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李喜和: 作品数：67 被引量：155H指数：7; 供职机构：内蒙古大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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牛诱导扩展多能性成体干细胞、建系方法及培养液: 本发明公开了一种牛诱导扩展多能性成体干细胞、建系方法及培养液，通过从牛成纤维体细胞中转基因、诱导培养得到，并能够在体外稳定传代培养。该干细胞具有全能性、稳定性和安全性，能在体内外向胚胎和胚胎外组织分化，可用于育种繁育、基...; 李喜和赵丽霞王子馨

毛脚鵟细胞体外培养体系建立及三种组织来源细胞特性分析被引量：3: 2013年; 用组织块培养法对毛脚鵟不同组织进行原代培养,获得了3种不同组织来源的细胞,并成功对细胞进行了冷冻保存和复苏。在传代培养过程中,对比分析了3种组织来源细胞的形态学、生长曲线、贴壁率、核型等生物学特性。形态学方面,3种来源细胞均为成纤维样细胞。对于3种组织来源细胞的贴壁能力分析显示,输卵管源细胞最强,肺源细胞和气管源细胞次之。3种不同组织来源细胞的倍增时间分别为(29.91±0.39)、(33.18±0.21)和(30.67±0.28)h,群体倍增次数分别为3.54±0.01、4.52±0.02和4.38±0.03。毛脚鵟细胞的染色体数目为2n=68,性染色体为典型的ZW型。本实验为今后毛脚鵟细胞利用、遗传信息的保存及生物学特性的深入研究提供实验材料和依据。; 刘刚道日娜王蓉蓉李云霞戴雁峰李喜和李煜李瑶; 关键词：细胞培养核型分析

采用卵子-胚胎移植技术分析研究家畜受精和早期发育(英文): 2013年; 为了阐明家畜受精及早期发育或者输卵管内未受精卵的变化过程,记述了4种卵-胚胎移植方面的研究:①将来自发情黄体期的猪卵母细胞移植到授精动物的输卵管内,可获得受精结果,但将卵移植到已经交配的猪输卵管内会导致多精受精。②把第7～8 d的猪孵化囊胚移植到同期处理的受体内,可以观察到胚胎成功发育到19～23 d。证明失去滋养外胚层的扩张囊胚可以承受移植的物理操作并保持发育能力,而且未交配受体的黄体寿命可以在第7 d和第8 d支持移植胚胎发育。③取2～6 mm直径发育卵泡的牛卵母细胞经体外成熟可以在授精小母牛的输卵管内正常受精,表明其具有受精和胚胎发育能力。④将马的卵母细胞移植到猪的输卵管内,卵母细胞到达子宫的时间仅需46～48 h,在此过程中没有发现未受精马卵的退化现象,暗示了输卵管中存在维持卵子生理机能的因子。综上所述,卵移植是研究家畜早期发育的有效分析技术。; Hunter R H F李喜和; 关键词：卵母细胞卵丘细胞

家畜繁育生物技术研究开发与产业化推广应用: 李喜和

奶牛性控冻精生产新技术研究开发与产业化推广应用: 根据动物受精的生殖生理学原理，某公司研究开发了以添加异种动物精子为基础的奶牛性控冻精生产新技术(专利技术)，使该产品的生产成本降低50-60％，生产效率提高2-3倍，已经在1500余个用户推广应用50万支以上，取得了明显...; 李喜和周文忠王建国郭继彤; 关键词：奶牛生殖生理学

膜联蛋白Ⅴ去除奶牛死精子技术及其在性控冷冻精液生产中的应用: 2021年; 本研究旨在通过膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)与奶牛死精子的特异结合,并尝试与免疫磁珠技术共用去除奶牛精液中死精子,从而提高性控精液生产效率。试验结果显示,通过膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选后的精子活力、膜完整性、线粒体活性均有不同幅度改善,特别是上机分离时X/Y死精率明显下降(P<0.05),说明该技术流程设计可以有效去除部分死精子,提高性控精液生产效率。同时,试验证明膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选操作对于分离后的X或Y精子制备的性控冷冻精液各项产品技术指标均没有明显影响(P>0.05),说明该技术流程并不会对精子造成额外的损伤。综上所述,本研究开发的Annexin Ⅴ蛋白的特异性结合免疫磁珠方法与技术工艺,可以有效去除奶牛精液中的死精子,显著提升奶牛性控冷冻精液生产效率、降低生产成本,为家畜性别控制冷冻精液推广应用提供新的技术支撑。; 张健祁琦周雪原梁永厚董志岷王贵吉日嘎拉李喜和; 关键词：免疫磁珠性控冷冻精液

牛精液死精子去除方法在性控冻精生产中的应用: 2018年; 应用Pure Sperm离心法和上游法去除原精中死精子后用流式细胞仪分离精子,比较2种方法的精子优选结果。结果：Pure Sperm离心法处理原精后死精率降低（24.96%vs 13.45%）,但解冻后活力（0.38 vs 0.31）和存活时间（4.34 h vs 3.59 h）下降;上游法处理原精后死精率（24.96%vs 17.2%）下降,但差异不显著（P〉0.05）,解冻后活力（0.38 vs 0.40）及解冻后存活时间（4.34 h vs 4.5 h）均无显著差异（P〉0.05）;上游法处理的精液,分离效率与原精相比提升17%,但Pure Sperm法处理后精液分离效率与原精相比没有明显效果;上游法处理后与原精相比顶体完整率（61%vs 61%）、线粒体活性（0.43 vs 0.47）、膜完整性（0.22 vs 0.26）均无显著差异（P〉0.05）。相比Pure Sperm法,上游法可降低牛原精中的死精率、有效提升精子分离效率并能保持精子活力、顶体完整性和线粒体活性等生理机能,上游法具有潜在应用前景。; 丁瑞周文忠李喜和; 关键词：上游法精子分离性控冻精

奶牛体细胞核移植胚胎产业化生产条件优化: 2013年; 通过优化高产奶牛体细胞克隆胚胎体外生产技术条件,制备高质量的奶牛克隆胚胎,旨在提高奶牛体细胞核移植产业化应用效率。就受体卵母细胞去核方法、不同年龄供体牛细胞来源、血清饥饿与否以及不同气相组成培养等条件对奶牛体细胞克隆胚胎生产效率的影响进行了研究和探讨。结果表明,虽然荧光染色辅助去核和盲吸法的去核率、囊胚发育率分别为100%、24.83%和92.44%、28.26%,两者之间无显著差异(P>0.05),但盲吸法操作简单、效率高;不同年龄来源供体牛的细胞系构建的克隆胚胎的囊胚发育率分别为31.43%、25.68%,两者之间没有显著差异(P>0.05);经血清饥饿和未饥饿供体细胞重构的克隆胚胎囊胚发育率分别为24%、29.9%,两者之间没有显著差(P>0.05);富氧和低氧气相培养的克隆胚胎的囊胚发育率分别为28.26%、31.55%,两者之间差异不显著(P>0.05),低氧气相组成更有利于囊胚的发育。根据上述结果,奶牛体细胞核移植胚胎(克隆胚胎)的产业化生产条件为:供体细胞无需进行同期饥饿处理,直接注入到盲吸去核后的受体卵子透明带下构建克隆胚胎,融合后的克隆胚胎在密封的混合三气(5%CO2-5%O2-90%N2)的气相组成下进行体外培养,能保持稳定的囊胚发育率。; 孙伟巴特尔郭继彤李荣凤王建国李明胡树香王春生李喜和; 关键词：奶牛体细胞去核核移植

表皮生长因子对牛输卵管上皮细胞生长、增殖和凋亡的影响被引量：6: 2012年; 研究不同浓度的表皮生长因子对牛输卵管上皮细胞生长、增殖和凋亡的影响,目的是建立高质量的牛体外胚胎共培养细胞系。牛输卵管上皮细胞体外培养技术结合血球计数法检测细胞增殖,并利用流式细胞仪进行细胞周期和凋亡的检测,通过Lysis软件对数据进行分析。结果表明,EGF在0～50 ng/mL浓度范围内,其促增殖、抑制凋亡作用随浓度的增加而增大,呈剂量依赖性;当浓度持续增高时,其促增殖、抑制凋亡能力降低;此外,S期细胞数量明显增加,G2-M期细胞数量有下降趋势。表皮生长因子在一定浓度范围内具有促进牛输卵管上皮细胞增殖和抑制其凋亡的作用,并使其细胞周期发生变化。; 孙伟李喜和郭继彤巴特尔杨利国; 关键词：细胞增殖细胞周期

阿拉伯马染色体G带核型分析被引量：7: 2011年; 为了比较阿拉伯马与普通马的差异,利用培养的阿拉伯母马体细胞,制备和分析了其染色体组型。试验采用体外培养的阿拉伯马成纤维细胞,用常规染色体标本制作技术,制备了阿拉伯马染色体G带,并完成了染色体组型配对分析。结果显示阿拉伯马染色体数目为2n=64,包括31对常染色体和1对XX性染色体。其中1~13号染色体为中或亚中着丝粒染色体,14~31号染色体为端着丝粒染色体,X染色体则为第2对大亚中着丝粒染色体。G带核型显示阿拉伯马染色体G带明暗相间,每对染色体都有独特的带纹特征。本研究是首次在国内报道阿拉伯母马染色体G带特征。这将为阿拉伯马细胞遗传学研究和疾病诊断提供资料,也将为认识阿拉伯马与普通马的不同提供细胞水平的依据。; 张静南刘永斌张金吨苏杰李云霞孙伟赵丽霞郭继彤李喜和; 关键词：成纤维细胞染色体核型 G带

李喜和

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