吴淑勤
- 作品数：359 被引量：1,564H指数：21
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 一株具细胞色素P4501A1基因表达功能的剑尾鱼脑细胞系的建立
- 剑尾鱼对多种环境污染物敏感，是生态毒理学研究较为理想的实验动物，相关细胞系的构建可为其系统应用提供基础。本研究通过胰蛋白酶消化法对剑尾鱼脑组织进行体外培养，经反复传代，获得可稳定传代的脑细胞系。剑尾鱼脑细胞生长状态良好，...
- 王英英李凯彬刘春王庆曾伟伟石存斌吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼脑细胞细胞色素基因表达
- 剑尾鱼脑细胞系的建立
- 建立了剑尾鱼脑细胞系,本文采用胰蛋白酶消化法进行剑尾鱼脑组织体外培养,并通过对培养液配方条件的优化成功地进行了剑尾鱼脑细胞的原代培养和继代培养。结果显示,最适培养液为含有15%胎牛血清（FBS）的DMEM/F12+L-1...
- 王英英李凯彬王庆曾伟伟刘春吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼脑细胞细胞系建立
- 文献传递
- 虾夷扇贝过敏原tropomyosin的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：5
- 2010年
- 从虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆虾夷扇贝中变应原原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增扇贝tropomyosin的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,Western-blot检测其免疫学活性。经序列测定,该基因含有长度为855bp的开放阅读框,编码284个氨基酸,其在GenBank数据库中的登录号为EU839640。SDS-PAGE检测该重组变应原在大肠杆菌中高效表达36kD的目的蛋白,且重组变应原具有良好的IgE结合活性。研究获得了具有变应原活性的重组虾夷扇贝tropomyosin,为扇贝过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 刘志刚邬玉兰吴淑勤石存斌夏皓玉陈丽斐
- 关键词：虾夷扇贝原肌球蛋白表达纯化
- 草鱼呼肠孤病毒HZ08株FQ-PCR检测方法的建立及应用被引量：13
- 2012年
- 草鱼出血病是危害中国淡水养殖最为重要的病害之一,其病原为草鱼呼肠孤病毒(grass carp hemorrhagevirus,GCRV),其中,HZ08株是当前引起草鱼出血病的主要流行毒株。为建立一种快速、灵敏、特异的草鱼呼肠孤病毒主要流行株检测方法,本研究利用草鱼呼肠孤病毒HZ08株S7基因保守区,设计了一对能特异性扩增154 bp片段的引物和TaqMan探针,用含有S7基因全长的重组质粒PAVX1-S7作为标准品,构建质粒拷贝数与CT值的标准曲线,并对该方法的特异性、可重复性、敏感度进行评价。结果显示:标准曲线在6.0×1010～6.0拷贝数之间有很好的线性关系(r=0.999);实时荧光定量PCR最少可检测到6个阳性质粒,有较高的敏感性;试验内及试验间变异系数分别为0.82%与0.41%～0.52%,重复性强;对水生动物其他病毒均无扩增反应,具有很好的特异性。应用该方法对采集的32份草鱼出血病样品进行检测,其中28份为阳性,而以常规RT-PCR检测同样的样品,仅23份为阳性。本研究建立的草鱼呼肠孤病毒流行株实时荧光定量PCR检测方法在特异性、灵敏度、重复性方面具有较好的测试结果,在GCRV的快速检测和病毒初步定量中应用前景乐观。
- 刘宝芹曾伟伟王庆张乐生王英英石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒FQ-PCR
- 应用草鱼吻端成纤维细胞分析海水致病性弧菌胞外产物的毒性
- 2012年
- 采用盐析法提取3株海水鱼类致病性弧菌的胞外产物(ECPs),并应用草鱼吻端成纤维(PSF)细胞分别对ECPs进行细胞毒性分析。结果表明,3种ECPs对PSF细胞都有毒性作用,可引起不同类型的细胞病变,且不同ECPs导致细胞可见病变的浓度不同:副溶血弧菌AnGS020501在0.125μg/mL时可致细胞病变,哈维氏弧菌EcGY020401的致细胞病变浓度为2.0μg/mL,哈维氏弧菌SpGY020601为4.0μg/mL。溶血性和动物毒性研究表明,3种ECPs细胞毒性与溶血性、动物毒性有一定的相关性。PSF细胞可应用于弧菌ECPs的体外毒性评价中。
- 李凯彬郑芳艳胡学峰陈献稿石存斌吴淑勤
- 关键词：胞外产物细胞毒性弧菌
- 硫酸铜中毒对剑尾鱼肝脏和鳃损伤的病理学研究
- 用常规病理组织学、Howell红氨酸染色、原子吸收光谱检测等方法，对硫酸铜处理28d的剑尾鱼进行组织病理学变化、铜离子在组织中沉积和蓄积研究。硫酸铜中毒的主要病理变化为：鳃小片粘液分泌增多，鳃丝上皮细胞肿胀、变性、坏死、...
- 常藕琴石存斌潘厚军吴淑勤
- 关键词：剑尾鱼硫酸铜中毒组织病理学原子吸收光谱
- 文献传递
- DDT、苯并[a]芘暴露对阿部鲻虾虎鱼P糖蛋白mRNA表达的影响被引量：3
- 2012年
- 建立了阿部鲻虾虎鱼(Mugilogobius abei)P糖蛋白(P-gp)mRNA荧光定量RT-PCR检测方法,利用该检测方法探讨不同时间、不同浓度DDT和苯并[a]芘(BaP)暴露对阿部鲻虾虎鱼P-gp基因表达的影响。结果显示,该检测方法能在低质量浓度污染物(0.01 mg·L-1DDT、0.005 mg·L-1BaP)暴露下检测到P-gp基因表达量的显著变化(P<0.05)。P-gp基因在正常阿部鲻虾虎鱼肌肉、肝脏、心脏、肠、脑组织中均有表达,在鳃、脾组织中没有检测到表达,DDT和BaP能诱导肝脏和脑中P-gp基因表达量升高。2种污染物暴露5 h均可诱导肝脏表达量的显著变化,随着暴露时间延长,表达量均升高,24 h达到较高表达量。低质量浓度DDT和BaP均能诱导肝脏P-gp基因表达,并呈现良好的剂量-效应关系,而高质量浓度均抑制P-gp的表达。DDT和BaP可影响阿部鲻虾虎鱼肝脏P-gp基因表达,其变化可作为生物标志物,来评价化学污染物对水生动物的生物学效应。
- 刘春李凯彬王庆王芳常藕琴梁慧丽吴淑勤
- 关键词：DDT苯并[A]芘P糖蛋白
- 剑尾鱼不同组织中乳酸脱氢酶同工酶测定被引量：3
- 1994年
- 剑尾鱼不同组织中乳酸脱氢酶同工酶测定黄志斌，吴淑勤，石存斌珠江水产研究所５１０８３０鱼类实验动物已被广泛用于胚胎学、遗传学、内分泌学、毒理学、行为科学、比较病理学、环境保护学等实验研究领域，尤其是在肿瘤和环境可疑致癌物探索等研究中，独具有一些无可取代...
- 黄志斌吴淑勤石存斌
- 关键词：剑尾鱼乳酸脱氢酶同功酶
- 草鱼肠道中香港海鸥型菌的选择性分离与鉴定被引量：16
- 2005年
- 从广东省某市池塘采集商品规格(体重2 0～2 5kg)的草鱼(Ctenoharyngodonidellus),利用加有头孢哌酮的麦康凯琼脂培养基,对其肠道中细菌进行选择性分离与鉴定。结果显示,12尾草鱼的肠道中,5尾可分离到具有以下特征的细菌:两端生鞭毛,菌体弯曲似海鸥状,革兰氏染色阴性,过氧化氢酶、氧化酶、尿酶和精氨酸双水解酶阳性,还原硝酸盐,不发酵、氧化或同化葡萄糖、甘露醇等15种常见的糖醇类,细菌形态、生化特性与报道的香港海鸥型菌相似,阳性率为41 7%。但在肌肉中未分离到此菌。进行分离细菌的16SrRNA基因序列分析,与GenBank中登录的4株香港海鸥型菌序列的同源性为99 7%～99 9%。由菌的培养特征、形态特点、理化特性、16SrRNA基因序列分析等多元鉴定的结果表明,从草鱼肠道中选择分离的细菌为香港海鸥型菌。药敏实验结果表明,所分离菌株对奥格门丁和亚胺培南的敏感性与报道的香港海鸥型菌有一定区别。
- 潘厚军吴淑勤李宁求石存斌李凯彬巩华陶家发常藕琴
- 关键词：草鱼
- 剑尾鱼不同组织中同工酶的研究
- 黄志斌吴淑勤石存彬潘厚军
- 关键词：剑尾鱼同工酶
