郭抗抗
- 作品数：208 被引量：835H指数：14
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 猪细小病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型多重PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2011年
- 根据猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的基因序列,分别选取各自的保守区段设计引物,通过反应条件的优化,建立了检测PPV、PRV和PCV-2的多重PCR方法。用建立的方法对采自陕西省部分猪场的286份病料及血样进行检测,从对临床健康猪全血样品中PPV、PRV和PCV-2的检测结果看,PCV-2在正常猪群中有一定比例的存在,同时在个别猪场也存在PRV和PCV-2双重感染的现象;从临床患病猪病料中检测发现,PRV和PCV-2混合感染较严重,并有PPV+PRV+PCV-2三重感染发生;多重PCR检测结果与单项PCR检测结果的符合率达99%以上,说明建立的多重PCR检测方法可用于临床样品的检测,为疾病诊断提供参考。
- 孙黎郭抗抗王静刘伟曹伟伟吕其壮张彦明
- 关键词：猪细小病毒伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型多重PCR
- 猪圆环病毒2型ORF3蛋白的原核表达及抗体检测ELISA方法的建立被引量：1
- 2019年
- 通过外源表达PCV2 ORF3蛋白,为ORF3蛋白的抗体制备和检测提供基础材料。根据PCV2的ORF3基因序列设计特异性引物,克隆ORF3全基因,构建重组原核表达质粒,转入大肠埃希菌进行表达,将纯化的蛋白包被ELISA板,建立ORF3抗体检测ELISA方法。结果表明,获得了重组pGEX-6p-1-ORF3原核表达质粒,最佳表达条件为37℃,225 r/min,IPTG 1.0 mmol/L诱导5 h;建立的ELISA检测方法可以检测PCV2阳性血清,与猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清无交叉反应。本试验为ORF3抗体制备提供了基础材料,也为PCV2抗体检测提供了可选择方法。
- 李鑫鑫张广芳吕其壮张彦明郭抗抗
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达间接ELISA抗体检测
- 2013-2019年陕西省某奶牛场奶牛不同季节和不同泌乳时期日产奶量及乳成分分析被引量：2
- 2022年
- 通过对陕西省某奶牛场2013-2019年的奶牛生产性能测定(DHI)记录进行统计分析,探究不同年份、不同季节和不同泌乳时期奶牛的日产奶量以及乳成分的变化规律,以期为奶牛场生产管理提供依据。结果表明,在不同年份,日产奶量较高的季节为冬季和春季;乳蛋白率在秋季和冬季极显著高于春季和夏季(P<0.01);乳脂率在秋季和冬季显著高于春季和夏季(P<0.05);不同季节尿素氮含量差异不显著(P>0.05)。2013-2016年,不同泌乳时期的日产奶量、乳蛋白率、乳脂率、尿素氮的变化无规律性,加强饲养管理和调整日粮结构后,2017-2019年出现明显的规律性,不同泌乳时期日产奶量1~44 d逐步增加,45~99 d最高,随后缓慢下降;蛋白率随泌乳时间逐步增加,305 d以上为最高值;乳脂率先降低后增加,45~99 d最低,305 d以上最高;尿素氮逐渐增加,100~199 d达到最高值后逐步降低。以上数据表明,奶牛群体改良对牧场生产水平具有明显的提升作用,因此建议牧场在管理上应重视季节差异造成的环境温度和日粮成分的变化,加强泌乳初期(1~44 d,45~99 d)的日粮营养。
- 张益宁金硕李志君郭抗抗逄国梁张锦轩范云鹏麻武仁刘迎秋卿素珠张为民
- 关键词：奶牛日产奶量乳成分
- 屠宰生猪PCV-2感染的检测与基因型分析
- 为了解屠宰生猪中猪圆环病毒2型（PCV-2）的带毒状况及PCV-2的主要基因型,在分析PCV-2分离株基因序列的基础上分别设计了检测PCV-2、PCV2-A和PCV2-B的引物,建立了各自的PCR检测方法。结果表明,建立...
- 郭抗抗张彦明吴亚文汤智慧王晶钰朱向博张红刘华科
- 关键词：猪圆环病毒2型基因分析病毒检测
- 文献传递
- 规模化猪场3种主要疫病抗体检测结果分析被引量：3
- 2022年
- 为调查猪场免疫程序的合理性及猪群的免疫成效,论文对陕西省某规模化猪场的猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪伪狂犬病(PR)3种传染病进行血清学系统检测,并对检测结果进行分析。检测结果显示,22周龄后备母猪CSF抗体阳性率(30%)低于其他阶段猪群,哺乳母猪CSF抗体阳性率(96%)高于其他阶段猪群,整体猪群CSF抗体阳性率为80%;12日龄仔猪PRRS抗体阳性率(67%)低于其他阶段猪群,75 d妊娠母猪PRRS抗体阳性率(100%)高于其他阶段猪群,整体猪群PRRS抗体阳性率为90%;22周龄后备母猪PR抗体阳性率(40%)低于其他阶段猪群,妊娠母猪、仔猪及保育猪的PR抗体阳性率(100%)高于其他阶段猪群,整体猪群PR抗体阳性率为91%。结果表明,猪群整体免疫效果较好,3种疫病的抗体阳性率在80%以上,但个别猪群的免疫状况须引起注意,22周龄后备母猪的CSF及PR的抗体阳性率偏低,12日龄仔猪的PRRS抗体阳性率偏低。笔者认为应结合免疫程序及抗体检测结果实时调整免疫程序,及时完善猪群免疫漏洞。
- 周宏超贾佩连星张琪郭抗抗许信刚吴晨晨
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征猪伪狂犬病抗体监测
- 猪Jiv基因的克隆表达与多克隆抗体制备被引量：4
- 2015年
- 【目的】克隆猪Jiv蛋白核心区的2 112bp的基因片段,构建其原核表达载体后进行蛋白的表达和纯化,制备抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。【方法】利用RT-PCR方法,从猪脾脏组织RNA中扩增得到猪Jiv基因,将其克隆到pMD19-T载体并测序,以此为基础构建原核表达载体pET32a-Jiv,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中,利用IPTG诱导表达,获得大量包涵体形式的猪Jiv融合蛋白。通过镍离子螯合层析柱对表达的目的蛋白进行纯化,对纯化后的包涵体蛋白进行透析复性,以每只新西兰白兔400μg蛋白的初次免疫剂量和500μg蛋白的加强免疫剂量进行免疫,共免疫5次,采集血清,采用间接ELISA法检测抗体效价达到一定水平后,收集抗体,利用Western blot检测抗体特异性。【结果】克隆得到长度为2 112bp的猪Jiv基因片段;构建的pET32a-Jiv在E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中经诱导后高效表达,SDS-PAGE结果显示,纯化得到分子质量约为95ku的猪Jiv融合蛋白;测得的猪Jiv蛋白多克隆抗体效价达1∶6 400;Western blot检测结果证实,所获得抗体能够有效地应用于猪Jiv蛋白抗原的检测。【结论】成功地克隆了猪Jiv基因,制备了抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。
- 刘伟郭抗抗林鸷盛洁赵娣赵紫印张彦明
- 关键词：原核表达多克隆抗体猪瘟病毒
- IBV陕西分离株M基因的克隆与遗传变异分析
- 2007年
- 为了研究IBV陕西分离株M基因的遗传变异情况及分子特征，参照NCBI所登录的IBVM基因序列设计了1对引物，应用RT-PCR方法对陕西8株IBV分离株的M基因进行扩增，并构建克隆载体，对阳性质粒测序后进行核苷酸序列及氨基酸序列同源性和进化发生关系分析，并对M蛋白的二级结构和跨膜区进行预测。结果表明，8个IBV分离株间的M基因核苷酸和M蛋白氨基酸同源性分别为92．3％～99．8％和95．4％～100％，分离毒株与参考毒株的M基因核苷酸和M蛋白氨基酸序列同源性分别为87．4％～99．5％和89．4％～99．5％；分离毒株与参考毒株M蛋白的α-螺旋结构主要分布在N端前100氨基酸肽段区，其他的部分主要是哥折叠和无规则卷曲结构；分离毒株的M蛋白均包含有3个跨膜区。表明IBV分离株M蛋白在基因序列和二级结构上相对保守。
- 王晶钰罗艳邓小敏郭抗抗张彦明
- 关键词：IBV分离株
- 猪瘟综合防控研究进展被引量：15
- 2018年
- 猪瘟是由猪瘟病毒引起的高度传染性、接触性疾病,遍布世界各地,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染病,严重危害养猪业。论文就猪瘟病毒对机体免疫功能和凝血功能的损伤抑制,病毒的分子结构,酶联免疫吸附试验、免疫胶体金层析和荧光定量PCR等诊断方法,疫苗研究如DNA疫苗、病毒重组载体疫苗及常用免疫方法的最新进展进行综述,以期为猪瘟致病机理和防控的进一步研究提供参考。
- 任世斌赵亮郭抗抗林青
- 关键词：猪瘟猪瘟病毒致病机理
- 表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组腺病毒的构建被引量：1
- 2015年
- 为研制表达猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组腺病毒疫苗,根据PCV-2ORF2(Cap)基因序列和耶尔森菌侵袭素C端(InvC)序列,克隆获得Cap和InvC基因后,插入pAdShttle-CMV载体构建重组穿梭载体pAdShttle-Cap-InvC,经PmeI线性化后,转化入BJ5183感受态细菌与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组获得重组腺病毒质粒pAd-Cap-InvC。重组质粒经PacⅠ线性化后,转染HEK293细胞,连续传代后获得重组腺病毒。应用PCR、Western blot和间接免疫荧光(IFA)技术分别检测重组腺病毒中Cap和InvC基因及表达。结果表明,成功构建了表达PCV-2Cap蛋白和InvC的重组腺病毒rAd-CapInvC,经过噬斑纯化和连续传代,重组腺病毒TCID50可达10-9.32/mL,为PCV-2重组腺病毒活载体疫苗的研发提供了基础材料。
- 许晗李海敏王爱玲李春燕李河林吕其壮张彦明郭抗抗
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白重组腺病毒
- 细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法检验病害猪肉的比较被引量：6
- 2010年
- 细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法都是检验病害猪肉的常规检验方法。采集病害猪肉和健康猪肉各30份,通过对健康猪肉和病死猪肉同时用过氧化物酶法和细菌内毒素呈色法进行检测,比较两种方法的准确性、精确度及适用性。结果表明,细菌毒素氧化呈色法和过氧化物酶法检验病害猪肉都有很高的检出率,达到了100%。检验市场上购买的健康猪肉时,过氧化物酶法优于细菌毒素氧化呈色法。
- 郭抗抗张彦明任雪飞王秀清王晶钰
