胡艳芬
- 作品数:3 被引量:25H指数:2
- 供职机构:扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室更多>>
- 发文基金:江苏省“青蓝工程”基金长江学者和创新团队发展计划江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 应用Cre-loxP系统构建伪狂犬病病毒gE/TK双缺失株被引量:12
- 2012年
- 为了构建无报告基因的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE/TK双缺失株,以PRV-JSZ株为亲本毒株,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,先构建出带有loxP位点的rPRV-gE-/GFP,通过Cre重组酶处理后,获得剔除EG-FP的gE单缺失株rPRV-gE-;再以rPRV-gE-为母本,以相同方法构建gE/TK双缺失株rPRV-gE-/TK-。荧光检测和PCR结果显示成功构建了gE单缺失株和gE/TK双缺失株;病毒生长曲线测定可见rPRV-gE-在PK15细胞上的增殖速度与野生株相似,而rPRV-gE-/TK-较为缓慢;rPRV-gE-/TK-对小鼠的半数致死量大于1×105 TCID50,显著高于rPRV-gE-和野生株;缺失株免疫小鼠强毒攻击后能提供80%的保护。这些结果表明以Cre/loxP系统可重复使用构建伪狂犬病病毒多基因缺失株,为研制伪狂犬病病毒基因缺失苗和载体疫苗提供了快速筛选的技术平台。
- 梁苑燕胡艳芬张小荣陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词:伪狂犬病毒GE基因TK基因
- 鹅源坦布苏病毒SHYG株的分离与鉴定被引量:12
- 2013年
- 【目的】分离鹅源坦布苏病毒,并研究其对雏鹅的致病性。【方法】用RT-PCR方法对江苏省3个鹅场送检的产蛋期病鹅样品进行检测;对坦布苏病毒核酸阳性的样品进行病毒分离,测定分离病毒的生物学特性和E蛋白基因序列。【结果】这些样品中坦布苏病毒呈阳性;从病料中分离鉴定一株病毒,命名为SHYG。E蛋白基因序列同源性比对显示其与中国鸭源坦布苏病毒同源性达到99.3%;生物学特性研究表明该病毒可致Vero细胞病变,对小鼠无致病性,接种2周龄雏鹅出现精神沉郁、腹泻、神经症状甚至死亡;组织学变化可见肝脏淤血、胆小管扩张、脂肪变性;肺淤血、炎性渗出及含铁血黄素沉着,脾脏网状内皮细胞空泡化,肾出血,脑充血、胶质细胞增生。【结论】坦布苏病毒SHYG株对雏鹅有较强的致病性。
- 潘金金邹晓艳李鑫宿春虎柴茂姜逸胡艳芬赵国王彦红石火英陈素娟彭大新
- 伪狂犬病病毒gN基因缺失株的构建及其在小鼠上的免疫效力分析被引量:1
- 2014年
- 为了确定伪狂犬病病毒(PRV)gN基因的功能,以PRV-JSZ双基因缺失株rPRV-gE^-/TK^-和疫苗株Bartha K61为亲本株,通过同源重组技术构建这两种病毒的gN缺失株。PCR扩增鉴定和序列分析结果显示成功获得了gN缺失株rPRV-gE^-/TK^-/gN^-和rPRV-Ba-gN^-。与亲本株相比,rPRV-gE^-/TK^-/gN^-在PK15细胞上早期增殖速度较慢,但效价无明显变化;rPRV-Ba-gN^-在PK15细胞上的增殖速度和效价显著降低。rPRVgE^-/TK^-/gN^-和rPRV-gE^-/TK^-的LD_50均大于1×10~6 TCID_50,rPRV-Ba-gN^-的毒力低于Bartha K61。与亲本株相比,gN缺失株免疫小鼠可提供较好的抗体水平和攻毒保护率。PRV gN基因的缺失可进一步降低病毒的毒力,提高免疫保护力。
- 胡艳芬管萌刘开春陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词:伪狂犬病病毒毒力免疫保护