彭清林
- 作品数:51 被引量:119H指数:6
- 供职机构:中日友好医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金首都卫生发展科研专项北京市科委基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 肌球蛋白结合蛋白C的表达和鉴定被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨优化原核表达方法以及用亲和层析的方法制备重组人快型肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC2)。方法:根据MYBPC2的序列设计一对引物,在上下游引物的5’端分别加上BamHI和HindⅢ酶切位点。以健康人骨骼肌cDNA为模版,扩增第284位至第579位氨基酸残基对应的碱基序列,经双酶切后插入pMalc-5e载体中,测序鉴定重组质粒的序列,将构建好的重组质粒转化大肠杆菌中,IPTG诱导重组蛋白MYBPC2-MBP的表达,亲和层析纯化重组蛋白,蛋白电泳法鉴定蛋白的分子量及纯度,测定蛋白浓度并估算蛋白纯化后得率。用商品化的抗MYBPC2抗体证实所表达蛋白序列的正确性。以纯化的蛋白免疫动物获得动物免疫血清,用Western Blot的方法鉴定此蛋白的免疫原性。结果:人MYBPC2蛋白表达载体构建成功,每升大肠杆菌菌液可生产纯化后的重组MYBPC2蛋白约30mg,Western Blot显示重组蛋白与其抗体及抗血清特异结合。结论:本方法可以高效制备生产人MYBPC2蛋白片段,具备良好的抗原特异性和免疫原性。
- 张寅丽舒晓明彭清林杨阚波周航张思功杨文芳赵千子卢昕王国春
- 关键词:蛋白表达免疫原性
- 成人特发性炎性肌病骨骼肌组织检查病理评分在评估疾病活动度中的价值被引量:4
- 2019年
- 目的探讨特发性炎性肌病(IIM)患者肌活组织检查(肌活检)病理评分与疾病活动度的相关性。方法按照国际肌炎评估和临床研究组制定的特发性炎性肌病疾病活动度评价工具对中日友好医院风湿免疫科2008年12月至2017年6月住院的已行肌活检的423例IIM患者的疾病活动度进行评分。所有IIM肌活检组织进行主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、CD3和CD20分子免疫组织化学染色,肌组织中按照肌细胞、炎症、血管和结缔组织4个部位分别评估,对IIM患者的肌活检进行病理评分。分析IIM患者肌活检病理评分与IIM疾病活动度的相关性。应用SPSS20.0软件进行统计学分析。非参数检验采用Mann-WittneyU检验、秩和检验和Fisher精确检验比较组间的差异。相关性分析使用Spearman等级相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。结果肌活检病理总评分与IIM疾病总体活动度呈弱相关(r=0.228,P<0.05),并且与肌肉活动度视觉模拟尺度评分(VAS)和肌酸肌酶(CK)升高相关(r=0.407和0.466,P值均<0.05)。127例未经治疗的IIM中DM占92例,PM占35例。在未经治疗的DM患者中,肌肉病理总评分、肌细胞病变和炎症浸润与患者肌肉活动度VAS相关(r=0.300,0.312和0.241,P值均<0.05);而在未经治疗的PM中,肌细胞病变评分与疾病总体活动度相关(r=0.478,P<0.05)。结论开展肌肉病理评分可用于指导PM疾病活动度和DM骨骼肌疾病活动度的判断。
- 张立宁刘宏艳田小兰郑晓晓张亚妹李文丽刘青艳彭清林卢昕
- 关键词:肌炎骨骼病理疾病活动度
- 髓源性抑制细胞在自身免疫病中的研究进展被引量:1
- 2018年
- 髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)于1980年在荷瘤小鼠和肿瘤患者体内被发现,是早期骨髓祖细胞的种群。最初MDSC在肿瘤领域被广泛关注,因为其具有抑制抗肿瘤免疫的功能;随着研究的深入,MDSC在其他领域也得到大家的重视。
- 梁琳王国春彭清林
- 关键词:抑制细胞髓源性自身免疫病骨髓祖细胞抗肿瘤免疫
- 特发性炎性肌病肌肉病理特征与临床分型的关联性研究被引量:1
- 2017年
- 目的:分析特发性炎性肌病(IIM)不同临床亚型的病理特征,研究IIM临床分型和病理分型的关系。方法:将2015年1月~2016年10月在中日友好医院住院的195例IIM患者,按临床分型分为皮肌炎(DM)、多发性肌炎(PM)、重叠性肌炎(OM)和肿瘤相关性肌炎(CAM)组,按肌肉病理特征分为病理型皮肌炎(pDM)、病理型多发性肌炎(pPM)、坏死性肌炎(NAM)、非特异性肌炎(USM)、MHC-I型肌炎(MHC-I)和正常组。分析患者的临床特征、临床型与病理型的关联性。结果:195例IIM患者中,DM、PM、OM和CAM分别占74.9%、14.9%、6.2%和4.1%;USM是所有IIM中最多见的病理类型,占34.9%,而PM中NAM病理分型最多见,占48.3%。NAM组患者的血清肌酶水平与其他病理分型组比较,均显著升高(均P<0.05)。MHC-I型组和正常组,肌无力发生的比例最低,正常组发生ILD的比例最少。结论:USM和NAM是IIM中常见的2种病理类型。通过肌活检病理特征对IIM进行分型,与患者的临床症状尤其是肌肉损伤程度关联性更强。
- 田小兰刘青艳李文丽彭清林卢昕
- 关键词:特发性炎性肌病临床分型
- 抗PUF60抗体在炎性肌病患者中的分布特点及临床意义
- 2017年
- 目的:检测抗PUF60抗体在中国特发性炎性肌病(IIM)患者中的阳性率,并分析其相关的临床意义。方法:本研究共纳入388例IIM患者[275例皮肌炎(DM)、76例多发性肌炎(PM)及37例肌炎-重叠综合征]和167例健康对照(HCs)。酶联免疫吸附测定(ELISA)测定入组患者及健康对照的抗体滴度,并联合免疫印迹实验验证ELISA结果的可靠性。结果:抗PUF60抗体可见于各IIM亚组,阳性率均高于健康对照组,包括11.3%(P<0.01)的DM、7.9%(P<0.05)的PM和21.6%(P<0.01)的肌炎重叠综合征患者。在经典DM中,该抗体常见于肌炎抗体阴性的患者(P<0.05),并与技工手发生相关;且该抗体在无肌病性皮肌炎中阳性率较高,与皮肤溃疡的发生相关。结论:抗PUF60抗体在中国肌炎患者中普遍存在,且不同亚型的临床相关性各异,提示抗PUF60抗体或其靶抗原PUF60可能在不同亚型的肌炎中参与了不同的致病过程。
- 张亚妹彭清林王国春
- 关键词:特发性炎性肌病剪接体
- 血清微小RNA-150-5p水平在皮肌炎中的临床意义被引量:3
- 2019年
- 为检测皮肌炎(dermatomyositis,DM)血清微小RNA(microRNA,miR)-150-5p的表达水平,探讨其与肌炎特异性自身抗体(myositis specific autoantibody, MSA)和不同临床表型的相关性,收集2011年3月至2016年2月在中日友好医院风湿免疫科住院治疗的DM患者血清49例,健康对照者血清30例,提取血清总RNA,采用实时荧光定量PCR检测血清miR-150-5p的相对表达水平,分析其与MSA和不同临床表型的相关性。结果显示,DM组患者血清miR-150-5p水平[4.37(2.49, 7.11)]低于健康对照组[10.67(1.59, 34.66),P=0.002],抗MDA5抗体阳性患者血清miR-150-5p水平(3.58±2.02)低于抗MDA5抗体阴性患者(6.19±5.27,P=0.017);抗核基质蛋白2(nuclear matrix protein 2, NXP2)抗体阳性患者血清miR-150-5p水平(2.89±2.00)低于抗NXP2抗体阴性患者(5.99±5.02,P=0.047)。不同间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)组织学分型患者间血清miR-150-5p水平差异具有统计学意义(P<0.05)。提示miR-150-5p可能参与了DM自身抗体的致病过程。
- 叶利芳杨阚波左瑜彭清林卢昕王国春王国春
- 关键词:皮肌炎
- 皮肌炎血清CXCL10水平与疾病活动度的相关性
- 2016年
- 目的检测DM患者血清CXCLl0水平并阐明其临床意义。方法ELISA检测61例DM患者、32名健康人血清CXCL10水平;利用国际肌炎组织制定的炎性肌病评价工具(MDAAT)评估DM患者疾病活动度,并分析血清CXCL10水平与疾病活动度的相关性。组间比较用独立Mann-Whitney U检验,相关牲分析采用Spearman秩检验。结果DM患者血清CXCL10水平[1002.65(446.80,1679.42)pg/ml]显著高于健康人[85.85(65.88,111.05)pg/ml;Z=-6.886,P=0.000],合并肺间质病变(ILD)的DM患者血清CXCL10水平[1029.40(452.25,2102.10)pg/ml]高于未合并ILD者[464.25(161.65,1048.63)pg/ml;Z=-2.975,P=0.003]。横断面研究显示血清CXCLIO水平与DM患者的MYOACT-总活动度评分(r=614,P=0.000)、MYOACT-肌肉活动度评分(r=0.45,P=0.000)、MYOACT-皮肤黏膜活动度评分(r=0.439,P=0.000)、MYOACT-肺脏活动度评分(r=0.373,P=0.004)呈正相关。结论DM患者血清CXCL10水平显著升高,并且与疾病活动度显著相关。CXCL10可能参与DM发病机制,检测其血清浓度对疾病的活动情况及治疗预后具有一定临床提示意义。
- 张亚妹彭清林卢昕杨阚波李珊珊尹利国王国春
- 关键词:皮肌炎趋化因子CXCL10疾病活动度
- 血清抗转录中介因子1-γ抗体在多发性肌炎/皮肌炎合并肿瘤诊断中的价值被引量:12
- 2013年
- 目的探讨抗转录中介因子(TIF)1-γ抗体在多发性肌炎,皮肌炎患者血清中的分布状况及其在多发性肌炎,皮肌炎合并肿瘤早期诊断中的价值。方法多发性肌炎和皮肌炎患者共146例[多发性肌炎50例,皮肌炎96例,其他结缔组织病组95例[系统性红斑狼疮(SLE)33例,类风湿关节炎(RA)54例,硬皮病(SSc)8例)]。健康对照40名。免疫沉淀非标记抗原法检测血清抗TIF1-γ抗体,分析该抗体在各组疾病中的阳性率及其与肌炎合并肿瘤的相关性。采用t检验,Mann-Wittney U检验,X^2检验及Fisher确切概率法进行统计学分析。结果96例皮肌炎患者中共有17例(18%)患者抗TIF1-γ抗体阳性,阳性率为18%,其中典型皮肌炎5例(7%),儿童皮肌炎1例(17%),无肌病性皮肌炎2例(25%),皮肌炎合并恶性肿瘤9例(64%);50例多发性肌炎中仅有1例阳性(2%);其余结缔组织病和健康对照组均为阴性。14例肌炎合并肿瘤患者均为皮肌炎患者。血清抗TIFf.1抗体在皮肌炎合并肿瘤中的阳性率为64%,在皮肌炎不合并肿瘤中的阳性率为7%,与皮肌炎合并肿瘤呈正相关(OR=17.74,95%CI5.7.55.4);其诊断皮肌炎合并肿瘤敏感性为64.3%,特异性为92.7%,阳性预测值为56.3%,阴性预测值为90.8%。抗TIF1-γ抗体阳性的患者发病年龄显著高于阴性组,差异有统计学意义(P〈0.01),与抗TIF1-γ抗体阴性组相比,抗体阳性组合并肺间质疾病的发生率低(P〈0.01),伴发V字疹的阳性率高(段0.05),差异均有统计学意义。结论血清抗TIF1-γ抗体是皮肌炎合并肿瘤敏感和特异的血清学指标,它为筛查皮肌炎合并肿瘤提供有效的手段,对于皮肌炎的患者可在确诊的同时检测抗TIF1-γ抗体,可用于早期诊断肿瘤,对改善预后有重要的意义。
- 杨阚波舒晓明彭清林王艳王国春卢昕
- 关键词:多发性肌炎皮肌炎
- 皮肌炎患者血清B细胞活化因子水平与疾病活动度相关性研究被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨DM患者血清B细胞活化因子(BAFF)水平与疾病活动度的相关性.方法 定量ELISA方法检测61例DM患者以及25名健康对照血清BAFF浓度;利用国际肌炎组织制定的炎性肌病评价工具评估DM患者疾病活动度,并分析血清BAFF水平与DM疾病活动度的相关性.组间比较用独立Mann-WhitneyU检验,相关性分析采用Spearman秩检验.结果 横断面研究显示DM患者血清BAFF水平显著高于健康对照[(274 7±264 6)pg/ml与(832±170) pg/ml,Z=-5.492,P<0.01];DM患者血清BAFF浓度与疾病总活动度(r=0.501,P<0.001)、肌肉活动度(r=0.303,P<0.05)、皮肤黏膜活动度(r=0.467,P<0.01)呈显著正相关;血清BAFF水平升高与DM患者肺间质病变的发生具有显著相关性(x2=17.238,P<0.01).纵向研究同样显示DM患者血清BAFF浓度与疾病总活动度(r=0.658,P<0.01)、肌肉活动度(r=0.307,P<0.05)、皮肤黏膜活动度(r=0.565,P<0.01)呈正相关.DM患者治疗后,随着疾病活动度的下降,血清BAFF水平显著降低.结论 DM患者血清BAFF水平与疾病活动度呈正相关性,血清BAFF是反映DM患者疾病活动度的生物标记物.
- 彭清林张学智王艳卢昕王国春
- 关键词:皮肌炎B细胞活化因子
- 中国人群中多发性肌炎的发病率及临床特征被引量:1
- 2023年
- 目的分析特发性炎性肌病(IIM)中多发性肌炎(PM)的发生率及其特征,探讨IIM中PM是否被过度诊断。方法纳入2008—2019年于中日友好医院风湿免疫科住院依据Bohan与Peter标准诊断的所有IIM患者。确定诊断的PM(definite PM,dPM)定义为具有典型的PM临床特征和病理特征,包括肌酸激酶(CK)升高和肌无力,肌活检呈现肌细胞膜表达MHC-I阳性和CD8+T细胞浸润肌内膜。同时,参照IIM各亚型的最新诊断标准,排除DM、抗合成酶综合征(ASS)、免疫介导的坏死性肌病(IMNM)、散发性包涵体肌炎和其他肌病。应用SPSS 24.0进行统计学分析。Kruskal-Wallis检验和χ^(2)检验用于比较dPM组和其他IIM亚型患者临床特点的差异。结果共1259例IIM纳入研究,其中1015例(80.6%)为DM,244例(19.4%)为PM。参照严格定义的dPM标准,IIM中仅有0.5%(6/1259)的患者可被诊断为dPM。原先诊断为PM的患者在新的IIM亚型分类中多数为IMNM和ASS,其中48.0%(117/244)为IMNM,32.0%(78/244)为ASS。6例dPM患者中女性4例,占66.7%,其中1例合并RA,1例合并SSc。所有dPM患者均有肌无力,轻度CK升高[611(391,1451)]U/L,肌炎特异性自身抗体均为阴性。除了1例dPM患者因合并慢性阻塞性肺疾病,未接受免疫调节治疗外,其余5例患者均予低/中等剂量糖皮质激素联合或不联合免疫抑制剂治疗。在随访(38±26)个月后,患者肌力均改善。结论PM是一类非常罕见的IIM临床亚型,PM在临床上存在过度诊断。严格定义的PM是一类临床症状轻,预后好的疾病。
- 孙超田小兰杨红霞杨阚波李珊珊江薇彭清林王国春卢昕
- 关键词:多发性肌炎特发性炎性肌病