徐蓉
- 作品数：10 被引量：12H指数：2
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p66Shc重组腺病毒载体及构建和应用
- 本发明提供一种p66Shc重组腺病毒载体，是利用基因工程技术，将人p66Shc片段与pAdeno X-CMV载体在体外同源重组后，转化感受态菌，筛选正确的重组腺病毒并将其线性化后转染HEK293A细胞，在HEK293A细...
- 胡刚林雅军徐蓉魏洁程建华
- 文献传递
- 人p66Shc重组腺病毒抑制Hela细胞增殖的体外研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人p66Shc重组腺病毒抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的作用及机制。方法Hela细胞分为空白对照组（不感染腺病毒）、阴性对照组（感染AdenoX—LacZ）和实验组（感染AdenoX—p66Shc）。通过细胞生长曲线、MTT检测分析观察细胞的生长状态；DHE染色法检测细胞内活性氧生成；流式细胞仪检测细胞周期；WesternBlot法检测细胞内相关蛋白的表达。结果p66Shc重组腺病毒能够抑制Hela细胞增殖，且随着p66Shc重组腺病毒处理时间延长和剂量增加其抑制作用增强。与空白和阴性对照组比较，p66Shc重组腺病毒感染48h后，G2／M期细胞比例明显升高，其差异具有统计学意义（P〈0．01）；同时引起Hela细胞活性氧水平显著上升，p53、CyclinB1蛋白表达显著升高，其差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论p66Shc重组腺病毒能够显著抑制Hela细胞增殖，并诱导其发生G2／M期阻滞。
- 徐蓉胡刚林雅军杨晓姗柳江马桂蕾魏洁程建华孙洪范
- 关键词：P66SHC宫颈癌HELA细胞增殖
- 改善肿瘤微环境的多功能纳米递送系统在黑色素瘤联合治疗中的应用研究
- 目前癌症已成为全球第二大死亡原因。黑色素瘤具有高度侵袭性、转移性且易产生抗药性的特点,通过单一疗法难以完全治愈,联合疗法有望解决这一问题。利用纳米药物递送系统(Nano drug delivery system,NDDS...
- 徐蓉
- 关键词：肿瘤微环境树突状细胞疫苗光动力治疗
- 重组人p66Shc腺病毒抑制HeLa细胞增殖的机制研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨重组人p66Shc腺病毒(AdenoⅩ-p66Shc)对宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用及机制。方法MTT法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)生成;ELISA检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量;AnnexinⅤ-FITC/PI荧光染色检测细胞凋亡率;Western blot检测相关蛋白表达;免疫共沉淀检测p66Shc与p53之间相互作用。结果重组人p66Shc腺病毒呈剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖(P<0.05),而N-乙酰半胱氨酸能够阻断重组人p66Shc腺病毒的作用。p66Shc能引起细胞ROS水平显著上升(P<0.05),同时伴随8-OHdG含量的升高(P<0.05);p66Shc能引起p53蛋白和CyclinB1蛋白表达及p53磷酸化修饰(p-p53)显著升高(P<0.05),但免疫共沉淀实验结果显示p66Shc与p53并非直接结合,提示p66Shc通过其他信号分子间接调控p53的表达及活性。结论重组人p66Shc腺病毒通过使HeLa细胞ROS水平上升,引起DNA氧化损伤,从而诱导p53表达及其磷酸化修饰升高抑制HeLa细胞增殖。
- 杨晓姗林雅军魏洁胡刚徐蓉许晓东马桂蕾孙洪范
- 关键词：P66SHCHELA细胞活性氧P53
- 胰岛素注射方式对2型糖尿病KK小鼠血脂的影响被引量：8
- 2011年
- 目的：观察胰岛素腹腔和皮下给药对2型糖尿病模型（KK小鼠）血脂的影响。方法：选择空腹血糖高于20 mmol/mL的KK小鼠作为2型糖尿病模型,分为腹腔给药组（腹腔给药组,n=9）和皮下给药组（皮下给药组,n=9）。C57BL小鼠作为正常对照（正常对照组,n=10）。2型糖尿病KK小鼠连续给予高糖高脂饮食4周,同时IP组每日一次注射胰岛素0.3 mL,皮下给药组每日一次注射胰岛素0.4 mL（速效胰岛素？精蛋白锌胰岛素=2？1）,以维持空腹血糖正常（6.0±1.5）mmol/L。结果：胰岛素治疗2~4周,腹腔胰岛素给药可使2型糖尿病KK小鼠血清TG、TC、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的浓度达到正常水平。皮下胰岛素给药只能使TC达到正常水平。结论：与胰岛素皮下给药相比,腹腔胰岛素给药能够更有效地纠正2型糖尿病KK小鼠脂代谢异常。
- 张超邓珊珊徐蓉王欣然唐丽娜相莉孙洪范
- 关键词：糖尿病胰岛素脂代谢
- 重组人p66Shc/腺病毒表达载体的构建与表达
- <正>目的p66Shc是调节氧化应激下凋亡应答和衰老信号转导途径的重要蛋白分子,可通过引起线粒体中活性氧自由基产生导致细胞氧化损伤。对p66Shc功能的研究多通过基因突变或敲除降低p66Shc的表达水平来观察低水平表达p...
- 徐蓉杨晓姗孙洪范
- 文献传递
- 胰岛素皮下给药和腹腔给药对KK小鼠自由基代谢的影响被引量：1
- 2012年
- 目的 观察皮下与腹腔2种胰岛素给药方式对2型糖尿病模型氧自由基水平的影响.方法选用C57BL/6J小鼠作为正常对照组（C组,n=9）.KK小鼠随机分为腹腔注射胰岛素组（i.p.组,n=9）、皮下注射胰岛素组（s.c.组,n=9）、未治疗组（U组,n=9）.i.p组与s.c.组每天给予一定量胰岛素（胰岛索注射液与精蛋白锌胰岛素注射液按体积比2：1混合）治疗,使血糖维持在正常水平（6±1.5） mmol/L,连续给药1个月.分别检测每组的血清、肝脏、肾脏、心脏超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量.结果U组的肝、肾、心和血清中SOD及GSH-PX活性显著降低,MDA含量显著升高.2种给药方式皆可使血清SOD及GSH-PX活性提高、MDA含量下降至正常对照组水平,但腹腔给药方式的作用更强.2种给药方式可使肝脏MDA含量显著下降,且作用无显著差异；但皮下给药组提高肝脏SOD活性的作用优于腹腔给药组,腹腔给药组提高肝脏GSH-PX活性的作用优于皮下给药组.腹腔给药方式降低肾脏MDA含量、提高SOD活性的作用显著优于皮下给药组.2种给药方式降低心脏组织MDA的效果相同.结论2种给药方式都可以使KK小鼠的血清、心、肝、肾MDA水平降至正常对照组水平,但2种给药方式在各脏器提高抗氧化能力的模式有所不同.腹腔给药方式降低血清、肾脏、MDA含量的效果更好.
- 王欣然邓姗姗张超徐蓉唐丽娜魏洁孙洪范胡刚
- 关键词：糖尿病胰岛素氧自由基
- 重组人p66Shc／腺病毒表达载体的构建与表达被引量：3
- 2012年
- 目的构建人p66Shc／腺病毒表达载体，观察其在内皮细胞中的表达。方法扩增p66Shc基因并与腺病毒骨架载体进行体外重组连接，经筛选、测序确认后转染进HEK293A细胞进行包装，10d后收集细胞裂解液感染HEK293A细胞和脐静脉内皮细胞，48h后分别用Western印迹和免疫荧光细胞化学法检测p66Shc蛋白表达水平。结果经测序确认目的基因p66Shc成功克隆入腺病毒载体中，转染HEK293A细胞后可在显微镜下观察到特征性的细胞病变效应，Western印迹检测和免疫荧光细胞化学法检测均表明感染了AdenoX-p66的HEK293A细胞和内皮细胞中p66Shc蛋白表达水平显著升高。结论人p66Shc／腺病毒表达载体构建成功并能在内皮细胞中表达。
- 徐蓉胡刚林雅军柳江魏洁程建华许晓东孙洪范
- 关键词：P66SHC腺病毒同源重组脐静脉内皮细胞
- 重组人p66Shc腺病毒表达载体的构建及其对Hela细胞增殖的抑制作用
- 徐蓉
- 1型糖尿病小鼠肝脏的口服葡萄糖代谢及差异表达基因被引量：1
- 2011年
- 目的:观察口服葡萄糖在1型糖尿病小鼠肝脏的代谢,比较1型糖尿病小鼠与正常小鼠口服葡萄糖后肝组织基因表达的差异。方法:链脲霉素(STZ)诱导C57雄性小鼠1型糖尿病模型为实验组(n=8),正常C57雄性小鼠为对照组(n=8)。每组随机取2只,按50 ml/kg给予4%葡萄糖生理盐水溶液灌胃,2 h取肝组织检测基因表达谱(Mouse Genome 430 2.0 Array)。每组另6只,同样剂量给予含14C标记葡萄糖。结果:糖尿病小鼠口服14C标记葡萄糖2 h后,肝组织同位素水平是正常对照组的4倍。以正常对照组为参比,共有94条基因的表达变化差异在2倍以上,其中上调基因61个,下调基因33个。根据功能基因组分析,11条差异表达基因与脂代谢、胆固醇代谢相关,其中7条上调基因与脂、胆固醇合成相关,1条下调基因与脂肪酸分解相关。结论:STZ诱导的1型糖尿病小鼠口服葡糖后2 h,肝脏脂、胆固醇合成相关基因表达增高。
- 王欣然张超徐蓉唐丽娜孙洪范
- 关键词：糖尿病胰岛素糖代谢脂代谢
