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剑尾鱼肝脏cDNA文库的构建被引量：3: 2009年; 以暴露于β-萘黄酮(beta-Naphthoflavone,β-NF)中的剑尾鱼(Xiphophorus helleri)为研究对象,采用SMARTTM(Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript)技术,成功构建了剑尾鱼肝脏cDNA文库。该文库约含有4.2×107个重组子,重组效率达l00%,插入片段多在0.6～2.5kb之间,平均插入片段长度约1.3kb,扩增后文库滴度为7.0×109CFU/mL。随机挑取200个重组子进行测序检验,共得到长度大于500bp的Expression sequence tag(EST)序列187个,对所测EST序列进行拼接,得到16个重叠群(Contigs),81个单拷贝EST,总计单基因簇97个。结果表明,剑尾鱼肝脏的全长cDNA文库已构建成功,且质量较高,从而为筛选剑尾鱼肝脏的功能基因全长序列奠定了基础。; 刘坡李凯彬王芳刘春聂湘平吴淑勤; 关键词：剑尾鱼肝脏 CDNA文库

剑尾鱼补体基因C3全长cDNA克隆与生物信息学分析: 鱼类补体系统在先天性免疫调解中起重要作用,其中C3是补体系统的关键成分,在病原体的吞噬和细胞溶解中发挥重要作用。本研究利用RT PCR和RACE方法获得剑尾鱼(Xiphophorus helleri)C3基因全长cDNA...; 王芳李凯彬刘坡刘春吴淑勤; 关键词：剑尾鱼补体C3 克隆; 文献传递

β—萘黄酮诱导剑尾鱼肝脏cDNA文库的构建及分析: 当今，水生实验动物开发和研究备受世界各国的重视，预示着水生实验动物科学又进入了一个新的发展阶段。我国标准水生实验动物的开发研究起步较国外晚，经过近十多年的努力，在剑尾鱼、稀有鮈鲫和红鲫的实验动物化研究方面取得了可喜的成绩...; 刘坡; 关键词：剑尾鱼 CDNA文库环境雌激素; 文献传递

剑尾鱼肝脏cDNA文库的构建: 目的:建立β-萘黄酮暴露的剑尾鱼(Xiphophorus helleri)肝脏全长cDNA文库，为相关基因筛选提供可能。方法:剑尾鱼经β-萘黄酮诱导，提取肝脏RNA，采用SMARTTM(Switching M...; 刘坡李凯彬王芳刘春聂湘平吴淑勤; 关键词：剑尾鱼肝脏 CDNA文库基因筛选; 文献传递

鳗鲡迟缓爱德华氏菌偶联疫苗免疫效果评价被引量：1: 2010年; 目的迟缓爱德华氏菌是目前水产养殖中主要的病原菌,其感染谱甚广,危害巨大。因此,研制能有效预防这种致病菌的疫苗,将会极大的促进水产养殖业的发展。方法用OMP-LPS偶联物、OMP、LPS、FKC(福尔马林灭活全菌)以及生理盐水对照组按相同程序分别免疫鳗鲡。通过溶菌酶活性检测、微量凝集反应试验,结果鳗鲡经OMP-LPS偶联物、OMP、LPS以及FKC疫苗免疫后,各免疫组间血清中溶菌酶活性没有显著差异(P>0.05),但均远高于生理盐水对照组(P<0.05);OMP-LPS偶联组抗迟缓爱德华氏菌(E.tarda)E29L株的抗体效价较单纯的LPS组、OMP组,FKC组抗体滴度高,且持续时间长;对迟缓爱德华氏菌(E.tarda)E29L株的攻击,OMP-LPS偶联组保护率为84%,高于单纯OMP组的80%,LPS组的44%和FKC组60%。结论 OMP-LPS偶联物、OMP、LPS、FKC添加佐剂ISA763,各组的溶菌酶活性均显著高于不添加佐剂各组(P<0.05),除了FKC+ISA763佐剂组外,其余各组均与不添加佐剂各组差异极显著(P<0.01),且添加佐剂各组保护率都明显高于不添加佐剂各组,说明添加ISA763佐剂能够更好的启动鱼类的特异性和非特异性免疫。; 潘鸿洧石存斌赵毅刘坡吴淑勤; 关键词：迟缓爱德华氏菌鳗鲡外膜蛋白脂多糖

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刘坡