王养会
- 作品数：9 被引量：33H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 表达猪瘟病毒石门株E0抗原重组鸡痘病毒载体的构建及免疫效果试验
- 猪瘟/(Classical swine fever,CSF/)是由猪瘟病毒/(Classical swine fever virus,CSFV/)引起的猪的高度致死性、接触性传染病,对全球的养猪业危害严重,被世界动物卫生...
- 王养会
- 关键词：猪瘟病毒鸡痘病毒
- 文献传递
- 关中奶山羊乳成分及理化特性研究
- 用Milko-Scan乳质综合测定仪对220份关中奶山羊生鲜乳的成分含量进行了测定,结果表明,关中奶山羊生鲜乳中的脂肪、蛋白质、非脂乳固体、乳糖和干物质的平均含量分别为4.88％,2.74％,7.80％,4.36％和12...
- 张彦明郭抗抗徐浩王养会
- 关键词：关中奶山羊山羊乳化学成分非脂乳固体乳糖
- 文献传递
- 表达猪瘟病毒石门株E2抗原的重组腺病毒构建及免疫性研究被引量：5
- 2007年
- 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组腺病毒Adeasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带CSFVE2基因的重组腺病毒基因组质粒pAdEasy-E2,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒pAd-E2,PCR证实E2基因已整合至腺病毒基因组中,Western blot结果检测到重组病毒转染293细胞中E2蛋白的表达。ELISA检测结果表明,pAd-E2能刺激小鼠产生高效价的抗体,也能刺激猪体产生抗体。将pAd-E2通过肌肉和皮下接种途径免疫商品化猪2次,21d后用1000倍TCID50CSFV强毒攻击。pAd-E2免疫组有1/4头死亡,而非重组腺病毒pAd-CMV免疫组和空白对照组全部死亡。该研究为研制猪瘟基因工程疫苗提供了有用的数据。
- 孙永科杨玉艾王养会张彦明
- 关键词：腺病毒猪瘟病毒E2基因同源重组
- 表达猪瘟病毒石门株E0和/或E2基因重组非复制型腺病毒疫苗的免疫保护试验被引量：3
- 2007年
- 用已构建好的表达猪瘟病毒石门株E0基因的重组腺病毒pAd-E0、表达猪瘟病毒石门株E2基因的重组腺病毒pAd-E2以及联合表达猪瘟病毒石门株E0-E2基因的重组腺病毒pAd-E0-E2,肌肉和皮下接种免疫商品猪2次(间隔20 d),同时设非重组腺病毒PAD-CMV、常规猪瘟疫苗和空白对照组。二免21 d后进行CSFV石门株强毒超致死量(1 000倍TCID50)攻击,研究表达猪瘟保护性抗原基因重组腺病毒疫苗的免疫效果。结果表明,pAd-E0、pAd-E2和pAd-E0-E2免疫组猪的死亡率分别为50%,25%和25%,而常规猪瘟兔化弱毒疫苗免疫组的死亡率为40%,pAd-CMV免疫组和空白对照组猪全部死亡;在攻毒前,重组腺病毒免疫组抗体水平普遍较低,商品化疫苗免疫组能100%检测到抗体,而非重组腺病毒和空白对照没有检测到抗体;攻毒后pAd-E0、pAd-E2和pAd-E0-E2试验组中分别有75%,50%和50%猪体温超过40℃,常规苗试验组80%体温超过40℃,而PAD-CMV组和空白对照组所有试验猪体温均超过40℃,表明重组腺病毒疫苗具有一定的保护效果。表明,仅含有E0基因的重组腺病毒pAd-E0的免疫保护效果和常规疫苗还有距离;含有E2基因和E0-E2基因的重组腺病毒的免疫保护效果不亚于常规疫苗。
- 孙永科杨玉艾王养会李普华张彦明
- 关键词：猪瘟病毒重组腺病毒E0基因E2基因
- 关中奶山羊乳主要成分的质量分数及理化特性研究被引量：10
- 2006年
- 用Milko-Scan乳质综合测定仪对220份关中奶山羊生鲜乳的主要成分的质量分数进行了测定。结果表明,关中奶山羊生鲜乳中的脂肪、蛋白质、非脂乳固体、乳糖和干物质的平均质量分数分别为4.88%,2.74%,7.80%,4.36%和12.91%。乳的化学成分质量分数与饲养管理条件有密切关系。关中奶山羊乳中的脂肪质量分数和干物质质量分数呈正相关。同时对100份关中奶山羊生鲜乳的部分理化指标进行了测定,结果表明,关中奶山羊乳的比重为1.0285～1.0333,乳的滴定酸度为13.455±0.236°T。
- 郭抗抗张彦明徐浩王养会
- 关键词：关中奶山羊山羊乳
- 猪瘟病毒E2基因重组鸡痘病毒的构建及免疫保护试验被引量：8
- 2009年
- 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E2。用脂质体将该质粒转染至鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后,通过蓝斑纯化试验筛选出重组鸡痘病毒FV282-CSFV-E2。PCR证实E2基因已整合至鸡痘病毒基因组中。重组鸡痘病毒3次腹腔接种小鼠,ELISA检测血清猪瘟病毒抗体滴度为1:4096。给猪颈部和腹股沟皮下分点注射免疫3次,4周后用CSFV石门强毒株以100LD50接毒量攻击,结果保护率为75%。本试验为猪瘟重组鸡痘病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。
- 李谱华张淼涛王养会张彦明
- 关键词：猪瘟病毒E2基因鸡痘病毒活载体疫苗
- 表达猪瘟病毒石门株E0抗原的重组腺病毒构建及免疫性的研究被引量：4
- 2007年
- 应用PCR从pMD18-T-E0质粒中扩增编码CSFV E0蛋白的基因片段,定向克隆到重组腺病毒Adeasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组“两步转化法”构建携带CSFV E0基因的重组腺病毒基因组质粒pAdEasy-E0,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒pAd-E0,PCR证实E0基因已整合至腺病毒基因组中,用Western blot检测到重组病毒感染293细胞中E0蛋白的表达。重组病毒免疫小鼠和猪,结果2次免疫后产生明显的免疫应答,ELISA检测小鼠血清抗体滴度分别为1∶512和1∶10240;猪血清抗体滴度分别为1∶16和1∶64。本研究成功构建了表达猪瘟病毒E0基因的非复制型重组腺病毒,该重组病毒免疫小鼠可产生较高的抗体滴度,免疫猪后能提供一定的保护效果。
- 孙永科杨玉艾王养会张彦明
- 关键词：腺病毒猪瘟病毒E0基因同源重组
- 表达猪瘟病毒石门株E0基因重组鸡痘病毒的构建及动物免疫试验被引量：7
- 2008年
- 应用PCR从质粒pMD18-T-E0中扩增编码CSFVE0蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,进一步构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E0。用脂质体将该质粒转染至鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后,通过蓝斑纯化实验筛选出重组鸡痘病毒FV282-CSFV-E0。PCR证实E0基因已整合至鸡痘病毒基因组中,Western blot检测到重组病毒感染CEF细胞中E0蛋白的表达。重组病毒3次腹腔接种小鼠,ELISA检测血清抗体滴度高达1:4096。重组病毒免疫猪3次之后,接种猪瘟病毒强毒进行攻毒试验,结果对免疫组产生75%的保护率,为研制猪瘟活载体疫苗奠定了基础。
- 王养会李谱华张淼涛张彦明
- 关键词：猪瘟病毒E0基因鸡痘病毒
- 共表达猪瘟病毒E0、E2基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性被引量：2
- 2008年
- 【目的】研究共表达猪瘟病毒E0、E2基因的重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2的遗传稳定性。【方法】将重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2在鸡胚成纤维细胞上连续传20代,取第5、10、15和20代重组病毒进行以下检测:用蓝斑试验鉴定各代重组病毒纯度;用PCR方法扩增猪瘟病毒E0、E2基因,进行基因序列分析;用间接免疫荧光实验检测各代重组病毒中猪瘟病毒E0、E2基因的表达。【结果】各代次重组病毒产生的蚀斑均为蓝色,表明病毒纯度稳定。从各代重组病毒DNA中均扩增出了约700 bp和1 200 bp的条带,分别与E0和E2基因片段长度一致,基因序列分析发现,第5、10、15代重组鸡痘病毒中的E0、E2基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有2处发生了点突变(即E0基因139位A→G,E2基因413位A→G),其编码的氨基酸也发生了相应变化(即E0蛋白47位Thr→Ala,E2蛋白138位Glu→Gly),但蛋白抗原表位未发生明显的变化。间接免疫荧光实验检测到各代重组病毒均能正常表达目的蛋白。【结论】重组鸡痘病毒rFPV-E0-E2在鸡胚成纤维细胞上传20代以内,具有良好的遗传稳定性,插入的猪瘟病毒E0、E2基因能够正确稳定表达。
- 张浩郭抗抗张彦明王养会尹宝英孙裴王文秀何雷
- 关键词：猪瘟病毒重组鸡痘病毒
