王祖农 作品数:28 被引量:349 H指数:11 供职机构: 山东大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 石油与天然气工程 更多>>
绿色木霉的内切葡聚糖酶在纤维素水解中作用机制的研究 被引量:4 1992年 对由绿色木霉(Trichoderma viride A 10)菌株的粗酶粉中分离纯化得到的17个内切葡聚糖酶的某些物理、化学性质和对5种纤维性材料的水解作用进行了研究,当它们分别作用于5种结晶度和聚合度不同的纤维性材料时,表现的比活力值是高度相关的,纤维材料的物理性质对酶的比活力有重要影响.在葡聚糖纤维二糖水解酶协同下,它们都能水解棉纤维但当它们共同作用于棉纤维素时,却只有9个组分的主效应是显著的.进一步的研究表明,酶的浓度效应在各组分间的协同作用中有重要影响.对纤维素酶解利用研究的策略提出了讨论. 高培基 曲音波 王祖农关键词:内切葡聚糖酶 纤维素酶 绿色木霉 人免疫缺陷病毒1(HIV-1)膜蛋白基因片段在酵母中的克隆表达 1999年 目的为获得足够量的膜糖蛋白,以便于对不同HIV分离株膜糖蛋白的结构与功能进行进一步的研究。方法从人免疫缺陷病毒1(HIV-1)HXB2分离株原病毒基因组的重组质粒pHXB2中克隆了两段膜糖蛋白基因(ENV)片段。以酵母穿梭诱导表达质粒pYES2为载体,构建了两个相应的重组表达质粒pYENV1和pYENV2;进一步利用大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因(β-lacZ)构建了HIV-1膜外糖蛋白DNA片段与β-lacZ基因的融合表达质粒。将此3种质粒分别转化单细胞真核生物酿酒酵母BJ1991,得到的转化子经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的SDS-PAGE分析。结果克隆的基因片段在酿酒酵母中产生了分子质量为50×103的特异性诱导蛋白;对含此融合表达质粒的酵母转化子半乳糖诱导后表达产物的免疫检测表明,与对照菌株相比,融合表达产物具有和HIV-1阳性血清抗体反应的抗原性。结论可通过β-半乳糖苷酶活性的测定直接指示抗原片段的表达; 刘巍峰 高东 王祖农 滕智平 岑山 滕智平关键词:HIV-1 ENV基因 癌基因蛋白质类 厌氧条件下分解烃的一株Bacillus 91C 1993年 从大庆油田生产井中分离到一株革兰氏阳性、产生芽孢的Bacillus 91C。这株菌能够还原硝酸盐,形成结晶糊精,并且接触酶为阳性。 40℃应用Hungate严格厌氧技术,摇床培养(150r/min),菌株Bacillus 刘春德 江伯英 王祖农 王德民关键词:原油 厌氧条件 菌株 培养条件对黄孢原毛平革菌 Phanerochate chrysosporium ME—446 降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响 1993年 在固体培养条件下研究了培养条件对黄孢原毛平革菌Phanerochatechrysosporium ME—446降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响.试验采用正交设计.结果表明,ME—446菌株优先降解半纤维素.添加谷氨酸(3×10^(-6)mol/g草)可显著促进木素降解;基本营养盐显著促进半纤维素降解,但它们对纤维素降解均无显著影响;继续改变它们的用量并不能增大降解.高浓度的葡萄糖(5.5×10^(-4)mol/g草)极显著地抑制纤维素降解.醋酸缓冲夜pH4.5的缓冲强度对降解影响复杂.适宜的培养条件可以在获得有效木素降解的同时大幅度地减少纤维素损失。 李越中 高培基 王祖农关键词:纤维素 产木聚糖酶菌株的选育及其液体发酵条件 被引量:44 1990年 从土壤中筛出一株生长快产木聚糖酶活力较高的黑曲霉(Aspergillus niger)C-2菌株,经紫外线和甲基磺酸乙酯诱变,获得一突变株 An-76,其生长减缓,孢子形成能力减弱,产生的木聚糖酶和β-木糖苷酶活力分别可达353.6IU/ml 和4.5IU/ml。测定了 An-76的正常产酶曲线,研究了麸皮、氮源、碳源及半纤维素浓度对产酶的影响。最适培养条件为:起始 pH6.0、28℃、96h。酶的最适作用条件为50-55℃,pH4.8,在 pH1.2—11.4范围内稳定。酶的热稳定性较差,55℃保温1小时,剩余活力为40%。只有在含木糖苷类物质存在时,An-76才大量合成木聚糖酶。 陈惠忠 高培基 王祖农关键词:黑曲霉 木聚糖酶 诱变 发酵条件 木素生物降解的研究进展 被引量:34 1996年 综述了近十年来木素生物降解的研究进展,系统地概述了木素的结构、存在与合成,参与木素降解的微生物与酶以及木素的生物降解机制与应用前景.并就各种不同观点进行了讨论. 马登波 刘紫鹃 高培基 王祖农关键词:木素 生物降解 纤维素 黄单胞菌β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达 被引量:11 1991年 采用乌枪法,以质粒puc9为载体,大肠杆菌JM83为宿主菌,克隆了纤维素降解细菌野油菜黄单胞菌的β-葡萄糖苷酶基因。对克隆株的酶学性质分析表明,其β-葡萄糖苷酶的PNPG活力只有原出发菌株的72%,酶切电泳结果显示,在载体puc9上插入的外源片段大小为4.4kb。 汪天虹 刘纯强 孙晨晖 高培基 王祖农关键词:基因克隆 黄单胞菌 具有厌氧分解原油能力的一株BacillusD76 被引量:2 1993年 从大庆油田生产井中分离到一株BacillusDC76.该株菌为革兰氏阳性、能形成内生芽孢的菌株,具有还原销酸盐的能力,接触酶阳性。BacillusD76在以最终浓度为4%的大庆原油作为唯一碳原的无机盐场养基上,应用Hungate严格厌氧技术,40℃,150r/min培养25天,质谱分析检测到了丁酸和1,2,3,4-四甲基-5-异丙基苯的产生。该株菌在好氧条件下也能同化原油。 刘春德 江伯英 郑莹 王祖农 王德民关键词:原油 厌氧微生物 天然纤维素发酵残渣诱导高活性纤维素酶的研究 1990年 用天然纤维素发酵残渣培养木霉 Trichoderma sp.T_(22),生产高活性纤维素酶,并讨论了影响纤维素酶诱导合成的诸因素。发酵残渣连续使用4次,纤维素酶的滤纸酶活性分别提高了32.8%,56.0%,29.3%和1.7%。 宋桂经 孙青 孙彩云 王祖农关键词:发酵 活性 纤维素酶 残渣 黄孢原毛平革菌合成木素过氧化物酶的营养调控 被引量:72 1994年 本文研究了营养条件对黄孢原毛平革茵(Phanerochale chrysosporium)ME-116合成木素过氧化物酶及其同工酶组分的影响.在最适培养条件下获得1500U/L的酶活.高效液相色谱分离的5个同工酶组分中以P_2组分含量最高.低碳高氮培养基最适于酶的合成.降低氮和KH_2PO_4含量致使各组分含量下降,而改变MgSO_4和CaCl_2浓度对P_2组分无影响.表面活性剂吐温80主要通过提高细胞膜透性而增加酶的合成.黎芦醇对5种同工酶组分的合成均有诱导作用.培养基中各营养因子对木素过氧化物酶的合成存在着复杂的交互作用. 李越中 高培基 王祖农关键词:木素 过氧化物酶