林鸷
- 作品数：34 被引量：77H指数：5
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 一株猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及其对不同动物的致病性被引量：1
- 2022年
- 为了解变异后伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的致病性,采用细胞培养技术从病料中分离PRV,通过PCR方法对PRV相关基因进行扩增,对毒株进行特异性试验和病毒滴度的测定,并通过动物试验对PRV的致病性进行了研究。结果表明:通过PCR可扩增出大小与预期相符的PRV gG基因片段、gE基因片段以及TK基因片段;病毒毒价可达10^(8.0) TCID_(50)∕mL;接种10^(5.0)TCID_(50)∕mL病毒后,家兔于52 h左右全部死亡,小鼠于72 h左右全部死亡,10^(4.0) TCID_(50)∕mL病毒可致28日龄仔猪死亡或发病。本研究可为预防PRV疫病的流行提供防控依据。
- 林鸷赵本进何锡忠朱永军彭丽英
- 关键词：伪狂犬病毒
- 猪A组轮状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：10
- 2012年
- 本试验旨在建立一种检测猪A组轮状病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。参考GenBank上登录的猪轮状病毒OSU株的VP6基因序列保守区设计一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆目的基因,并将其连入pMD 19-T Vector,制备阳性标准品,优化反应条件。建立的方法在1.0×102～1.0×109拷贝/μL范围内线性关系良好,反应扩增效率大于90%,扩增相关系数大于0.98。对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪圆环病毒2型均检测不到荧光信号,表明该方法特异性强。该方法批内和批间变异系数均小于2%,重复性好。结果表明,建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法可为A组猪轮状病毒早期感染的诊断及病毒定量分析提供技术支持。
- 高婉俊王静林鸷曹伟伟张彦明
- 关键词：A组轮状病毒SYBR实时荧光定量PCR
- 猪瘟病毒石门株调控猪巨噬细胞Toll样受体介导的天然免疫应答
- 引言Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)通过介导天然免疫应答,产生免疫效应分子,对侵入机体的病毒进行清除,而病毒为了能够生存也会通过多种方式影响TLRs介导的免疫应答。猪瘟病毒(CSFV)感...
- 曹志张彦明郭抗抗郑敏萍宁蓬勃康恺林鸷张成成
- 国产与进口DMEM培养ST细胞及应用效果比较
- 2022年
- 为比较国产与进口达尔伯克改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle's medium,DMEM)培养猪睾丸(swine testis,ST)贴壁细胞和培养猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的效果,本试验采用国产与进口DMEM培养同批ST细胞,连续传代10代,并分别接种培养PPV、PRV和TGEV。结果显示,用国产DMEM培养ST细胞72 h后,连续10代细胞的密度均达到1.25×10^(6)个/mL以上,细胞增殖达5倍以上,与进口DMEM培养结果相似,两者无显著差异(P>0.05);两种培养基培养同一病毒的滴度相近,两者无显著差异(P>0.05)。试验表明,国产DMEM能达到进口培养基的培养水平,为国产DMEM替代进口DMEM来大规模培养PRV、PPV和TGEV等提供了科学依据。
- 何锡忠李嘉皓林鸷赵本进朱永军彭丽英
- 关键词：ST细胞
- ST贴壁细胞悬浮驯化及应用被引量：2
- 2022年
- 为将ST贴壁细胞通过自主驯化,使其能在ST-S细胞无血清培养基中悬浮生长且能稳定传代,在摇瓶中实现高密度生长,并应用于猪伪狂犬病毒(PRV)悬浮培养,经ST-A低血清培养基适应培养,对一株贴壁的ST细胞进行了无血清的全悬浮驯化,并将PRV在悬浮细胞中连续盲传培养。结果显示:ST悬浮细胞能在无血清培养基中传代,培养48 h至第3代后,所能达到的最终细胞密度为3.00×10^(6 )cells/mL以上;PRV连续培养至第5代,毒价可达到109.0 TCID50/mL。结果表明,用专用培养基可使ST贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于PRV悬浮培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高PRV增殖效率奠定了技术基础。
- 何锡忠林鸷赵本进朱永军彭丽英
- 关键词：驯化猪伪狂犬病毒
- 猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV_(SX)-gE株)对新生仔猪安全性的初步研究
- 2021年
- 为了证实自主研制的猪伪狂犬病病毒gE基因缺失灭活疫苗(PRV_(SX)-gE株)免疫新生仔猪的安全性,对新生仔猪(非使用日龄靶动物)进行1次单剂量肌内接种实验。结果显示:3批PRV_(SX)-gE株疫苗(批号为2017001、2017002、2018001)肌内接种3~5日龄仔猪后,仔猪接种部位及全身未见明显症状,体温正常,精神状态良好,饮食正常,被毛顺滑、有光泽。实验结果初步证明:利用PRV_(SX)-gE株疫苗免疫新生仔猪(非使用日龄靶动物)是安全的。
- 何锡忠林鸷彭丽英
- 关键词：新生仔猪肌内注射
- 一种口服免疫喷枪
- 本实用新型公开了一种口服免疫喷枪，包括喷枪本体，所述喷枪本体的上端设有疫苗瓶，所述喷枪本体的正面设有显示窗，所述喷枪本体的右端固定连接有手柄，所述喷枪本体的正面右侧对称设有控制按钮，所述喷枪本体的上端右侧设有蓄电池，所述...
- 刘惠莉李本强陶洁程靖华石迎林鸷乔长涛
- 一种自带伸缩型棉签的一体化样品采集管
- 本发明提供一种自带伸缩型棉签的一体化样品采集管。所述自带伸缩型棉签的一体化样品采集管包括采样管，管盖，所述管盖安装在所述采样管上；支撑管，所述支撑管安装在所述管盖上，且所述支撑管贯穿所述管盖；连接杆，所述连接杆滑动密封安...
- 刘惠莉陶洁李本强程靖华石迎林鸷乔长涛
- 猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株毒株的鉴定
- 2022年
- 通过细胞传代,获得了35代次的PRV_(SX)-gE基因缺失毒株。对不同代次的病毒进行TCID_(50)测定、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、特异性检验,并通过动物感染试验测定毒株对猪的致病性。结果表明:不同代次之间病毒滴度无显著差异,且无支原体和外源病毒污染。PRV_(SX)-gE基因缺失毒株(10^(8.0)TCID_(50)/mL)可致仔猪发病。用PRV_(SX)-gE基因缺失毒株制备的油乳剂疫苗免疫小鼠和仔猪,发现其对小鼠保护率达90%以上,对猪保护率达100%。试验表明,PRV_(SX)-gE基因缺失毒株具有良好的免疫原性。
- 林鸷何锡忠朱永军丁卫星彭丽英
- 关键词：纯净度稳定性免疫原性
- 猪伪狂犬病毒TK基因的扩增及序列分析被引量：2
- 2020年
- 为了解猪伪狂犬病毒TK基因的分子特征及分子流行病学特点,利用PCR对猪伪狂犬病毒SX株TK基因进行扩增和测序,并将测序结果与国内外经典毒株、疫苗毒株以及近些年的变异毒株进行序列比对分析。结果表明:SX株TK基因序列包含963 bp的编码区,共编码320个氨基酸;与国内流行的变异毒株核苷酸和氨基酸同源性为100%,与国内外其他经典毒株核苷酸同源性在99.4%—99.7%,氨基酸同源性在99.1%—99.7%。与经典毒株相比,变异毒株TK基因编码的蛋白大部分都出现了第215位由苏氨酸(T)突变为缬氨酸(V)和第284位由丙氨酸(A)突变为缬氨酸(V)。氨基酸进化分析也表明,SX株及变异毒株与经典毒株呈现各自独立的遗传进化分支。
- 林鸷何锡忠潘洁朱永军彭丽英
- 关键词：伪狂犬病毒TK基因
