张惠展
- 作品数：90 被引量：350H指数：8
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市重点科学建设项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生文化科学更多>>
- 基于创新平台的研究型人才培养模式探索被引量：4
- 2016年
- 如何在高校不断扩招及现今"厚基础、宽口径"的教育模式下培养生物科学类专业学术型、创新型优秀本科人才?本项目以大学生创新项目为平台,确立了本科创新人才培养的内涵和多元组织形式,以学生兴趣为切入点,以科学研究思路为导向,将创新实验模块与学术型人才培养模式有效融合,以激发学生创新热情,充分发挥学生个性化的"设计与学习"能力,从根本上扭转传统教学模式中仅以教师为主的教学过程,从而适应21世纪生命科学的飞速发展对学术型优秀人才的迫切需求,向社会输送具有原创研究开发能力的新型生物科学专业人才。
- 李鹏飞赵健范立强叶江吴海珍张惠展
- 关键词：研究型教学模式自主学习能力
- 林可霉素生物合成基因lmbH的回转化被引量：1
- 1999年
- 以ｐＩＪ７０２或ｐＩＪ４８６为载体构建了３个含有ｌｍｂＨ基因的重组质粒ｐＥＳＳ７０１、ｐＥＳＳ７０４和ｐＥＳＳ７０８，分别回转化林可霉素产生菌（Ｓ．ｌｉｎｃｏｌｎｅｎｓｉｓ）Ｂ４８，并随机挑选了６００个回转化克隆进行摇瓶初筛，以抑菌圈直径作为衡量林可霉素产量的标准。结果发现，每一种重组方案均得到了一个产量明显高于产生菌对照的回转化同源整合菌株，即６号（ｐＥＳＥ７０１）、８１号（ｐＥＳＥ７０４）和２４４号（ｐＥＳＥ７０８），折算成效价的提高率分别为７１．９％，１１０．６％和５３．６％。
- 张长生张惠展姚峰丁建忠
- 关键词：林可霉素生物合成
- 人乳铁蛋白肽的分子改良及在大肠杆菌中的表达研究被引量：2
- 2011年
- 采用SOE-PCR技术,设计合成hLF18-40的编码基因;以融合表达策略构建了pET-43.1a-hLF18-40表达质粒,并获得较高的可溶融合蛋白表达;将融合蛋白Nus-hLF18-40进行Ni2+柱亲和层析、除盐、浓缩后,用肠激酶切割释放抗菌肽hLF18-40,为今后基因工程法表达人乳铁蛋白肽提供了依据。同时,将hLF18-40的C末端氨基酸逐一缩短直至hLF18-32,用化学法合成hLF18-40、hLF18-39、hLF18-38、hLF18-37、hLF18-36、hLF18-35、hLF18-34、hLF18-33和hLF18-32等9条肽,采用肉汤微量稀释法分别测定其最小抑菌浓度(MIC),结果发现:hLF18-40的MIC为40μmol.L-1,hLF18-39的MIC略微下降(20～40μmol.L-1),hLF18-35的MIC与hLF18-40的相同。
- 蔡屾叶江张惠展
- 关键词：纯化抗菌活性
- 代谢工程的原理及应用
- 代谢工程(Metabolic Engineering)，亦称途径工程(Pathway Engineering)和代谢设计(Metabolic Design)，是一门利用分子生物学原理系统分析细胞代谢网络、并通过DNA重组...
- 张惠展吴海珍孙丽萍
- 关键词：代谢工程基因工程细胞代谢遗传修饰
- 文献传递
- 林可链霉菌黑色素生物合成基因的克隆与表达被引量：2
- 1998年
- 以pIJ702的melCl－C2基因为探针杂交林可链霉菌（Streptomyceslincolnensis）78－11染色体DNA，呈现出3．2kb的BamHI片段和2．6kb的SphI片段等一系列阳性条带。构建了含3．0～3．5kbBamHI片段的林可链霉菌78-11基因文库，从中分离克隆了黑色素生物合成基因melCl和melC2，并测定了含有mel基因的重组子pRSB336插入片段的全部DNA顺序。3152bpBamHI片段含有5个开放阅读框架，其中melCl和melC2与链霉菌属三个种的相应基因具有较高的同源性。此外，林可链霉菌78－11的melC2基因产物与人和鼠的酪氨酸酶轻微同源，分别为17．3％和24．5％。种种迹象表明，melCl、melC2和orf3组成黑色素生物合成操纵子结构。为了进一步鉴定上述克隆的林可链霉菌78-11黑色素生物合成基因，构建了分别含有新霉素抗性基因启动子和正反方向mel基因的重组质粒pPZ518和pPZ519，并转化变铅青链霉菌TK23。随机挑选的12个pPZ518转化子在R2YE培养基上均能分泌淡褐色色素，而所有的pPZ519和pES1转化子则都呈白色。
- 张惠展姚峰孙丽萍
- 关键词：黑色素DNA序列测定异源表达
- 藤黄微球菌海藻糖生物合成基因的克隆与鉴定被引量：3
- 2006年
- 首次从一株能利用淀粉产生海藻糖的藤黄微球菌中克隆了海藻糖生物合成基因。采用PCR方法结合非随机鸟枪法得到藤黄微球菌中低聚麦芽糖苷基海藻糖合成酶(MTSase)基因(MtreY)的全序列及低聚麦芽糖苷基海藻糖水解酶(MTHase)基因(MtreZ)的部分序列,其中MtreY共有2,370个碱基,编码789个氨基酸,表达产物分子量为86·7kD。同源性分析表明,与已报道的MTSase和α-淀粉酶家族成员具有相同的保守模体。将MtreY基因在大肠杆菌JM83中表达,证明表达产物具有预期的酶活性。
- 黄雪锋欧阳立明吴海珍叶江张惠展袁勤生
- 关键词：藤黄微球菌海藻糖
- 产黄青霉penDE基因的克隆及其在带小棒链霉菌中的表达
- 2007年
- penDE基因编码40k的酰基-CoA:6-APA酰基转移酶(IAT),可催化产黄青霉中青霉素生物合成途径的最后一步酶反应。利用RT-PCR法从产黄青霉中扩增得1.1kbp的不含内含子的penDE基因,并将其克隆至大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pUWL201,使penDE基因位于ermEp*启动子的下游,再将其转化带小棒链霉菌,获得了能够表达IAT的转化子。PDAB法和抗菌活性测定表明,所表达的IAT蛋白对6-氨基青霉烷酸和苯乙酰CoA有明显的活性。
- 郭长明张惠展
- 关键词：产黄青霉
- 林可霉素生物合成基因lmbU的敲除及其遗传回补被引量：3
- 2008年
- 利用DNA同源重组原理敲除S.lincolnensisNRRL 2936中lmbU基因,筛选获得该基因缺陷株S.lincolnensisJLUa2,其不具备林可霉素生物合成能力。利用构建的不同重组质粒转化缺陷株,发现含有质粒pHBUYX335的缺陷株重新获得了林可霉素生物合成能力。单一回补下游基因lmbY和lmbX不能使缺陷株重新恢复林可霉素合成能力;而同时回补lmbU基因和下游基因lmbY和lmbX却能回补这种缺陷,缺陷株林可霉素合成能力的丧失不仅是由下游基因的破坏而引起,证实了lmbU基因是林可霉素生物合成的关键基因。根据不同重组质粒上装载的基因片段性质推测了lmbU基因可能的启动子。
- 吕彩霞杨捷叶江吴海珍张惠展
- 关键词：同源重组
- 海藻酸裂解酶生物合成基因簇
- 本发明公开了一种海藻酸裂解酶生物合成基因簇，所述基因簇包括五个海藻酸裂解酶编码基因，分别为algV1、algV2、algV3、algV4、algV5，所述基因簇来源于解藻酸弧菌（Vibrio alginolyticus）...
- 叶江胥晴晴张惠展
- 4-戊基苯酚单克隆抗体的制备及其可变区的同源建模被引量：2
- 2017年
- 目的制备4-戊基苯酚(4-AP)单克隆抗体(mAb),通过分子生物学方法对其可变区cDNA克隆和同源建模,为4-AP单链抗体制备及抗体分子层面改造奠定基础,同时为4-AP的免疫学检测提供一种新方法。方法将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0细胞融合,筛选出F10阳性单抗细胞株。通过其mRNA的抽提,克隆出可变区cDNA序列,利用生物软件进行同源建模和分子对接。结果在最适条件下,其间接竞争ELISA(ic-ELISA)公式为y=A_2+(A_1-A_2)/(1+(x/x_0)~p)(A_1=1.28;A_2=-0.07;x_0=12 560.75;p=0.74),相关系数(R^2)为0.997,其最低检测限为0.65μg/mL。mAb重链和轻链分别属于IgG1型和Kappa型,其与4-AP的结合力为氢键和疏水作用。结论成功制备出1株稳定分泌的4-AP mAb的杂交瘤细胞株。通过同源建模对抗体可变区空间结构进行深入研究,为单链抗体及抗体改造提供参考,同时为4-AP含量检测提供新方法。
- 成磊吴海珍费静张鲁嘉叶江张惠展
- 关键词：单克隆抗体同源建模
