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提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株: 本申请公开了一种提高黑曲霉糖化酶生产能力的方法及重组黑曲霉菌株。通过外源质粒的启动子使用Tet‑on系统，利用同源重组在黑曲霉糖化酶高产的尿嘧啶缺陷型(pyrG‑)菌株上进行整合，使得酰基辅酶A脱氢酶编码基因、乙酰辅酶A...; 欧阳立明祁洁隋雨菲肖贤尊庄英萍

高渗提高凝结芽孢杆菌P4-102B菌株的电击转化效率被引量：7: 2016年; 【目的】凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)是一种非常有工业应用前景的微生物,但遗传转化的困难是限制对其进行代谢工程改造的关键因素。本研究主要考察生长培养基、电击缓冲液、复苏培养基中添加高渗剂如山梨醇、甘露醇等对凝结芽孢杆菌转化效率稳定性的影响,并对凝结芽孢杆菌电击转化条件进行优化。【方法】用穿梭质粒p NW33N电转化凝结芽孢杆菌P4-102B,系统地考察高渗条件下细胞生长阶段、感受态菌体浓度、电击缓冲液组分和复苏培养基组成等因素对转化效率的影响。【结果】同一电场压力下高渗体系转化效率较低渗体系明显提高且稳定性较好,菌体在含有0.5 mol/L山梨醇的LB培养基中生长到OD600为0.8时收集,用SMG[0.5 mol/L山梨醇,0.5 mol/L甘露醇,10%(质量体积比)甘油]电击缓冲液洗涤菌体4次制备感受态,在固定电场强度14 k V/cm、脉冲时间5 ms、1 mm规格的电转杯进行电击转化,电转化后立即加入含有0.5 mol/L山梨醇和0.38 mol/L甘露醇的LB复苏培养基培养,能够获得最佳的转化效率2.7×102 CFU/μg DNA。【结论】使用高渗电击转化法能够提高电击转化的稳定性和重复性,并且可以获得较高的转化效率。; 赵春云杨颂欧阳立明王永红; 关键词：凝结芽孢杆菌电击转化

过程启发式教学在基因组学课程中的实践被引量：21: 2006年; 基因组学是生物科学专业的一门高级专业课,前沿性强。总结了对基因组学课程应用过程启发式教学方针进行教学的经验,包括激发学习兴趣,实施讨论式教学,教学内容模块化和灵活化等。实践证明,这些措施能大大提高学生学习的自主性和积极性。; 欧阳立明肖君华张惠展; 关键词：基因组学过程启发式教学

不同植物生长物质对水培黄瓜幼苗生长和根系发育的影响被引量：35: 2010年; 考察了生长素类、赤霉素类、DA-6、复硝酚钠、海藻肥、细胞分裂素、脱落酸、水杨酸钠、多效唑、木醋液等16种生长物质对水培黄瓜幼苗生长和根系发育的影响。结果表明DA-6、赤霉素GA(4+7)对幼苗生长和根系发育有明显促进作用。作用浓度下的海藻肥在处理初期可促进新叶和侧根发生,而对主根伸长有明显抑制。萘乙酸钠、水杨酸钠、脱落酸等对水培幼苗生长表现出强烈的抑制和毒性。研究结果可为在田间应用上述植物生长物质提供借鉴。; 欧阳立明张舜杰陈剑峰李兴徐阳春; 关键词：植物生长物质水培根系

论生物科学人才市场需求与培养模式被引量：10: 2006年; 本文分析了当前生物科学人才培养中存在的供需矛盾现象,指出应强调教育的市场观。通过对行业现状和前景的分析,提出了建立科研型、应用型和复合型人才并重的生物类人才培养格局的观点,并提出了相应的具体建议和构想。; 欧阳立明欧伶魏东芝; 关键词：生物科学高等教育

土壤中腈水解酶产生菌的快速筛选被引量：8: 2009年; 为了从土壤中快速筛选具有腈水解能力的微生物,建立了以苯酚-次氯酸盐比色法(又名Berthelot比色法)检测96孔板反应产物中氨离子浓度为基础的腈水解酶酶活快速分析方法。用该法从土壤样本中筛选获得了9个酶活力较高的菌株。用HPLC方法定量检测9个菌株对对羟基苯甲腈的转化率,证明苯酚-次氯酸盐比色法微孔板分光光度计的测定结果与HPLC结果对应良好,转化率最高为49.9%。经16s rDNA鉴定,菌株分别属于金黄杆菌属、芽胞杆菌属、葡萄球菌属、寡养单胞菌属等。; 周冬杰欧阳立明许建和周鹏鹏潘江; 关键词：腈水解酶微孔板

人神经营养因子-3重组逆转录病毒的包装与鉴定被引量：1: 2001年; 在逆转录病毒载体pLXSN中引入人神经营养因子 3(hNT 3) ,构建成重组质粒pLXSN NT3,转染包装细胞PA317后经G418筛选得到几个稳定产毒的细胞克隆。测定这几个克隆的病毒滴度 ,最高达到 1 6 0× 10 5 ,且产毒细胞株不产生复制型病毒。PCR和大乳鼠背根神经节活性检测证明hNT 3已整合到宿主细胞基因组并能稳定表达。; 欧阳立明周涛薛冲刘志敏张嗣良; 关键词：逆转录病毒载体重组病毒

顶头孢霉菌原生质体的制备和再生条件的优化被引量：2: 2016年; 考察了细胞壁降解酶的种类、酶解时间、培养基种类和涂布方式对顶头孢霉原生质体制备和再生的影响,结果提示顶头孢霉菌丝形态对原生质的制备和再生也有重要影响。顶头孢霉生长过程可分为3个时期：细长时期、中度膨大时期和高度膨大时期。本试验利用显微图像分析法确定了各时期菌丝的形态参数,描述了培养过程中的菌丝形态变化规律,以及不同菌丝形态对原生质体释放和再生率的影响。最终优化条件为：选择中度膨大初期的菌丝体,使用1%溶壁酶,30℃酶解2 h后采用双层平板法接种于原生质体再生培养基I（HCM）中。每1 ml原生质体悬浮液中原生质体的释放数可达2.51×10^8个,再生率大于20%。; 杨颂赵春云欧阳立明储炬张嗣良; 关键词：顶头孢霉原生质体

人神经营养因子-3的哺乳动物细胞表达及其对大鼠成纤维细胞的基因转移研究: 该文选择人神经营养因子-3(hnt-3)设计和开展了两部分工作:第一部分,将hnt-3 cdna全长片段构建到真核表达载体pcdna3中,经脂质体介导的转染分别在哺乳动物细胞系cos-7和cho中获得了瞬时表达和稳定表达...; 欧阳立明; 关键词：哺乳动物细胞逆转录病毒载体包装细胞背根神经节基因治疗; 文献传递网络资源链接

纳米磁粉固定化酶催化合成α-D-葡萄糖-1-磷酸(英文)被引量：4: 2010年; 建立了以麦芽糊精和磷酸盐为底物,在常温下合成α-D-葡萄糖-1-磷酸的生物催化体系.从大肠杆菌K12中克隆表达了麦芽糊精磷酸化酶,并固定化在氨基修饰的磁性纳米颗粒上,以便于酶的回收和重复利用.在优化的反应条件下,于200ml体系中连续使用该固定化酶8批次,催化合成了α-D-葡萄糖-1-磷酸.经过简单的纯化步骤,最终得到440mg产品,分离产率为70.5%.; 董青欧阳立明刘建文许建和; 关键词：麦芽糊精磁性纳米颗粒

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