吴关
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项哈尔滨市科技攻关计划项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因突变对病毒体外复制的影响被引量：4
- 2011年
- 为了进一步了解影响鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制效率和致病力的分子基础,作者在序列分析的基础上,利用反向遗传操作技术,针对VP2上2个重要的氨基酸位点(222和279),修饰和拯救了相应的2株突变病毒,并研究了突变病毒在体内外的生物学特性。复制动力学数据显示,VP2的222位由酪氨酸突变为脯氨酸可将IBDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的复制滴度提高6倍以上,而279位氨基酸对病毒复制效率无显著影响。SPF鸡的感染试验显示,222位和279位氨基酸与IBDV的致病力没有关系。本研究首次报道了VP2 222位和279位氨基酸与IBDV复制效率和致病力的关系,有助于更加全面地了解IBDV的基因功能,也将为新型IBDV疫苗的设计提供依据和思路。
- 祁小乐高立吴关邓小芸余飞张礼洲秦立廷高玉龙王永强高宏雷刘娣华育平王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因致病力
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1（ALV-J）p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA（DAS-EL...
- 负炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 文献传递
- 一株鸡传染性法氏囊病病毒基因组测序及其分子特征(英文)被引量：2
- 2011年
- [目的]测定一株鸡传染性法氏囊病病毒基因组序列及其分子特征。[方法]分离出一株具有特殊分子特征的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株(vvIBDV)HLJ-0504,并对其基因组进行了克隆和测序。[结果]序列分析显示,HLJ-0504的基因组A节段属于超强毒株,而其B节段则来源于另外一个独特的祖先。动物实验表明,HLJ-0504对SPF雏鸡的致病率和致死率分别为100%和86.7%。[结论]具有独特基因组B节段的vvIBDV仍在我国流行,我国IBDV的进化特征存在多样性。IBDV的毒力不是由基因组的A或B单独决定的。
- 祁小乐高立秦立廷邓小芸吴关张礼洲余飞任宪刚高玉龙高宏雷王永强王笑梅
- 关键词：基因组进化毒力
- 14株网状内皮组织增生症病毒中国分离株gp90基因的分子特征(英文)被引量：3
- 2011年
- [目的]研究十四株网状内皮组织增生症病毒中国分离株gp90基因的分子特征。[方法]对分离于我国不同商品蛋鸡场的14株REV的表面囊膜基因gp90进行了扩增和序列测定。[结果]序列分析表明,这14株REV不同于我国早期分离毒株与亚型3毒株亲缘关系较近。另外发现,这14株REV与美国和我国台湾的流行毒株同源性较高。[结论]本研究对深入研究我国REV的流行和遗传演化意义重大。
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- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法，以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体，p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心EusA(DAs-ELISA...
- 负炳岭高玉龙王笑梅刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体
- 文献传递
- 禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 从J亚群禽白血病病毒(ALV-J)HB09JY03株感染的DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出约720bp的gag-p27基因片段,克隆至pMD18-T载体。鉴定正确后,将该片段克隆至pET-30a(+)原核表达载体,经IPTG诱导表达。表达产物经His Trap TMHP纯化后,测蛋白浓度达到9mg/mL。用兔抗自然p27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组p27蛋白有抗原反应活性。免疫新西兰大白兔后,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应。所制备的重组p27蛋白和多克隆抗体将在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值。
- 李德龙刘在斯贠炳岭吴关高玉龙秦立廷祁小乐王永强高宏雷刘思当王笑梅
- 关键词：禽白血病P27基因原核表达多克隆抗体
- 禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- 为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应。所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础。
- 贠炳岭李德龙胡晓亮刘在斯秦立廷吴关刘文祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒P27蛋白原核表达单克隆抗体
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒(ALV)的方法,以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/mL,且与禽类常见的病毒鸡传染性支气管炎病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒等无交叉反应。动物感染试验结果表明,用该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的禽白血病病毒。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法的符合率分别为96.5%和93.8%。证实,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。
- 贠炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷王笑梅高玉龙
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 负炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 我国部分地区种鸡禽肺病毒感染的血清学调查被引量：12
- 2012年
- 禽肺病毒（Avian pneumovirus,APV）又称火鸡鼻气管炎病毒（Turky rhinotracheitis virus,TRTV）[1]。禽肺病毒属于副黏病毒科肺病毒亚科偏肺病毒亚属[2]。已经确定禽肺病毒可引起火鸡呼吸道疾病和产蛋量下降。虽然广泛认为禽肺病毒是鸡肿头综合征的因素之一。
- 贠炳岭刘在斯吴关李久宽秦立廷祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：血清学调查种鸡鼻气管炎病毒鸡呼吸道疾病鸡肿头综合征产蛋量下降
