离子交换层析疏水层析超滤技术内毒素
- 转录因子c-Jun调节巨噬细胞TLR7/8和TLR9之间的cross-talk
- 研究目的：TLRs受体是一类模式识别受体,不同类型的微生物来源的配体通过识别不同TLR,激活天然免疫和特异性免疫应答.本课题组前期研究发现,TLR7/8激动剂(R848)不仅能显著提高小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞T...
- 谢飞陈潭秀郭影影张楠楠倪维华台桂香
- 关键词：基因表达C-JUN巨噬细胞
- 重组MUC1-MBP融合蛋白联合R848对小鼠T细胞免疫活性的诱导作用
- 2017年
- 目的:研究MUC1-MBP联合TLR7/8激动剂R848对小鼠T细胞免疫活性的诱导作用,为寻找重组MUC1-MBP融合蛋白的合适佐剂提供实验依据。方法:21只C57BL/6小鼠随机分为对照组(注射生理盐水)、MUC1-MBP+R848组(注射MUC1-MBP+R848)和MUC1-MBP+卡介苗(BCG)组(注射MUC1-MBP+BCG),每组7只。第2次免疫后第4~7天无菌取脾脏组织,测定脾指数;淋巴细胞增殖反应测定各组小鼠的刺激指数(SI);ELISA法测定小鼠脾细胞培养上清中肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平;流式细胞术检测小鼠脾细胞中T淋巴细胞亚群比例。结果:与对照组比较,MUC1-MBP+R848组和MUC1-MBP+BCG组小鼠脾指数均升高(P<0.01),SI升高(P<0.05),TNF-γ水平升高(P<0.05或P<0.01);且MUC1-MBP+R848组小鼠上述指标高于MUC1-MBP+BCG组(P<0.05或P<0.01);IL-4水平略微升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,MUC1-MBP+R848组和MUC1-MBP+BCG小鼠脾细胞中CD3^+细胞、CD4^+细胞和CD8^+细胞比例明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:MUC1-MBP融合蛋白联合R848或BCG均能诱导小鼠倾向于Th1的细胞免疫应答反应,R848是良好的MUC1-MBP候选佐剂分子。
- 孙敏英刘果木接晶谢飞翟瑞萍陈潭秀袁红艳台桂香
- 关键词：肿瘤疫苗佐剂
- 胸腺肽α1诱导MUC1特异性Th2型免疫应答被引量：4
- 2018年
- 目的:采用黏蛋白与麦芽糖结合蛋白融合蛋白(MUC1-MBP)作为特异性抗原,研究胸腺肽α1(Tα1)加强诱导MUC1特异性免疫应答的类型,探讨其作为佐剂应用的可行性。方法:将C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(注射生理盐水)、MUC1-MBP+BCG组(注射MUC1-MBP+BCG)和MUC1-MBP和Tα1组(注射MUC1-MBP+Tα1),分别进行T细胞免疫活性、MUC1特异性抗体效价及亚类、Tα1联合MUC1-MBP抗肿瘤作用检测。第3次免疫后4~7d无菌取脾脏组织,测定脾指数;淋巴细胞增殖反应测定各组小鼠的刺激指数(SI);ELISA法测定小鼠脾细胞培养上清中干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素10(IL-10)的水平及小鼠血清中MUC1特异性抗体水平;第3次免疫后7d,注射黑色素瘤细胞B16-MUC1,观察各组小鼠生存期。结果:与生理盐水组比较,MUC1-MBP+BCG组和MUC1-MBP+Tα1组小鼠脾指数与SI均升高(P<0.05或P<0.01),MUC1特异性SI明显升高(P<0.05)。与生理盐水组比较,MUC1-MBP+BCG组小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-2水平均明显升高(P<0.05);IL-4和IL-10水平均略微升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与生理盐水组比较,MUC1-MBP+Tα1组小鼠脾细胞培养上清中IL-4水平明显升高(P<0.01);IFN-γ、IL-2和IL-10水平均略微升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。MUC1-MBP+Tα1免疫小鼠能够产生抗MUC1特异性抗体且效价随浓度升高而升高。抗体亚型检测,与生理盐水组比较,MUC1-MBP+Tα1组IgG1水平明显升高(P<0.05或P<0.01),IgG2a水平无明显变化。肿瘤预防实验,与生理盐水组比较,MUC1-MBP+BCG组和MUC1-MBP+Tα1组小鼠生存期未见明显差异。结论:MUC1-MBP联合Tα1更倾向于Th2型免疫应答,Tα1可以作为预防性疫苗佐剂使用,不适合治疗性疫苗使用。
- 孙敏英周红月接晶谢飞翟瑞萍陈潭秀袁红艳台桂香
- 关键词：胸腺肽Α1佐剂
- 转录因子c-Jun调节巨噬细胞TLR7/8和TLR9之间的cross-talk
- 研究目的 :TLRs受体是一类模式识别受体,不同类型的微生物来源的配体通过识别不同TLR,激活天然免疫和特异性免疫应答。本课题组前期研究发现,TLR7/8激动剂(R848)不仅能显著提高小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞...
- 谢飞陈潭秀郭影影张楠楠倪维华台桂香
- 关键词：基因表达C-JUN巨噬细胞
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