王笑梅
- 作品数：408 被引量：933H指数：15
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建被引量：4
- 2000年
- 利用反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR) ,扩增克隆传染性法氏囊病病毒超强毒 (vv IBDV) HZ株 VP2基因 ,并对 VP2基因进行全序列测定、序列分析和聚类分析 ,同时将VP2基因与真核表达载体 pc DNA3相连接。结果克隆到 VP2基因全序列长 1 356bp,分析表明 HZ株与欧洲超强毒株 UK661高度相似 ,同时将 VP2基因正向插入 pc DNA3的 CMV启动子下游 ,得到了 VP2基因的真核表达质粒。为
- 许信刚李健强王笑梅童光志
- 关键词：超强毒株真核表达质粒传染性法氏囊病病毒VP2基因
- 鸡传染性贫血病毒VP2基因的表达及其免疫活性分析被引量：4
- 2006年
- 利用特异性引物从组织病料中提取的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到VP2基因,BamHⅠ和SalⅠ双酶切处理,纯化后,克隆至BamHⅠ和SalⅠ双酶切处理的表达载体pET-28a中,构建了原核表达质粒pET-28-VP2。将pET-28-VP2转化至感受态E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约31kDa的目的蛋白以可溶性形式表达于上清中。Western blot分析发现,表达产物与鸡传染性贫血的阳性血清发生特异性反应。纯化蛋白免疫小鼠后制得的多抗可以与全病毒发生反应,证明其具有免疫原性,为进一步研究VP2蛋白的功能及开展CIAV疫苗及诊断试剂的研制奠定了基础。
- 王晓艳王笑梅高玉龙高宏雷陆桂丽
- 关键词：鸡传染性贫血病毒VP2基因克隆
- 杆状病毒表达SARS冠状病毒核蛋白抗原性的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 对杆状病毒表达SARS冠状病毒NP抗原性进行分析与比较。方法 利用SDS PAGE、Western Blot和ELISA证明重组核蛋白(rSN)在昆虫细胞获得高效表达,具有特异免疫反应原性。结果 表达rSN的昆虫细胞裂解、稀释后直接包被ELISA板,来检测SARS CoV康复病人血清特异抗体,敏感性稍高于Vero细胞培养的全病毒(OD分别为2 .8和0 .6 ) ,与健康人血清不发生特异反应(OD值为0 .0 1) ;表达rSN昆虫细胞用于间接免疫荧光,快速检测血清特异抗体反应,同样表现了良好的敏感性和特异性。结论 昆虫细胞表达rSN有望替代SARS CoV全病毒,作为安全、敏感和特异的诊断抗原,应用于ELISA和IFA血清学检测。
- 胡森王喜军王清华吴东来邓国华王笑梅步志高
- 关键词：SARS冠状病毒核蛋白重组杆状病毒IFA
- 表达传染性法氏囊病毒VP2基因的重组新城疫LaSota弱毒疫苗株
- 本发明涉及一种表达传染性法氏囊病毒(Infectious bursal disease virus，IBDV)的VP2基因的重组新城疫LaSota弱毒疫苗株，更具体地，重组新城疫LaSota弱毒疫苗株是rLasota-V...
- 步志高王笑梅陈化兰
- 文献传递
- 一株乳酸片球菌新菌株及其用途
- 本发明公开了一株乳酸片球菌新菌株及其用途。所述的乳酸片球菌新菌株，命名为HVRIC28-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏号是CGMCC No.9441，保藏日期为2014年7月11日。研...
- 崔红玉王笑梅高宏雷祁小乐张艳萍王永强
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP5缺失标记疫苗的生物学特性研究被引量：2
- 2014年
- 为评价鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5缺失病毒株rHLJ0504HT△VP5的生物学特性,本研究首先对该缺失病毒与其亲本病毒rHLJ0504HT(vvIBDV HLJ0504 253/284双位点突变细胞适应病毒)进行了体外复制动力学比较研究。结果表明,VP5缺失病毒复制滴度明显低于亲本病毒(p<0.05)。动物实验结果表明,该缺失病毒可以诱导机体产生良好的免疫应答反应,免疫后10 d,其抗体水平与亲本病毒相当;并能够抵抗同源或异源超强毒的攻击,为免疫鸡提供100%保护。此外,该缺失病毒对免疫鸡无明显的致病性;VP5缺失病毒免疫组与未免疫组禽流感血凝抑制效价相当,不存在明显差异(p>0.05),表明该病毒对免疫鸡无免疫抑制作用,不影响其它疫苗的免疫效果。而且,VP5的缺失可以作为鉴定该缺失病毒的生物学标记。以上结果表明,rHLJ0504HT△VP5是一株安全有效的IBDV标记候选疫苗株。
- 高立李凯祁小乐高玉龙高宏雷王永强孔宪刚王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒标记疫苗
- 鸡传染性法氏囊病病毒的反向遗传研究被引量：3
- 2006年
- 祁小乐王笑梅高宏雷高玉龙
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒免疫抑制性传染病超强毒株VIRUS变异株接触性
- 鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用
- 本发明公开了鸡传染性法氏囊病病毒重组弱毒疫苗株及其应用。本发明克隆了流行超强毒株HLJ-0504的主要保护性抗原基因VP2，将其核苷酸进行突变修饰，然后将其替换IBDV弱毒株Gt基因组的相应区段，构建IBDV重组基因组的...
- 王笑梅祁小乐高玉龙高宏雷秦立廷王永强高立
- 中国部分地区传染性法氏囊病病毒分子流病学调查被引量：14
- 2009年
- 为调查我国鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的流行情况,从我国11个省(市、自治区)采集法氏囊病料,分离鉴定鸡传染性法氏囊病病毒20株,运用RT-PCR方法对分离株的VP2基因进行扩增、测序和序列分析。研究表明,20株分离毒株中有19株具有IBDV超强毒株的分子特征,即222A、256I、294I和299S,与我国IBDV超强毒Gx株的核苷酸同源率在96.7%～99.4%,推导氨基酸同源率在98.2%～100%。遗传进化分析表明,所有分离毒株具有共同的祖先。
- 宇文延青高玉龙高宏雷祁小乐杨金雨王晓燕秦立廷林欢李俊山刘伟李铁强邓小芸王笑梅
- 关键词：分子流行病学超强毒株
- 抗鸡IBDV Gt株单克隆抗体制备及抗原表位初步分析
- 鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)属于双RNA病毒科(Birnaviridae), 禽双RNA病毒属(Avibirnavirus),其基因组包括A、B两个节段...
- 程宇王笑梅高玉龙高宏雷付朝阳简子健
- 关键词：抗原表位
- 文献传递
