宁顺斌
- 作品数：44 被引量：288H指数：11
- 供职机构：武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转基因水稻中外源基因的荧光原位杂交(FISH)分析被引量：9
- 2001年
- 利用荧光原位杂交(FISH),在供试8个转基因水稻株系的染色体上检出了转入的外源基因bar-nase-ps1片段。其中两株系各检出了两个不同的信号位点,而其他株系均只检出一个信号位点。所有染色体着丝粒区都没有杂交信号。结合Southern杂交及表达分析发现,大多数株系中,整合在染色体端部区的barnase基因表现为高水平表达,而靠近着丝粒区的则表现为低水平表达,表明表达水平与转基因整合位置可能存在一定程度的相关性。表达水平与拷贝数无明显相关。本文还利用多色荧光原位杂交(Multi-color FISH)技术,进行了barnase-ps1片段与报道基因pHctinG的共杂交,多数情况下,barnase-ps1片段与报道基因整合在染色体的同一位置。
- 金危危李霞李宗芸宁顺斌凌定厚宋运淳
- 关键词：转基因水稻外源基因荧光原位杂交
- 蓝藻异形胞分化、衰老及盐胁迫下的细胞程序性死亡
- 光合蓝藻是介于细菌和高等植物之间的一种特殊原核生物。本研究对淡水藻类项圈藻（An。的en句的四个株系An。b。en。sp.PCC 712o、A.O山功介止。、A.riizlll——”以及A.no心quae在异形胞分化、衰...
- 宁顺斌郭厚良宋运淳
- 文献传递
- 水稻Pib基因及其连锁RFLP标记在栽培稻、药用野生稻和玉米中的比较物理定位(英文)被引量：4
- 2002年
- 比较遗传学研究表明 ,禾本科不同基因组之间存在着广泛的同线性和共线性。对水稻 (OryzasativaL .)这一模式植物与其他禾本科植物的原位杂交定位可以揭示禾本科植物基因组的共同特点和进化规律 ,为建立禾本科遗传大体系积累资料。实验以图位克隆法分离的水稻Pib基因 (10 .3kb)和与之连锁的RFLP标记为探针 ,研究了Pib及与其连锁的RFLP标记在供试种中的同源性和物理位置。Southern杂交结果表明 ,Pib在玉米 (ZeamaysL .)基因组中有同源序列。进一步利用单色和双色荧光原位杂交技术确定了Pib在栽培稻 (O .sativassp .indicacv .Guangluai4)、玉米和药用野生稻 (O .officinalisWallexWatt)染色体上的物理位置。定位结果表明 ,Pib基因和与之连锁的RFLP标记在这 3个供试种基因组中具有同线性。
- 李霞宁顺斌金危危宋运淳
- 关键词：水稻RFLP标记双色荧光原位杂交药用野生稻玉米
- 植物基因染色体定位和编程性细胞死亡的分子细胞遗传学研究
- 宋运淳李立家刘立华宁顺斌刘静宇金危危韩永华魏文辉佘朝文胡中立覃瑞任南毕学知李宗芸杨征鄢慧民亓翠英王玲李霞毛宁辉
- 以植物为主要材料从不同层次上分析了染色体结构，首创了适于多种植物ASGG-显带程序后，近年结合DAPI染色和去模糊软件分析开拓了重复性高，简便易行的多重荧光显带的技术。用水稻和拟南芥以及玉米的相关基因做探针，进行有丝分裂...
- 关键词：
- 关键词：原位杂交染色体定位细胞凋亡
- H_2O_2诱导玉米根尖细胞凋亡的形态、生化及分子生物学证据被引量：14
- 1999年
- 植物细胞程序性死亡是近年来植物细胞生物学的研究热点之一。已有证据表明H2O2能诱导拟南芥、豌豆、烟草等植物体外培养细胞的调亡。以玉米根兴为材料，从原位即细胞和染色体水平（染色体DNA断裂）以及分子水平（DNALaddering）对H2O2诱导的细胞死亡作了检测。结果表明H2O2能诱导玉米根尖细胞调亡，并具有动物细胞凋亡的典型形态和生化特征如染色质凝缩、核降解以及出现DNALadder等。可见H2O2诱导的细胞凋亡在植物界具有相当的普遍性。
- 宁顺斌覃瑞
- 关键词：细胞凋亡过氧化氢玉米根尖细胞生化
- 药物诱导的玉米根尖细胞凋亡被引量：40
- 2000年
- 同时应用DNALaddering、DNAGelBlot以及基于染色体涂片的原位末端标记技术 ,从染色体、细胞核和DNA不同水平对细胞毒素类药物放线菌D、放线菌酮和秋水仙碱诱导的玉米 (ZeamaysL .)根尖分生组织细胞死亡作了检测。结果表明 :同动物中一样 ,这些药物诱导的玉米根尖分生组织细胞死亡也具有DNALadder、染色质和细胞核浓缩等典型的凋亡特征 ,说明这些细胞毒素类药物能够诱导植物体内的细胞凋亡。
- 宁顺斌宋运淳王玲刘立华
- 关键词：细胞凋亡植物
- 哺乳动物凋亡相关基因p53同源序列在玉米（Zea mays L.）中的检出及其染色体原位杂交定位被引量：1
- 1999年
- p53基因普遍存在于动物组织中，是一个高度保守的肿瘤抑制基因，对细胞的生长、增殖和分化等多种发育程序进行调控。p53基因也是一个重要的细胞凋亡相关基因，决定着多种动物细胞的凋亡。有报导：用人P53抗体和p53基因的cDNA探针在玉米（Zea mays L.)中检出了P53的同源蛋白及相应的mRNA，并初步确定在功能上与动物中的P53蛋白非常相似。本实验首先用人p53基因的cDNA为探针，经Southern Blotting初步确定其同源序列的存在（Fig.1），然后进一步用生物素标记的原位杂交（DAB－ISH）和荧光原位杂交（FISH）对这些同源序列进行了染色体定位。DAB－ISH（Plate1)和FISH(Plate2）得到了一致的结果，在5S（第5染色体短臂）次末端、1L（第1染色体长臂）近末端、8L中部、3L中部近着丝粒以及9L中部均镜检到p53基因探针的杂交信号，信号与着丝粒的百分距离分别为70．0±3．2、89．1±1．3、50．5±1．1、37．0±0．3和66．7±2．0（Tab.1,Fig.2）。利用异源探针是寻找植物凋亡相关基因的一种重要手段，也是目前国外的研究热点之一。本研究首次从DNA水平上证明p53基因在玉米中的存在。为寻找和研究植物细胞凋亡基因提供了重要线索。
- 宁顺斌宋运淳等
- 关键词：哺乳动物凋亡相关基因同源序列玉米
- 盐胁迫诱导的植物细胞凋亡——植物抗盐的可能生理机制被引量：41
- 2000年
- 近来的研究表明,一定条件的盐胁迫可导致植物细胞程序性死亡。本文利用DNA Lad-dering、石蜡切片原位检测以及染色体涂片原位检测,从组织、细胞以及DNA等多个方面对盐胁迫下的玉米、水稻和烟草根尖细胞死亡作了研究,形态特别是生化方面的证据表明盐胁迫诱导的植物细胞凋亡可能在植物界具有一定的普遍性。但各个物种之间有一定差异。本实验结果对盐胁迫下的植物生理机制提供了新的研究思路。同时,我们还对基于染色体制片和石蜡切片的原位检测方法进行了比较和讨论。我们认为,基于染色体制片的原位标记技术适合于定性和定量检测单个细胞的凋亡,具有一些石蜡切片所不可及的优点。
- 宁顺斌宋运淳王玲李霞
- 关键词：盐胁迫植物抗盐生理机制
- 植物抗病基因工程研究现状及展望
- 2000年
- 近年来 ,随着植物抗病基因的分离 ,植物抗病机制的分子生物学和植物抗病基因工程的研究轰轰烈烈地展开并取得重大突破。利用抗病基因进行遗传转化已相继取得成功 ,基于抗病反应内在机制的基因工程也开始启动 ,并将越来越广泛地应用于作物抗病品种选育和农业生产实践。
- 宁顺斌
- 关键词：抗病基因植物抗病抗病机制过敏反应
- 几种差别表达基因显示技术及其在植物方面的应用被引量：17
- 1999年
- ９０年代以来，先后出现了ＤＤ、ＲＤＡ、ｃＤＮＡ－ＲＤＡ、ＳＡＧＥ、ＧＥＦ、ＲＦＤ、ＳＳＨ以及ＡＴＡＣ－ＰＣＲ等数种未知产物的差别表达基因显示技术。本文对这些技术的异同、各自的优缺点以及它们在植物方面的应用现状和前景作了简单综述。
- 宁顺斌王玲宋运淳
- 关键词：RT-PCR基因克隆
