- 过表达cdc20基因对绒山羊卵母细胞体外成熟的影响被引量:1
- 2015年
- 为研究过表达cdc20基因对绒山羊卵母细胞体外成熟的影响,构建了Myc-cdc20载体,在体外转录成cRNA后显微注射到绒山羊卵母细胞中,观察其对绒山羊卵母细胞体外成熟过程的影响。结果表明,在对照组卵母细胞体外培养的过程中,卵母细胞培养到8 h后发生GVBD,18 h后进入MⅠ期,直到24 h后,约75%的绒山羊卵母细胞排出第一极体。卵母细胞在GV期时显微注射g Myc-cdc20 cRNA,培养10 h后,通过Western Blotting的方法检测到了MYC-CDC20融合蛋白的表达。但统计结果显示,试验组卵母细胞各阶段发育时间和成熟率与对照并无显著差异。因此,单独过表达cdc20基因不影响绒山羊卵母细胞体外成熟过程。
- 张金吨王标李云霞陈杨林刘黎明戴雁峰李喜和
- 关键词:过表达体外成熟
- Xist基因抑制对牛SCNT早期胚胎发育的影响
- 2015年
- Xist是与X染色体失活相关的非编码基因,它在合子期基因组开始表达,是胚胎发育早期表达的第一个印记基因。探讨了特异性抑制Xist的TALER-REPRESSOR(TALER)载体转染到胎牛成纤维细胞对Xist基因的抑制作用,并以抑制Xist基因表达的细胞作为核供体制作克隆胚胎,研究Xist基因抑制对牛克隆胚早期发育的影响。结果显示,与对照组细胞相比,TALER载体将Xist相对表达量下调了93.85%,说明本试验设计的载体转染系统能够有效抑制Xist基因的表达。选取Xist抑制表达阳性的转染细胞用于体细胞核移植试验,克隆胚胎发育结果显示,试验组和对照组的卵裂率、8细胞发育率、桑葚胚发育率和囊胚发育率分别为78.8%vs 75.1%(P>0.05,无显著差异)、54.4%vs 50.6%(P>0.05,无显著差异)、12.3%vs 27.8%(P<0.01,差异极显著)、0 vs 26.6%(P<0.01,差异极显著)。综上所述,试实验设计的特异性抑制Xist表达的TALER载体可有效抑制雌性胎牛成纤维细胞中Xist的表达。供体细胞Xist这种基因下调可使克隆胚胎2-8细胞率略有提升,但囊胚期和桑葚胚率明显降低。因此,其机制尚待于进一步探讨。
- 刘黎明孙伟张金吨赵丽霞李树裕王标陈杨林胡树香吴宝江李喜和
- Xist基因调控及对牛SCNT早期胚胎发育的影响
- Xist是产生一个非编码RNA的与X染色体相关的基因,它是在合子期基因组开始激活,并且是胚胎早期发育表达的第一个印记基因。尽管Xist是在雌性动物中参与X染色体失活,但Xist RNA的功能尚未被完全认知。在动物克隆胚胎...
- 刘黎明
- 文献传递