张桂梅
- 作品数：102 被引量：296H指数：9
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划教育部跨世纪优秀人才培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CpG-ODN被小神经胶质细胞摄取的特点及其在小神经胶质细胞内的分布
- 目的:CpG-ODN为强有力的免疫刺激剂,在抗肿瘤,抗感染等方面具很强的临床实用价值。为明确小神经胶质细胞摄取CpG-ODN的机制和特点,为其在神经系统的应用奠定基础,我们研究了CpG-ODN在小神经胶质细胞内的分布和摄...
- 张志仁张桂梅冯作化
- 关键词：细胞内分布
- 文献传递
- Hsp70-肿瘤抗原肽复合物防治小鼠黑色素瘤B16肺转移的作用
- 2004年
- 目的:探讨热休克蛋白70-肿瘤抗原肽复合物(Hsp70-antigen peptide complexes)对小鼠黑色素瘤B16转移的防治 作用。方法:分别从小鼠腿部接种的B16实体瘤及小鼠肺B16转移灶提取混合抗原肽,体外与Hsp70结合制得复合物,此复 合物免疫小鼠后用于预防或治疗经尾静脉接种转移至肺的B16黑色素瘤,观察其对肿瘤转移的防治作用。结果:Hsp70-肿瘤 抗原肽复合物免疫后肺转移灶节结数显著减少(P<0.01),体外脾细胞表现出对B16较高的杀伤率(P<0.01);并对肺转移 灶有显著的治疗作用(P<0.01),而从B16实体瘤提取的混合抗原肽制得的复合物比从肺转移灶提取的混合抗原肽制得复合 物有更好的治疗效果(P<0.01),表现出体外脾细胞对B16更高的杀伤率(0.01
- 陈洪涛张桂梅张慧冯作化
- 关键词：实体瘤转移灶HSP70
- 分泌型重组多肽sPD-1-CellⅠ(P／C-1)调节免疫细胞功能活性及抗肿瘤效应的研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建双结构域重组多肽sPD-1-Cell I(P／C-1)分泌型真核表达载体,并研究体内外表达重组多肽在调节免疫细胞功能活性及抗肿瘤方面的作用和机制。方法用PCR方法分别扩增出编码PD-1胞外结构域的cDNA与编码CH50 Cell I结构域的cDNA,3片段连接法插入分泌型真核表达载体pSecTagA中,获得真核表达载体pP／C-1;脂质体介导体外转染BHK细胞,G418筛选出阳性克隆,RT-PCR及免疫印迹检测重组多肽P／C-1的表达,MTT法检测表达产物对脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞杀伤活性的影响,建立小鼠H22肝细胞癌移植瘤模型,裸DNA肌肉注射法分别于体内转染sPD-1、CH50和P／C-1基因,观察并比较各处理因素对小鼠的肿瘤生长的抑制作用。结果酶切及测序鉴定结果表明重组多肽P／C-1真核表达载体构建成功,在BHK细胞培养上清中检测到重组多肽P／C-1的表达,后者能显著增强脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞对H22细胞的杀伤作用,体内实验表明,P／C- 1转染对肿瘤生长的抑制作用强烈而持久,显著优于sPD-1和CH50治疗组。结论重组多肽P／C-1真核表达载体构建成功,表达产物P／C-1兼有sPD-1和CH50的生物学功能,能够激活巨噬细胞和脾淋巴细胞,发挥二者协同抗肿瘤作用,从而将非特异性和特异性抗肿瘤免疫有机地结合起来,为肿瘤基因治疗提供新的思路。
- 邱惠张慧冯作化张桂梅
- 关键词：肿瘤免疫治疗
- B7-1B7-H1相对比例变化对Hsp70-肽复合物抗肿瘤免疫效应的影响被引量：4
- 2005年
- 目的 :探讨Hsp70-肽复合物对B7-1 B7-H1相对比例的影响及真核表达可溶性PD-1(sPD-1)对Hsp70-肽复合物抗肿瘤作用的影响。方法 :通过RT-PCR和半定量PCR技术检测Hsp70 肽复合物体外刺激和体内免疫对小鼠脾细胞正调控共刺激分子B7-1和抑制性共刺激分子B7-H1及其受体PD-1表达的影响 ;体内转染表达sPD-1后 ,观察Hsp70-肽复合物免疫小鼠的肿瘤生长以及脾淋巴细胞毒性的变化。结果 :基因表达检测表明 ,Hsp70- 肽复合物体外刺激的小鼠脾细胞B7-1mRNA和B7-H1mRNA的水平随时间而变化 ,B7-1/B7-H1比值随刺激时间而增高 ;Hsp70-肽复合物体内免疫小鼠后期脾细胞B7-1表达下降 ,B7-H1及其受体PD-1表达上调 ,B7-1/B7 H1比值逆转 ;体内表达sPD-1可显著增强和延长Hsp70 肽复合物的抑瘤效果 ;体内表达sPD-1可提高Hsp70-肽复合物免疫的荷瘤小鼠脾细胞的杀伤率。结论 :Hsp70-肽复合物的刺激引起共刺激分子B7-1和B7-H1表达的变化 ,B7-1/B7-H1的比例与激活效应相关 ,sPD-1通过阻抑B7-H1/PD-1途径、上调B7-1/B7-H1比例 ,可增强免疫应答 ,提高Hsp70
- 王小红张桂梅贺宇飞冯作化
- 关键词：共刺激分子PD-1B7-H1B7-1
- 大蒜素对T细胞激活的影响被引量：40
- 1995年
- 大蒜素在高浓度（５０ｕｇ／ｍｌ）时对Ｔ细胞激活有抑制作用。但在适当浓度（３．１２５～１２．５ｕｇ／ｍｌ）时则对Ｔ细胞激活有促进作用，这种促进作用与大蒜素抑制巨噬细胞产生ＮＯ的能力有关。大蒜素能够对抗Ｓ１８０细胞和艾氏腹水癌细胞产生的肿瘤免疫抑制因子对Ｔ细胞激活的抑制作用。提示大蒜素在肿瘤治疗中可能有较大的应用价值。
- 张桂梅冯作化郝天玲张慧姜志尧
- 关键词：大蒜素T细胞激活一氧化氮巨噬细胞
- 纤维结合素分子中Asp1961～Glu1978序列对三结构域多肽在大肠杆菌中表达的影响
- 1998年
- 构建了人纤维结合素（ＦＮ）的三功能结构域重组多肽的两个表达质粒，分别编码两个重组多肽：ＣＨ６２（ＦＮ的Ｐｒｏ１２３９～Ｓｅｒ１５１５经Ｍｅｔ和Ａｌａ１６９０～Ｖａ１２０４９相连）和ＣＨ６３（从ＣＨ６２中删除了Ｉｌｅ１８５０～Ｇｌｕ１９７８）．ＣＨ６２在大肠杆菌中的表达效率很低，而ＣＨ６３的表达效率则很高，结果提示ＦＮ分子中的Ａｓｐ１９６１～Ｇｌｕ１９７８序列是影响三结构域多肽在大肠杆菌中表达的关键结构．ＣＨ６３经过溶解和复性后，可通过肝素－琼脂糖亲和层析得到纯品，所得纯品具有结合肝素和结合细胞的功能，且结合细胞的能力比双结构域ＦＮ多肽更强，表明两个结合细胞的功能结构域均有活性．ＣＨ６３的制备为进一步研究具有更强的抑制肿瘤转移作用的基因工程制品奠定了基础．
- 冯作化李东张桂梅张慧范曲
- 关键词：纤维结合素多肽大肠杆菌
- 化疗药物体内外对免疫活性细胞的影响被引量：11
- 2002年
- 目的 :通过化疗对机体免疫细胞影响的研究 ,探讨肿瘤化疗后衔接生物治疗的最佳时效。方法 :采用细胞培养技术 ,观察化疗药物对培养的肿瘤细胞、小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的毒性作用 ;同时还观察化疗药物作用小鼠体内不同时间后 ,其对小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞代谢和激活功能的影响 ;运用细胞计数的方法 ,观察化疗对小鼠腹腔巨噬细胞和外周血免疫细胞的动力学影响 ;另外对经化疗药物注射 2d后的小鼠进行H2 2肝癌细胞接种 ,14d后解剖小鼠观察肿瘤生长。结果 :化疗药物体外对免疫细胞有很强毒性作用 ,体内使免疫细胞代谢降低 ,活化受阻 ,并使免疫细胞动力学发生改变 ,在化疗后第 3天免疫细胞数降至最低 ,约 10d左右恢复正常 ;化疗药物注射小鼠体内 2d后 ,再接种瘤细胞 ,肿瘤生长明显加快。结论 :化疗既降低机体免疫细胞数量 ,又抑制其功能 ,且在其杀瘤作用消失后还具有间接促瘤生长的作用 ,因此 ,化疗后立即实施以肿瘤免疫治疗为主的生物治疗是不恰当的 ,在化疗后间隔较长时间再给予生物治疗也是不恰当的 ,生物治疗应选择在化疗药物作用消失后 ,免疫细胞数降至最低或开始恢复时实施 ,方能取得较好的效果。
- 黄波冯作化张桂梅
- 关键词：化疗免疫细胞生物治疗耐药性
- 化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用被引量：5
- 2002年
- 目的 :了解化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用 ,为肿瘤的免疫治疗提供条件。方法 :构建小鼠En dostatin原核表达质粒 ,在大肠杆菌表达小鼠Endostatin融合蛋白。分离纯化后 ,与丝裂霉素C联合应用 ,治疗种植在小鼠腿部肌肉内的小鼠肝癌H2 2肿瘤。观察瘤重 ,免疫组化检测肿瘤血管密度和肿瘤坏死情况。结论 :单纯应用重组Endostatin治疗种植瘤即产生明显的抑制作用 ,和化疗合用后 ,抑制作用更强 ,肿瘤血管密度减少 ,肿瘤细胞大量坏死。
- 黎培员冯作化张桂梅李东薛胜利黄波
- 关键词：小鼠种植瘤肿瘤化疗免疫治疗
- 化疗剂量对肿瘤化疗后衔接生物治疗的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 :探讨化疗剂量对肿瘤化疗后衔接生物治疗的影响 ,为实施肿瘤化疗 +生物治疗联合方案时选择化疗剂量提供依据。方法 :以丝裂霉素C(MMC)注射小鼠 ,确定高低 2种不同剂量 ;采用pCH5 10质粒转染、Hsp70 肿瘤抗原肽复合物注射、质粒转染 +复合物注射 3种不同生物治疗方式衔接不同药物剂量的化疗 ,对H2 2肝癌细胞接种的小鼠进行治疗 ,对疗效进行比较。结果 :通过MMC的毒性试验确定了 10 0 μg为高剂量 ,5 0 μg为低剂量。肿瘤化疗后衔接不同方式的生物治疗 ,均可提高疗效 ,但高剂量化疗后衔接生物治疗的效果更佳。在低剂量化疗后 ,给予 3种不同生物治疗 ,它们之间的疗效并没有差别 ,而在高剂量化疗后 ,3种不同的生物治疗方式的疗效则出现了显著差异 ,化疗后同时进行pCH5 10质粒转染 +Hsp70 肿瘤抗原肽复合物免疫注射 ,效果最好。结论 :不同的化疗剂量对肿瘤化疗之后进行的生物治疗会产生的影响 ,在高剂量化疗下 ,生物治疗和化疗两者联合可以更好地提高疗效。
- 黄波冯作化张桂梅
- 关键词：肿瘤化疗剂量化疗生物治疗衔接
- IL-10上调PD-1配体的表达诱导耐受性树突状细胞形成被引量：3
- 2006年
- 目的探讨IL-10诱导耐受性树突状细胞(DCs)形成的机制。方法用30 ng/mL的IL-10处理Balb/c小鼠骨髓DCs,分别用RT-PCR和流式细胞术分析DCs的PD-1配体分子的表达,用MTT法测定DCs激活T细胞的能力,并用IL-10-DCs免疫荷瘤小鼠,观察H22肝癌细胞的生长情况。结果IL-10-DCs对T细胞的激活能力降低;在注射了IL-10-DCs的小鼠体内,H22肝癌细胞的生长速度快于对照组;免疫抑制性受体PD-1的配体分子在IL-10-DCs上的表达上调。结果提示,在H22肝癌模型上,IL-10上调PD-1的配体分子表达可能是免疫耐受的一个机制。结论减少IL-10的产生或封闭PD-1/PD-L路径可能是一个很有前景的肝癌生物学治疗策略。
- 贺兰湘张桂梅冯作化
- 关键词：肝癌树突状细胞IL-10
