徐晓可
- 作品数：33 被引量：256H指数：11
- 供职机构：广东省微生物研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省粤港关键领域重点突破项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学农业科学更多>>
- 食品中沙门菌特异性二重聚合酶链反应检测方法的研究被引量：6
- 2008年
- 目的建立二重聚合酶链反应(PCR)方法快速检测食品中的沙门菌(Salmonella spp.)。方法以沙门菌特异性基因invA、hilA为靶基因,选择2对引物对16株沙门菌和24株非沙门菌进行扩增,验证二重PCR的特异性。梯度稀释DNA,以不同稀释度的DNA PCR扩增。在猪肉中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增。应用该方法检测实际样品。结果以invA、hilA为靶基因的两对引物对沙门菌的检出均有很好的特异性,PCR能检出0.1332pg的沙门菌DNA,人工污染猪肉的检测限为2.5cfu/ml。本研究共检测了53份食品样品,有21份检出了沙门菌。结论建立了适用于肉类、水产品及蛋糕等食品中的沙门菌检测的快速、灵敏、特异的二重PCR方法。
- 徐晓可吴清平张菊梅周艳红邓梅清
- 关键词：沙门菌食品食品微生物食源性疾病
- 食品中单核细胞增生李斯特菌特异性二重PCR检测方法的研究被引量：6
- 2009年
- 目的:建立二重PCR方法特异检测食品中的单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)。方法:以编码内化素B的inlB基因和以编码LM溶血素O的hly基因为靶基因,设计筛选引物,建立二重PCR体系。对5株LM和35株非LM进行特异性检测。梯度稀释LM基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增。在黑椒烤鸡样品中以不同菌量人工污染,增菌培养10 h,提取DNA进行PCR扩增。应用该方法对实际样品进行检测。结果:以inlB、hly为靶基因的2对引物对LM的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到0.8769 ng。人工污染样品,当起始污染量为2.7×102cfu/g时,37℃增菌培养10 h即可检出。一共检测了55份食品样品,检出1份阳性样品,与传统方法一致。结论:建立了适用于食品中LM检测的特异二重PCR方法。
- 徐晓可吴清平张菊梅邓梅清周艳红
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌二重PCR食品
- 肉类中大肠杆菌O157：H7多重PCR检测方法的建立被引量：23
- 2008年
- 以编码大肠杆菌O157抗原的rfbE基因、编码H7抗原的fliC基因以及编码毒力因子的eaeA基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了检测大肠杆菌O157:H7的多重PCR体系,扩增产物分别为291bp、625bp、368bp,采用30株细菌验证了该多重PCR具有特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到91.35pg;在存在干扰菌鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的情况下,当起始污染量为1.4CFU/mL时,37℃培养6h即可检出。在30份肉类样品中,有3份检出了大肠杆菌O157:H7。本研究建立的多重PCR方法可特异、灵敏地实现对大肠杆菌O157:H7的检测。
- 徐晓可吴清平周艳红张菊梅杨小鹃
- 关键词：大肠杆菌O157:H7多重PCR肉类
- 食品污染克罗诺杆菌(阪崎肠杆菌)的分离及鉴定被引量：24
- 2013年
- 【目的】对300份奶粉样品和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测,并对分离得到的克罗诺杆菌进行鉴定。【方法】通过分子方法和9管法对奶粉和其他食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测;通过吲哚产生、丙二酸盐利用、卫矛醇、肌醇、松三糖和松二糖发酵产酸等六种生化试验对分离株进行鉴定;同时对分离株的16S rRNA基因序列进行同源性分析,通过N-J(Neighbour-Joining)法构建系统发育树。【结果】定量检测结果表明,350份样品中有23份样品分离出克罗诺杆菌,共分离到24株克罗诺杆菌,检出率为6.6%;23份受污染样品中有4个样品的克罗诺杆菌大于100 MPN/100g;24株克罗诺杆菌被鉴定到种或亚种,其中19株为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii);2株为丙二酸盐克罗诺杆菌(C.malonaticus);2株为都柏林克罗诺杆菌奶粉亚种(C.dublinensis subsp.lactaridi);1株为莫金斯克罗诺杆菌(C.muytjensii)。【结论】分子方法和9管法联用适合污染率低而定量检测要求高的克罗诺杆菌的奶粉调查;采用生化和分子生物学方法将24株分离株鉴定到种或亚种,其中阪崎克罗诺杆菌为优势种;奶粉中克罗诺杆菌的污染问题对婴幼儿安全存在隐患,应引起消费者和有关部门的重视。
- 董晓晖李程思吴清平张菊梅莫树平郭伟鹏杨小鹃徐晓可
- 关键词：RRNA基因系统发育树
- PCR和传统方法在大样本低概率细菌检验项目中的联合应用被引量：8
- 2009年
- 目的:建立提高大样本低概率的细菌阳性检出率,降低工作强度,节约检测成本的一种检测程序。方法:采用高度特异、敏感的PCR作为样品初筛试验,结合传统方法培养、分离、鉴定。结果:342份奶粉样品,PCR检测阳性16份,阳性率为4.68%;传统方法检测阳性样品5份,阳性率为1.46%。检测耗时折算PCR法仅为传统方法的16.67%(10/60)。结论:PCR作为初筛试验,与传统方法的联合应用,为致病菌检测提供了一个新的思路,值得在大样本低概率细菌检验项目中推广应用。
- 杨小鹃吴清平周艳红徐晓可张菊梅郭伟鹏
- 关键词：PCR阪崎肠杆菌
- 阪崎肠杆菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒
- 本发明公开了一种阪崎肠杆菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和检测试剂盒。本发明针对阪崎肠杆菌的ompA基因，设计和筛选了一套特异性检测引物组以及含有该检测引物组的检测试剂盒和利用该检测试剂盒通过LAMP的检测方法，对...
- 徐晓可吴清平张淑红张菊梅
- 文献传递
- PCR技术检测食源性致病菌的研究进展被引量：17
- 2007年
- 食源性致病菌的检测技术是食源性疾病预防与控制的关键环节。PCR是近年来广泛应用于食源性致病菌快速检测的方法之一。在食源性致病菌中,用于PCR检测的靶基因包括各种毒力基因、酶基因及特异性鉴别基因。这些靶基因的发现推动了食源性致病菌PCR快速检测的发展。
- 徐晓可吴清平张菊梅周艳红
- 关键词：食源性致病菌PCR靶基因检测试剂盒
- 金黄色葡萄球菌的多重PCR-MIX快速检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种金黄色葡萄球菌的多重PCR-MIX快速检测试剂盒及检测方法，该试剂盒主要包括有：PCR MIX，该PCR MIX含有：2×PCR buffer，1.0～3.0mmol/L MgCl<Sup>2</Sup>...
- 徐晓可吴清平邓梅清张菊梅郭伟鹏
- 文献传递
- 水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究被引量：9
- 2008年
- 建立快速检测水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahae-molyticus)的二重PCR方法。以副溶血性弧菌特异性基因tlh和toxR为靶基因,选择2对引物,对5株副溶血性弧菌和40株非副溶血性弧菌进行特异性检测;梯度稀释副溶血性弧菌基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增;在鱼肉样品中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增;应用该方法对实际样品进行检测。以tlh和toxR为靶基因的两对引物对副溶血性弧菌的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到28.76pg;人工污染样品,当起始污染量为1CFU/mL时,37℃增菌培养10h即可检出。本试验一共检测了21份水产品样品,有14份检出了副溶血性弧菌。
- 徐晓可吴清平张菊梅杨小鹃周艳红
- 关键词：副溶血性弧菌二重PCR水产品
- 副溶血性弧菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和试剂盒
- 本发明公开了一种副溶血性弧菌的环介导等温扩增检测引物组、检测方法和试剂盒。该检测引物组为：上游外引物为F3：5’-GCAAAGAAACGCTTGGCG-3’；下游外引物B3：5’-TGCATAGCAATGTTGTCGCT...
- 徐晓可吴清平张菊梅程健恒张淑红邓梅清
- 文献传递
