秦玉静
- 作品数:17 被引量:105H指数:7
- 供职机构:山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 高效的酵母完整细胞转化法被引量:12
- 1997年
- 以穿梭质粒PYES2转化酿酒酵母H158,用二硫苏糖醇(DTT)和处理酵母细胞,变性单链鱼精DNA(ssDNA)为质粒DNA的携带体;转化率比普通酵母完整细胞转化法提高200倍,可达8.3×104个转化子/μg质粒DNA。
- 秦玉静刘世利鲍晓明高东
- 关键词:酵母转化基因
- α-乙酰乳酸脱羧酶的基因克隆及在大肠杆菌和酿酒酵母中的表达被引量:11
- 2000年
- 以pUC19质粒为载体,以E. coli JM109为受体,构建了含α一乙酰乳酸脱羧酶(α-ALDC)基因的地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis AS10106的基因文库,得到4800个重组转化子中均含有4~10kb的外源插入DNA片段。从基因文库中筛选到6个阳性克隆,对其中1个克隆的α-乙酰乳酸脱羧酶基因片段进行亚克隆分析表明,该α-乙酰乳酸脱酶基因位于1.6kb的BamHI-EcoRI片段上。对其研究发现,α-乙酰乳酸脱酶基因在大肠杆菌中表达产生的乙酰乳酸脱羧酶在最适反应温度和pH值等与供体菌的酶活相当。利用大肠杆菌和酵母菌穿梭质粒pYES2为载体,可以将α-乙酰乳酸脱羧酶基因引入酿酒酵母中,从而使重组酵母菌株具有降解啤酒发酵中生成的α-乙酰乳酸,减少双乙酰含量的能力。
- 秦玉静高东王祖农
- 关键词:Α-乙酰乳酸脱羧酶基因克隆酿酒酵母基因表达
- 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)α-乙酰乳酸脱羧酶基因克隆、序列分析以及在酿酒酵母中的稳定表达
- α-乙酰乳酸是啤酒发酵中酵母缬氨酸生物合成的中间产物,也是使啤酒产生异味(馊酸味)的双乙酰的前提物,α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase.α-ALDC)能催化双乙酰的前体物α-乙酰...
- 鲍晓明秦玉静郑华军侯爱华扬国墚
- 文献传递
- 嗜杀酵母毒素蛋白活性的平板检测
- 1998年
- 本文介绍一种在平板上直接检测嗜杀酵母产生的毒素蛋白活性的方法,此方法操作简便,可分析不同条件下毒素蛋白对敏感酵母细胞的嗜杀作用.
- 秦玉静高东
- 关键词:嗜杀酵母毒素蛋白生物防腐剂
- 酿酒酵母两种不同嗜杀菌株的比较研究被引量:4
- 1998年
- 以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株SK4(K1型)和ERRI(K2型)为材料,分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性,两株嗜杀酵母具有相互杀死作用,其嗜杀活性与菌体生长有关。SK4和ERRI的嗜杀质粒的比较表明:M1-dsRNA质粒和M2-dsRNA质粒分子量分别为1.7kb和1.5kb,两株菌的L-dsRNA质粒均为4.0kb。用高温和紫外线处理嗜杀酵母,嗜杀活性随之消失,消除菌中的M-dsRNA质粒也相应消失,嗜杀活性的消除率随菌株和消除剂的不同而变化。实验证明两株菌产生的毒素蛋白的最适嗜杀作用条件不同,最适pH和温度分别为4.8、16℃和4.0、22℃,但两种毒素蛋白均对在对数生长期的敏感细胞作用最显著。
- 秦玉静刘巍峰高东王祖农
- 关键词:嗜杀酵母毒素蛋白酿酒
- 啤酒生产中双乙酰形成的分子遗传学及其控制被引量:23
- 1999年
- 双乙酰是啤酒中的重要风味物质,也是影响啤酒成熟和质量的关键因素之一。双乙酰是由酵母缬氨酸生物合成的中间产物α-乙酰乳酸经氧化脱羧产生的。目前,可以通过改良传统发酵工艺,添加酶制剂以及利用基因工程手段选育酵母工程菌等方法降低双乙酰在啤酒中的含量,缩短啤酒后酵期。
- 秦玉静高东刘巍峰
- 关键词:啤酒Α-乙酰乳酸双乙酰
- 地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆及酿酒酵 母工程菌的构建
- 秦玉静
- 关键词:芽孢杆菌Α-乙酰乳酸脱羧酶酿酒酵母
- 电融合构建嗜杀啤酒酵母及其发酵性能的研究被引量:7
- 1995年
- 以MK_2-3: K^+R^+leu^-ρ^+(n)为供体菌,AS2420-1: K^-P^-leu^+ρ~0(2n)为受体菌,通过电融合技术构建一批嗜杀啤酒酵母。其中4株融合子具有较高的嗜杀活性,对这4株融合子的遗传性状、DNA含量及细胞大小、形态,嗜杀质粒ds-RNA提取及电泳等研究表明,这4株菌具有双亲的互补性。对其中MAR_1的进一步实验表明,MAR_1的某些发酵性能接近甚至优于亲株AS2420-1,具有与亲株MK_2-3相同的杀菌谱,混合发酵实验中MAR_1可有效地防止野生酵母的污染,具有进一步开发利用的潜在价值。
- 鲍晓明秦玉静高东
- 关键词:电融合发酵性能酿酒酵母
- 影响酿酒酵母电击转化率的条件被引量:25
- 1999年
- 以酿酒酵母为材料,用穿梭质粒pYES2进行电击转化的条件实验.实验表明电击中电压大小、细胞的生长状态、处理条件和电击后细胞的培养时间以及质粒浓度等对电击转化率均有影响.取对数生长期酵母细胞,用二硫苏糖醇(DTT)处理以疏松细胞壁,加0.7μg/mL质粒DNA,5kV电压电击,转化后细胞在完全培养基中培养60min后,涂布选择培养基,转化率可达4.8×105个转化子/μg质粒DNA,细胞的存活率为39.2%,比完整细胞转化的效率高。
- 秦玉静金建玲鲍晓明高东
- 关键词:酿酒酵母电击转化转化率
- 酵母杂交系统的发展及其应用被引量:2
- 2001年
- 近年来 ,酵母单杂交 ,双杂交及三杂交系统技术的出现及发展已成为分析鉴定蛋白 蛋白 ,DNA 蛋白相互作用及调控的强有力工具。本文简述了酵母杂交系统的发展及潜在的应用价值。
- 刘巍峰秦玉静高东
- 关键词:酵母转录激活