梁慧颖
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 蚓激酶乳腺组织特异性表达载体构建及在山羊奶中的表达被引量：1
- 2005年
- 以合成的蚓激酶cDNA突变体为目的基因,构建了其乳腺组织特异性表达载体pIbCP-LK-neo和含有两个目的基因拷贝的表达载体pIbCP-LK-LK.以山羊乳腺作为生物反应器,在稳定泌乳期于乳腺组织分别注射以上两种表达质粒,采集乳汁,通过纤维蛋白平板溶圈试验进行纤溶活性测定.结果显示,注射了蚓激酶表达质粒的山羊奶具有明显的纤溶活性;pIbCP-LK-LK蚓激酶在奶中的表达量高于pIbCP-LK-neo.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析表明,表达的蚓激酶分子量为26kDa.本试验系首次实现了蚓激酶的基因工程表达,为通过转基因途径生产蚓激酶奠定了基础.
- 梁慧颖张守峰扈荣良王永志涂长春王莘
- 关键词：蚓激酶乳腺组织特异性表达CP纤溶活性山羊奶
- 蚓激酶基因的人工合成及山羊乳腺表达被引量：7
- 2004年
- 为了实现蚓激酶在真核细胞的高效稳定表达 ,人工合成了全长 849bp ,不含罕用密码子的蚓激酶F Ⅲ 1cDNA序列 ,并以其为目的基因 ,构建以山羊β 酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和重组逆转录病毒表达载体pLN bCP LK。质粒pBLK 40 0 μg直接注入稳定泌乳期奶山羊乳腺 ,以纤维蛋白平板溶圈法 (FAPA)检测奶样纤溶活性。结果显示 ,注射后 3～ 60h ,奶样有明显纤溶活性 ,其中 6～ 9h活性最高。脂质体介导质粒pLN bCP LK转染PA31 7细胞系 ,5 0 0mg LG41 8筛选后获得 4株高产毒细胞系 ,产毒滴度达 1× 1 0 4～ 1× 1 0 5CFU ml水平。产毒细胞上清 1 0ml直接注入临产前两周的山羊乳腺 ,隔日以等量再注 1次 ,产羔后其奶样即有明显纤溶活性 ,注后第
- 张守峰扈荣良范志强姚汝强梁慧颖涂长春
- 关键词：蚓激酶纤溶活性LN乳腺表达上游调控序列Β-酪蛋白
- 蚓激酶山羊乳腺生物反应器研究及其表达
- 该课题为国家'863'生物反应器重大专项(2002AA206653)—蚓激酶山羊乳腺生物反应器研究,最终目的为通过基因工程手段建立蚓激酶转基因山羊乳腺生物反应器,实现由羊乳中表达蚓激酶,直接饮用羊乳就可以达到治疗血栓和保...
- 梁慧颖
- 关键词：蚓激酶山羊乳腺
- 文献传递
