张悦鸣
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 可溶性IL一5Rα对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响被引量：1
- 2015年
- 目的通过观察可溶性IL-5受体α（sIL-5Rα）对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道炎症的影响，为哮喘疾病的治疗提供新的方法。方法24只BALB／c小鼠随机分成正常组、哮喘组及sIL-5Rα治疗组，哮喘组和sIL-5Rα治疗组以鸡卵白蛋白（OVA）致敏和激发，建立哮喘模型，对照组用生理盐水代替0VA。sIL-5Rα治疗组每次激发前30min腹腔注射sIL-5Rα100μg，正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代。比较各组BALF细胞计数，IL-5、IL-4及嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）水平，肺组织学检查。结果与正常对照组相比，哮喘组BALF中嗜酸粒细胞百分比增加（P〈0．05），BALF中IL-4、IL-5、Eotaxin水平增加（P〈0．05），病理示肺组织损害明显。与哮喘组相比，sIL-5Rα治疗组BALF中嗜酸粒细胞百分比降低（P〈0．05），BALF中IL-5、Eotaxin水平增加（P值均〈O．05），病理示肺组织损害明显减轻。结论sIL-5Rα可明显减轻哮喘小鼠气道炎症。
- 张悦鸣姚慧娟李志奎
- 关键词：嗜酸粒细胞哮喘动物模型
- 小鼠可溶性IL-5α受体在Bac-to-Bac系统中的表达及其鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小鼠可溶性IL-5α受体(Soluble IL-5 receptorα,sIL-5Rα)蛋白,并对其抗原性进行鉴定。方法应用Vector NTI AdvanceⅡ软件优化小鼠IL-5Rα基因胞外区密码子后合成序列,将sIL-5Rα克隆至pFastbacI中,构建重组穿梭质粒pFastbacI-sIL-5Rα,转化感受态大肠杆菌DH10BacTM,构建重组杆粒Bacmid-sIL-5Rα,转染sf9细胞,通过异源基因重组获得杆状病毒,采用Reed-Muench法检测扩增后病毒滴度;将P3、P4代病毒以0.05 MOI感染sf9细胞,SDS-PAGE鉴定sIL-5Rα蛋白的表达,表达产物应用阳离子交换层析法进行纯化,并对纯化的sIL-5Rα蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组杆粒Bacmid-sIL-5Rα经PCR鉴定,证明构建正确;P3代重组杆状病毒的病毒滴度为1.7×107pfu/ml;表达及纯化的sIL-5Rα蛋白在相对分子质量约43 000处可见特异蛋白条带,感染的sf9细胞裂解上清可与兔抗小鼠IL-5Rα多克隆抗体发生特异性反应。结论Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了小鼠可溶性IL-5Rα受体蛋白,为进一步研究其生物学功能及在哮喘模型动物中的治疗作用奠定了实验基础。
- 张悦鸣段跃强罗德炎姚惠娟王希良李志奎
- 关键词：白介素-5杆状病毒表达系统
- 呼出气一氧化氮检测诊断支气管哮喘被引量：9
- 2013年
- 目的评价呼出气一氧化氮（fractionalexhalednitricoxide，FeNO）检测诊断哮喘的准确性及其最佳界值。方法使用FeNO测试仪（NIOXMINOAerocrineAB瑞典）对109例疑诊哮喘患者进行FeNO浓度测定，以哮喘的常规诊断方法为参照。不同的FeNO界值对应不同的敏感度和特异度，绘制ROC曲线，评价FeNO诊断哮喘的准确性并得出最佳界值。结果109例患者中，47例最终被诊断为哮喘，62例非哮喘患者。哮喘组FeNO中位数（四分位数间距）明显高于非哮喘组：70ppb（87ppb）比16ppb（21ppb），P〈O．001。ROC曲线下面积为0．808（95％置信区间：0．719～O．896），FeNO诊断哮喘的最佳界值为41ppb，以41ppb为标准诊断哮喘的敏感度为68．1％，特异度为83．9％，阳性预测值为76．2％，阴性预测值为77．6％，准确度为77．1％。结论FeNO诊断哮喘的敏感性和特异性是可接受的，可以被用作哮喘诊断的辅助工具。
- 姚慧娟张悦鸣李志奎
- 关键词：哮喘呼出气一氧化氮受试者工作特征曲线肺功能测试
- 联合IL-5可溶性受体与IL-4突变体对支气管哮喘小鼠气道高反应性及IgE、IFN-γ水平的影响被引量：5
- 2014年
- 目的通过观察IL-5可溶性受体（sIL-5Ra）及IL-4突变体（IL-4mutant，IL-4MT）对哮喘小鼠气道高反应性（airwayhyperresponsiveness，AHR）及IgE、γ干扰素（IFN-γ）水平的影响，探讨其潜在的临床应用价值。方法随机将50只BALB／c雌性小鼠分成5组，分别为正常对照组、哮喘组、IL-4MT治疗组、sIL-5Ra治疗组和IL-4MT联合sIL-5Ra治疗组（简称联合治疗组）。采用腹腔注射卵蛋白（ovalbumin，OVA）与氢氧化铝混悬液对小鼠进行致敏，卵蛋白雾化，建立小鼠哮喘模型，其中正常对照组用生理盐水替代。雾化前30rain，IL-4MT治疗组、sIL-5Ra治疗组及联合治疗组分别腹腔注射IL-4MT100μg、sIL-5Ra100μg、IL-4MT和sIL～5Ra各100μg，正常对照组与哮喘组用生理盐水替代。末次激发24h后，用不同浓度的氯化乙酰胆碱激发各组小鼠，测定其肺阻力，ELISA法观察比较各组血清及BALFIgE、IFN-γ水平变化，肺组织行HE染色，观察病理变化。结果与正常对照组相比，哮喘组肺阻力显著增加（P〈0．01）；与哮喘组相比，IL-4MT组和联合治疗组肺阻力显著降低（P〈O．05），联合治疗组下降更明显；与sIL-5Ra治疗组相比，联合治疗组肺阻力显著降低（P〈O．05）。与正常对照组相比，哮喘组血清及BALF中IgE含量显著升高，IFN-γ含量显著下降（P〈O．01）；与哮喘组相比，联合治疗组血清及BALF中IgE含量显著下降，IFN-γ含量显著升高（P〈O．01）；与单独治疗组相比，联合治疗组血清及BALF中IgE含量显著下降，IFN-γ含量显著升高（Pd0．05）。与哮喘组比，单独治疗组与联合治疗组肺组织炎症细胞渗出、浸润及对气道上皮的炎性损伤明显减轻，联合治疗组减轻更明显。结论联合应用sIL-5Ra与IL-4MT可以明显减轻哮喘小鼠AHR，降低血清及BALF中IgE含量，同时升高IFN-γ含量，减轻气道炎症。
- 唐元元张方琪欧阳海峰张悦鸣孟祥珍韩月霄吴硕李志奎
- 关键词：气道高反应性IGE
- 呼出气一氧化氮检测诊断支气管哮喘被引量：6
- 2013年
- 目的评价呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)检测诊断哮喘的准确性及其最佳界值。方法使用FeNO测试仪(NIOX MINO AerocrineAB瑞典)对109例疑诊哮喘患者进行FeNO浓度测定,以哮喘的常规诊断方法为参照。不同的FeNO界值对应不同的敏感度和特异度,绘制ROC曲线,评价FeNO诊断哮喘的准确性并得出最佳界值。结果 109例患者中,47例最终被诊断为哮喘,62例非哮喘患者。哮喘组FeNO中位数(四分位数间距)明显高于非哮喘组:70ppb(87ppb)比16ppb(21ppb),P<0.001。ROC曲线下面积为0.808(95%置信区间:0.719～0.896),FeNO诊断哮喘的最佳界值为41ppb,以41ppb为标准诊断哮喘的敏感度为68.1%,特异度为83.9%,阳性预测值为76.2%,阴性预测值为77.6%,准确度为77.1%。结论 FeNO诊断哮喘的敏感性和特异性是可接受的,可以被用作哮喘诊断的辅助工具。
- 姚慧娟张悦鸣李志奎
- 关键词：哮喘呼出气一氧化氮受试者工作特征曲线肺功能测试
