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用高度保守区引物和套式PCR扩增丙型肝炎病毒被引量：1: 1993年; 采用套式聚合酶链反应(PCR)方法,以具有高度保守性的丙型肝炎病毒(HCV)RNA 5′端非编码区引物对,扩增10例输血后肝炎血清,8例(80％)阳性。并将逆转录与第一轮PCR结合连续进行,使操作简便有效。间接证明了HCV上海株与世界若干地区HCV株5′端非编码区核酸序列具有高度同源性和保守性。; 任少堂秦一中汪伟业张国兆陈蕊雯; 关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应

不明原因血清ALT升高129例病原学分析: 1997年; 不明原因血清ＡＬＴ升高１２９例病原学分析任少堂贾建龙△秦一中汪伟业迄今为止已明确有５型肝炎病毒，最近庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）已有报道［１］。临床上仍存在较多的丙氨酸转移酶（ＡＬＴ）升高并伴有不同程度的肝炎临床表现的肝病患者，经测其已知的各型肝炎病毒指标...; 任少堂贾建龙秦一中汪伟业; 关键词：病毒性肝炎丙氨酸转移酶病原学

聚合酶链反应检测O1群霍乱弧菌肠毒素A亚单位基因被引量：5: 1996年; 为了加强对霍乱的防治，探索对霍乱弧菌的快速和敏感的检测方法，建立了一种快速标本处理和聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增Ｏ１群霍乱弧菌肠毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因区的诊断方法。结果表明：在对一组经常规培养、生化鉴定法诊断为霍乱的２６份腹泻患者粪便标本检测后，ＰＣＲ法有２４株检测到ｃｔｘＡ基因，培养阳性而ＰＣＲ阴性的２株为非Ｏ１群菌株。虽然现有的Ｏ１群血清学诊断方法无法检测新血清型Ｏ１３９，但研究表明Ｏ１３９与Ｏ１群霍乱弧菌肠毒素基因的核苷酸序列相同，本文引物序列也能扩增Ｏ１３９。结果提示：本方法具有简便、快速、特异和不需培养等特点，宜于临床应用。; 任少堂秦一中张晓琴林代文晏碧君汪伟业; 关键词：霍乱弧菌肠毒素聚合酶链反应

不明原因ALT升高与新型肝炎病毒关系的初步探讨被引量：7: 1997年; 不明原因ＡＬＴ升高与新型肝炎病毒关系的初步探讨任少堂贾建龙秦一中汪伟业作者单位：２００４３３上海第二军医科大学长海医院（任少堂秦一中汪伟业）；海军３１３医院（贾建龙）１９９７年１月３日收稿６月１９日修回虽然目前已经发现了５型肝炎病毒，最近又报道了庚型...; 任少堂贾建龙秦一中秦一中; 关键词：ALT 新型肝炎病毒病原学

血液、腹膜透析患者各型肝炎病毒感染的血清学调查被引量：2: 1992年; 我院子1990年11月至1992年5月对血透及腹透患者作了甲、乙、丙、丁型肝炎病毒感染的血清学监测,每隔半年监测1次,连续监测3次,结果中提供了一些透析病人对这类病毒感染的信息;本文并就各型肝炎病毒的感染率及本调查研究的特点进行了讨论。; 崔若兰张国兆杨京平杨小燕任少堂刘喜泰汪伟业金仁修; 关键词：血液透析血清学调查病毒性肝炎

聚合酶链反应同时检测五种腹泻致病菌的初步研究被引量：6: 1997年; 目的探索一种快速、经济、敏感的诊断方法，对常见的腹泻致病菌进行基因检测研究。方法建立一种快速标本处理和多重聚合酶链反应（ｍｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲ）诊断方法，在一次ＰＣＲ反应中同时扩增５种菌的致病基因：志贺菌及侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒（ｉａｌ）基因、副溶血性弧菌的热稳定直接溶血素（ｔｄｈ）基因、Ｏ１群霍乱弧菌的霍乱毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因和产不耐热肠毒素大肠埃希菌的不耐热肠毒素Ｂ亚单位（ＬＴ－Ｂ）基因。扩增产物经电泳，出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的条带即判断为该标本阳性。结果对一组常规培养生化鉴定法诊断为霍乱的２６份腹泻患者标本检测后，ＰＣＲ法有２４份检测到ｃｔｘＡ基因，ＰＣＲ阴性的２份为非Ｏ１群；另一组５６份粪标本分别检测到了ｉａｌ、ｔｄｈ、ＬＴ－Ｂ基因，ＰＣＲ法较培养法阳性率高。结论该方法具有简便、快速、特异、经济和不需培养等特点，适于临床应用。; 任少堂秦一中张晓琴凌代文凌代文汪伟业俞守义; 关键词：腹泻聚合酶链反应致病菌病原菌

用多重及套式PCR同时检测血清中的HBV和HCV方法的建立被引量：2: 1994年; 首次应用多重及套式ＰＣＲ技术同时检测人血清中的ＨＢＶ和ＨＣＶ。将抽提的ＨＢＶＤＮＡ和（或）ＨＣＶＲＮＡ在含ＡＭＶ逆转录酶、ＴａｑＤＮＡ多聚酶以及ＨＢＶ和ＨＣＶ外套引物的ＰＣＲ缓冲液中进行逆转录后连续进行ＰＣＲ扩增，以第一轮扩增产物为模板，在含ＨＢＶ和ＨＣＶ内套引物的ＰＣＲ反应体系中进行第二轮扩增，产物经电泳后，以ＤＮＡ分子量标志物或巳知片段做参考，出现５２３ｂｐ和（或）２６０ｂｐ产物条带分别为ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ单项或重叠感染。因选择高度保守的ＨＢＶ和ＨＣＶ引物，并进行了包括将逆转录与第一轮ＰＣＲ结合进行等多项改进，故本方法具有特异、敏感、通用、简便、快速和经济等优点，减少了交叉污染的机会，有很高的临床实用价值，亦为献血员筛选提供一种可靠的方法。; 任少堂秦一中汪伟业; 关键词：套式肝炎病毒

聚合酶链反应检测粪便中的副溶血性弧菌的TDH基因被引量：2: 1997年; 副溶血性弧菌是细菌性腹泻的主要致病因子．本研究建立一种快速标本处理和聚合酶链反应（PCR）诊断方法，扩增副溶血性弧菌的热稳定直接溶血素（TDH）基因。对一组56例腹泻患者粪便标本进行了检测，经细菌培养证实为副溶血性弧菌的9份标本，PCR法均阳性；培养法明性的39例中，有7例检测到TDH基因．统计学表明两种方法检测结果相当一致，但检出能力PCR法显著高于培养法。本法简便、快速、特异，适宜临床应用．; 任少堂刘军民秦一中汪伟业俞守义; 关键词：副溶血性弧菌聚合酶链反应

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA被引量：17: 1994年; 利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。; 任少堂秦一中汪伟业崔若兰张国兆李保春郭嘉吴丹; 关键词：聚合酶链反应肝炎病毒

多重PCR同时检测粪便中的志贺菌、侵袭性大肠埃希菌和O－1群霍乱弧菌的致病基因被引量：3: 1996年; 本研究建立一种快速标本处理和多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法，在一次ＰＣＲ反应中同时扩增志贺菌、侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒（ｉａｌ）基因和Ｏ－１群霍乱弧菌的霍乱毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因。扩增产物经电泳，出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的条带即判断为该标本阳性。对一组经常规培养生化鉴定法诊断为霍乱的２６份腹泻病人粪便标本检测后，ＰＣＲ法有２４例检测到ｃｔｘＡ基因，ＰＣＲ阴性的２例为非Ｏ－１群；对另一组５６例粪标本亦进行了检测。本方法具有简便、快速、特异、经济和不须培养等特点，宜于临床应用。; 任少堂秦一中凌代文晏碧君汪伟业汪伟业; 关键词：聚合酶链反应

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