鲍锴
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金The Royal Society更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生生物学更多>>
- 一个巨大的抗真菌抗生素基因簇及其与植物生物技术的潜在关系被引量：2
- 1996年
- 从链霉菌ＦＲ－００８中克隆出一个七烯大环内酯抗生素的生物合成基因簇，基因置换试验证实克隆的基因片段与抗生素生物合成直接相关。ＦＲ－００８抗生素含有一个３８员由聚酮所衍生的内酯大环，由编码红霉素聚酮合酶的活性域基因片段为探针所进行的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交试验证明，链霉菌ＦＲ－００８的聚酮合酶（ＰＫＳ）的基因簇占据１０５ｋｂ连续和具有重复功能单元（模块）的序列；假设每个ＰＫＳ模块为５ｋｂ，这与ＦＲ－００８碳链形成需要２１个缩合过程的预期数值极其吻合。链霉菌ＦＲ－００８的基因克隆系统（包括转化、转座、从大肠杆菌向链霉菌的属间接合转移、基因置换和基因中断体系和限制性缺陷菌株）均已得到发展，使我们能够充分利用基因工程技术来操纵七烯大环内酯的生物合成并产生新的抗生素衍生物。同时利用该基因簇中的部分ＰＫＳ基因序列构建了一个可用于转化植物的质粒ｐＨＺ３２１，为尝试在水稻等植物中表达链霉菌Ⅰ型ＰＫＳ基因以探索高Ｇ十Ｃ（７６％）含量的链霉菌ＰＫＳ基因能否在植物中表达提供了材料和工具。用此质粒来转化植物的研究，将为进一步利用这个巨大的抗真菌抗生素基因簇进行植物抗真菌的基因工程育种提供理论依据。
- 胡志浩陶美凤鲍锴周秀芬周启邓子新
- 关键词：链霉菌基因簇
- 一个诱动接合性柯斯载体的构建及其应用
- 1998年
- 用pHZ132在大肠杆菌中构建基因文库,并用特异的探针进行菌落杂交获得了有意义的DNA片段,可将其衍生质粒转化到携带接合性大肠杆菌质粒如RP4的细胞中.通过与萌发后的链霉菌孢子进行两亲本杂交,或将携带pHZ132的大肠杆菌细胞和携带RP4衍生质粒pPK2073的大肠杆菌细胞与萌发后的链霉菌孢子混合起来进行三亲本杂交,在接合性质粒RP4转移功能的诱动下,携带插入片段的PHZ132衍生质粒即可转移到萌发后的链霉菌孢子中去.已尝试用此载体成功地构建了一个重要的抗真菌抗生素产生菌——链霉菌FR-008的基因文库,并通过接合转移的方法将pHZ132衍生质粒转移到FR-008及其限制性缺陷菌株DX600中,并进行了DNA片段的功能分析.
- 鲍锴胡志浩周秀芬周启邓子新
- 关键词：链霉菌基因文库
- 一个可在大肠杆菌和链霉菌之间进行属间接合转移的柯斯质粒被引量：8
- 1995年
- 利用柯斯质粒载体在大肠杆菌中克隆和分析链霉菌基因簇的方法和技术已有很大发展,已构建了不少链霉菌-大肠杆菌双功能柯斯载体.利用这种载体固然可以把链霉菌的基因文库构建在大肠杆菌中并可方便地进行克隆片段的结构分析,但要通过转化把克隆的大片段DNA 转回到链霉菌中来进行功能分析常常遇到不少障碍,最近发展起来的质粒在大肠杆菌和链霉菌之间进行属间接合转移的方法,则解决了外源DNA导入许多链霉菌菌种的疑难问题。
- 鲍锴胡志浩周秀芬周启邓子新
- 关键词：大肠杆菌链霉菌
