张贇
- 作品数：11 被引量：34H指数：4
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- CD226(PTA1)单抗诱导NK细胞克隆杀伤靶细胞的研究被引量：7
- 2002年
- 目的 :研究CD2 2 6分子在NK细胞克隆上的表达及功能。方法 :用有限稀释法建立NK细胞克隆并鉴定。采用重导向杀伤实验 (redirectedcytotoxicityassay ,RCA)观察CD2 2 6单克隆抗体对NK细胞克隆杀伤作用的影响 ,并用ELISA方法检测杀伤相培养上清中细胞因子水平的动态变化。结果 :获得 1株NK细胞克隆。在重导向杀伤实验中 ,CD2 2 6单克隆抗体能明显提高NK细胞克隆的杀伤水平 ;促进NK细胞克隆IFN γ和GM CSF的分泌。结论 :CD2 2 6是一种新的NK细胞活化性受体 ,IFN γ和GM CSF水平升高可能与NK细胞克隆功能有关。
- 张贇欧阳为明韩卫宁杨琨李琦张继帅金伯泉
- 关键词：CD226细胞克隆RCAGM-CSF
- 血小板T细胞活化抗原1分子在NK细胞上的作用研究被引量：11
- 2001年
- 目的 研究血小板T细胞活化抗原 1(PTA1)分子在NK细胞杀伤过程中的作用。方法 应用重导向细胞毒实验 ,探讨了PTA1分子对混合淋巴细胞反应中活化的NK细胞杀伤作用的影响。结果 在重导向细胞毒实验中 ,PTA1McAb能明显上调NK细胞及CTL的杀伤活性。结论 PTA1分子在NK细胞上具有刺激性受体的功能。
- 张贇金伯泉欧阳为明李林李德敏朱勇贾卫刘雪松李琦张新海
- 关键词：血小板NK细胞杀伤活性
- UPR经IRE1α通路上调HRD1表达诱导肝癌细胞抵抗NK细胞杀伤
- 背景:NK细胞在对肿瘤细胞的杀伤中发挥重要作用,而肿瘤细胞亦采用多种方式逃避NK细胞的杀伤。尽管已证实非折叠蛋白反应(unfolding protein response,UPR)促进肿瘤细胞的生存、发展,影响肿瘤细胞对...
- 陈丽华龚玖瑜刘蓉蓉王颖方亮庄然张贇李琦金伯泉
- 关键词：肝癌NK细胞
- 抗肿瘤基因疫苗载体的构建及抑瘤活性研究
- 目的：构建可表达具有强免疫源性，且可同时诱导体液免疫和细胞免疫的复合肿瘤抗原的基因疫苗载体，使其具有较强的抑瘤活性.意义：基因疫苗可以诱导、调控免疫应答且简单多样，给多种疾病，尤其是恶性肿瘤的治疗带来希望.肿瘤特异性抗体...
- 魏玉英孙元杰李海涛龚玖瑜张贇金伯泉杨安钢宋朝君杨琨
- 关键词：基因疫苗恶性肿瘤LAMP
- 人CD226(PTA1)分子胞膜外区截短体真核表达载体的构建、表达及其识别结构域的分析被引量：1
- 2003年
- 目的 确定一套CD2 2 6单克隆抗体 (McAb)识别CD2 2 6分子胞膜外区结构域的部位。方法 应用计算机软件分析CD2 2 6分子蛋白质序列疏水性 ,确定其亲水性区域。采用PCR方法扩增CD2 2 6分子基因序列 ,分别缺失相应亲水性区域 ,构建CD2 2 6截短体重组真核细胞表达载体pcDNA3 PTA1T1和pcDNA3 PTA1T2。测序正确后 ,转染COS7细胞 ,抗CD2 2 6分子多克隆抗体间接免疫荧光染色 ,流式细胞术检测CD2 2 6分子截短体的表达。表达成功后 ,采用间接免疫荧光染色和流式细胞术分析 ,用一套CD2 2 6McAb检测与截短突变体的免疫反应性 ,从而确定CD2 2 6McAb识别CD2 2 6分子结构域的部位。结果 PCR扩增出CD2 2 6分子相应目的片段序列 ,定向克隆入pcDNA3真核表达载体 ,DNA序列测定正确。转染COS7细胞后 ,流式细胞术检测CD2 2 6截短体分子有较高水平的表达。CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1和FMU1～ 7均可识别CD2 2 6全长分子 ;LeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU4和FMU5与截短突变体PTA1T1和PTA1T2均无反应性 ;FMU3可结合PTA1T1分子 ,不结合PTA1T2分子 ;FMU6和FMU7均可结合PTA1T1及PTA1T2分子。结论 CD2 2 6McAbLeoA1、NewE1、FMU1、FMU2、FMU3、FMU4和FMU5识别CD2 2 6分子胞膜外区D1结构域 ,其中FMU3识别的位点位于V1和V2环之间 ;FMU6?
- 贾卫刘雪松张新海朱勇张贇李琦杨琨欧阳为明宁双飞金伯泉
- 关键词：CD226PTA1基因表达
- p38MAPK基因诱导胶质瘤细胞凋亡机制的初步研究被引量：7
- 2002年
- 目的 初步探讨p38MAPK基因诱导大鼠胶质瘤细胞C6发生凋亡的机制。方法 利用脂质体介导法将p38MAPK基因导入C6细胞中,用夹心法ELISA检测细胞培养液中sTNF-α水平的变化,用流式细胞仪检测膜TNF-α和膜TNFRI水平的变化。结果 转染pCMV5-p38MAPK后,细胞培养液中sTNF-α水平明显升高,膜TNF-α水平无明显变化,膜TNFRI表达升高。结论 p38MAPK可能通过上调sTNF-α和膜TNFRI水平而诱导C6细胞凋亡。
- 章必成李青张贇杜光祖
- 关键词：胶质瘤基因表达
- 小鼠PTA1/CD226分子参与杀伤性T细胞(CTL)的分化被引量：2
- 2006年
- 目的阐明小鼠PTA1(mPTA1)/mCD226对杀伤性T淋巴细胞(CTL)分化的影响。方法构建小鼠PTA1-hIgFc真核表达载体,表达并纯化mPTA1融合蛋白,免疫家兔,获得抗mPTA1的多克隆抗体,并用偶联mPTA1-Fc融合蛋白的Sepharose-4B亲和层析柱纯化多克隆抗体。间接免疫荧光染色后经流式细胞术鉴定多克隆抗体的特异性。通过混合淋巴细胞培养(MLC)诱导产生CTL效应细胞,以51Cr释放试验检测mPTA1多克隆抗体在MLC中对T淋巴细胞分化及杀伤功能的影响。结果获得了mPTA1-hIgFc融合蛋白和针对mPTA1胞膜外区的多克隆抗体,该抗体能与转染细胞表面天然mP-TA1分子结合。mPTA1多克隆抗体对MLC诱导的CTL的杀伤有明显的抑制作用,并呈剂量依赖关系,mPTA1多抗加入的时间愈早,抑制杀伤作用的效果愈明显。结论抗小鼠PTA1的多克隆抗体可在小鼠混合淋巴细胞培养中明显抑制CTL的分化。
- 徐向升张贇张新海庄然曹云新金伯泉
- 关键词：多克隆抗体混合淋巴细胞培养杀伤
- 截短型肿瘤抗原BAP31 DNA疫苗的构建及免疫效果分析
- 2009年
- 目的:通过LAMP分子的靶向作用,增强截短型BAP31肿瘤抗原(BAP31)的MHC-II提呈,激活更多的特异性CD4+T细胞,最终辅助增加CTL细胞的杀伤活性及特异性抗体产生.方法:构建重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31,同时构建重组质粒P-△AP31/EGFP和P-L-△AP31/EGFP.质粒P-△AP31/EGFP和P-L-△AP31/EGFP瞬时转染Hela细胞,荧光显微镜观察目的蛋白的表达;将重组质粒P-△AP31和P-L-△AP31免疫C57BL/6小鼠,间接ELISA检测免疫小鼠血清中特异性抗体效价;ELISPOT检测免疫脾淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ和IL-4的频率;乳酸脱氢酶释放法检测免疫小鼠特异性CTL反应.结果:经酶切鉴定及序列测定,成功构建截短型肿瘤抗原BAP31的DNA疫苗重组载体;用带EGFP报告基因的重组质粒转染Hela细胞,荧光显微镜观察可见特异性的绿色荧光;ELISA检测免疫小鼠血清,带LAMP组BAP31特异性抗体效价明显高于不带LAMP组(P<0.01),且两者均高于空质粒及正常对照组;ELISPOT检测分泌IFN-γ,IL-4的T细胞频率,带LAMP组明显增高(P<0.01);杀伤试验表明,特异性CTL活性带LAMP组较不带LAMP组显著提高,且均高于对照组(P<0.01).结论:构建的P-△AP31和P-L-△AP31基因疫苗不仅在小鼠体内均可诱导特异性体液和细胞免疫应答,而且P-L-△AP31基因疫苗的免疫效果显著优于P-△AP31,为进一步研制肿瘤治疗性基因疫苗奠定了基础.
- 孙元杰宋朝君魏玉英张贇金伯泉杨安钢杨琨
- 关键词：疫苗DNA酶联免疫斑点试验
- miR-xxx对NKL细胞活化杀伤功能的调控及其作用机制研究
- 目的：阐明新的影响NK细胞活化杀伤功能的miRNAs分子及其作用机制。意义：小分子RNA (miRNA)作为一类新的调控分子,已证实参与调节T细胞、B细胞和巨噬细胞的发育、分化和效应功能,但其在NK细胞活化杀伤中的作用鲜...
- 陈丽华龚玖瑜庄然张贇王涛杨安钢金伯泉
- 一种新的人活化T细胞抗原p140的分布及其功能的研究被引量：6
- 2001年
- 目的观察一种新的活化T细胞膜分子p140的分布、相对分子质量(Mr)和功能。方法用免疫荧光染色和流式细胞术观察p140分子的分布;采用重导向杀伤实验观察其对杀伤功能的调节;应用生物素标记细胞膜分子、免疫沉淀及化学发光测定p140的Mr。结果p140分子可选择性地表达于混合淋巴细胞培养(MLC)所产生的活化T细胞表面,而在抗CD3mAb、PHA、PMA或PMA+A23187几种刺激剂活化的人外周血单个核细胞(PBMC)上未见表达。p140还分布于一些人急性T细胞性白血病细胞系。在重导向杀伤实验中,p140与CD3分子有协同作用。p140Mr为140000。结论p140可能为一种新的移植抗原诱导的T细胞活化分子,同CD3分子具有协同刺激作用。
- 张继帅贾卫欧阳为明张贇韩卫宁刘雪松李琦金伯泉
- 关键词：活化T细胞白细胞分化抗原细胞素
