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牛肾原代细胞培养最适接种浓度的选择被引量：5: 2009年; 为了提高口服轮状病毒活疫苗（LLR株）生产用原代牛肾细胞的产量和质量,对不同接种浓度培养的原代牛肾细胞的生长情况进行研究。将牛肾细胞按5×10^4、10×10^4、15×10^4、20×10^4、25×10^4、30×10^4个细胞/cm26个不同浓度接种到细胞培养瓶中,37℃培养,观察细胞生长情况并记录形成良好单层的时间。结果显示,接种浓度为20-30×10^4个细胞/c？的原代牛肾细胞培养8-9d时就能形成良好单层;而接种浓度小于20×10^4个细胞/cm2时,需11-12d才能形成良好单层或不能形成单层。说明在大批量培养原代牛肾细胞时,选择细胞接种浓度20-30×10^4个细胞/cm^2比较适宜。; 刘学平沈劲草魏至栋庞兴谢澎石庆华; 关键词：接种浓度

不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究被引量：14: 2007年; 口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞.原始的初代细胞(P0)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞.将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96～112瓶,细胞核型检查传至P5代的细胞染色体数目与初代细胞一致.细胞培养物均一性提高.P0代与P2代细胞病毒培养物滴度分别在6.2±1.5和6.5±0.51gCCID50/ml,使用P2代细胞培养病毒,产量增加10～15倍.提高了疫苗生产的可控性和质量,生产规模显著放大,经济效益明显.; 鱼轲魏至栋庞兴刘晓凡刘溯谢澎王玉琳; 关键词：传代培养轮状病毒疫苗

双抗体夹心ELISA法检测狂犬病疫苗抗原活性组分被引量：6: 1999年; 采用多克隆双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法快速检测狂犬病毒抗原含量。结果表明，灵敏度达到１５μｇ／ｍｌ，同时特异性及变异系数均合乎要求。本方法用于精制狂苗制备过程中有效抗原活性组分的检测准确、快速、重复性好，且抗原的ＥＬＩＳＡ效价与ＮＩＨ动物法测定效价具有平行趋势。; 王玉琳封多佳吕宏亮李薇马超魏至栋; 关键词：双抗体夹心 ELISA 狂犬病毒抗原疫苗

麻疹减毒活疫苗沪_(191)株主种子批毒种安全性和免疫原性观察: 2009年; 目的评价新制备的麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)沪191株主种子批毒种原疫苗的安全性和免疫原性。方法根据入选和排除标准,选择8～10月龄无麻疹病史、MV接种史和疫苗接种禁忌证的健康儿童,接种用沪191株主种子批毒种制备的MV0.5ml,于接种后30min、6h、24h、48h、72h、7d、14d、21d、28d观察局部和全身反应;并采集免疫前和免疫后28d血清,采用红血球凝集抑制(Hemagglutination Inhibition,HI)试验检测麻疹病毒抗体阳转率和几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)。结果受种者未见严重不良反应,免疫后28d血清中麻疹病毒HI抗体阳转率为100%,麻疹病毒抗体GMT为1:50.66。结论新制备的MV沪191株主种子批毒种疫苗,在适龄儿童中具有良好的安全性和免疫原性。; 张淑君肖奇友李放军魏至栋刘溯张祺邓注红黄乐傅汝林方捍华; 关键词：麻疹减毒活疫苗安全性免疫原性

风疹病毒E1蛋白与受体结合特定结合域的预测被引量：1: 2014年; 目的同源模建E1蛋白及其受体髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG）的三维结构,应用分子对接的方法预测E1蛋白与其受体MOG的候选结合氨基酸残基。方法采用MODELLER程序预测E1蛋白及其受体MOG的三维结构,并应用CASTp server进行活性口袋的预测;采用ProtScale进行疏水性分析,应用基于隐马尔可夫模型（HMM）算法的SMART程序搜索蛋白序列的motif;采用PyMOL-APBS软件设计E1蛋白及其受体MOG分子的腔介质结构,分析其表观静电势,应用PLATINUM程序进行分子对接,寻找其结合位点。结果E1蛋白由3个结构Ⅱ组成,其中D1、D3处于结构的底部,形成一个大的口袋,C-末端与D2的一侧形成另一个大的口袋,其余口袋主要集中在D2上半部的融合面中;MOG的结构模型为8个反平行的β折叠组成的一个β折叠桶,预测结构的主链构象的所有氨基酸均处于允许区。在MOG N-末端1～17位的氨基酸残基形成一个moti（flow complexityregion）,46～127位的氨基酸残基形成了一个motif V型免疫球蛋白样结构Ⅱ（Immunoglobulin V-Type,IGv）;lowcomplexity region段氨基酸残基表现为强疏水性。MOG N-末端的5个残基基序及ARG101～GLU107构成的β转角共同形成一个突起的结构,插入到E1蛋白的活性口袋中,与口袋中的ALA86、TYR90、TYR101、PHE102、ASN103、GLY105、SER107、TYR109、ALA122、PHE123、HIS125、SER126相互结合。结论应用计算机模拟技术预测了E1蛋白与其受体MOG结合的特定结合Ⅱ,为今后进一步研究其相互作用奠定了基础。; 邢家强刘晓凡窦强林杰魏至栋; 关键词：风疹病毒同源模建分子对接

轮状病毒LLR株在两种不同细胞中病毒滴度的比较被引量：2: 2013年; 目的:通过轮状病毒LLR株在牛肾细胞和Vero细胞中培养效果的比较,为轮状疫苗的生产筛选最佳的细胞基质和培养条件。方法:将轮状病毒LLR株按MOI 0.02分别接种牛肾细胞和Vero细胞,在相同培养条件下进行培养,每天观察两种细胞病变的情况,同时抽样检测病毒滴度,分析两种细胞对轮状病毒LLR株的敏感性。结果:牛肾细胞在感染轮状病毒LLR株后d 3病毒滴度达到最高,为6.8 lgCCID50.mL-1;而Vero细胞在感染轮状病毒LLR株后d 8病毒滴度达到最高,为7.3 lgCCID50.mL-1。轮状病毒LLR株在牛肾细胞和Vero细胞上均能达到满意的病毒表达量。结论:轮状病毒LLR株在Vero细胞中培养能够达到理想的病毒表达量,利用Vero细胞培养轮状病毒LLR株,有利于提高疫苗的产量和质量。; 林杰窦强刘溯魏至栋; 关键词：VERO细胞病毒滴度

麻疹病毒S191疫苗株N基因稳定性研究及免疫细胞表位分析被引量：3: 2008年; 研究麻疹病毒（Measles virus，MeV）疫苗株S191毒种和传代病毒核蛋白（Nucleoprotein，N）基因稳定性及其遗传与变异特点；对该序列一些重要位点的氨基酸进行比较，探讨其功能结构及生物学活性变化以及S191疫苗株的保护效果。利用RT-PCR方法扩增S191减毒株23、26、27、29、32、37不同代次N基因，测序进行比对分析。S191传代病毒N基因序列之间核苷酸同源性99．7％-100％，氨基酸同源性为99．6％-100％；S191株与7个疫苗株之间核苷酸序列同源性达99．1％-99．4％；S191和中国流行代表株序列同源性在95．0％～95．4％；S191与世界流行代表株同源性达94．7％-99．4％；S191疫苗株和中国流行代表株CHN93／7（Hla）的4个重要T细胞表位氨基酸保持一致。S191各传代病毒基因具有较高稳定性，该疫苗有一定的保护作用。; 冯德杰高雪军赵雅静刘晨鸣魏至栋朱莉萍; 关键词：麻疹病毒 N基因免疫效果

精制狂犬病疫苗纯化方法的比较研究被引量：1: 1999年; 地鼠肾细胞狂犬病疫苗原液经１００ｋＤ膜浓缩３０倍，分别选用（１）ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ离子交换层析法；（２）Ｓｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－２００ＨＲ分子筛选层析法；（３）二次蔗糖等密度区带离心法对其进行纯化。用此三种方法各试制３批精制疫苗，结果表明，经ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ离子交换层析纯化后疫苗总蛋白含量减少９９％以上，抗原比活性提高１５９倍，抗原回收率达５０％，纯化疫苗以ＮＩＨ法效力测定平均为５．４ＩＵ／２ｍｌ；经Ｓｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－２００ＨＲ分子筛层析纯化后疫苗总蛋白含量减少９８％以上，抗原比活性提高４１倍，抗原回收率达６３％，纯化疫苗效力平均为６．２５ＩＵ／２ｍｌ；经一次蔗糖等密度区带离心法纯化后疫苗总蛋白含量减少９８％以上，抗原比活性提高３２１倍，抗原回收率达４３％，纯化疫苗效力平均为６．１８ＩＵ／２ｍｌ，三种纯化疫苗均符合ＷＨＯ规程要求。; 王玉琳吕宏亮李薇魏至栋邹勇梁勇安静; 关键词：精制狂犬病疫苗纯化

地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗临床研究观察被引量：3: 2004年; 了解地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗接种安全性及有效性。分别以 1.0ml及 0 .5ml的剂量 ,按暴露后及暴露前免疫程序给 313人接种 ,用小鼠中和试验法检测血清中和抗体效价。结果显示 :临床副反应轻微 ,副反应率为0 .89%～ 15 % ;免疫全量疫苗和半量疫苗的人群均获保护力 ,抗体阳转率为 10 0 % ,免后抗体GMT滴度分别为35 .2IU/ml(n =32 )和 31.4IU/ml(n =37) ,经检验两组无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;免疫全量疫苗和半量疫苗两组的免疫前、后相比 ,经检验有显著性差异 (P <0 .0 5 ) 。; 李薇刘增顺王玉琳邹勇刘景华曲小素董关木魏至栋安静马超郑学刚; 关键词：地鼠肾细胞狂犬病纯化疫苗中和抗体

F型肉毒梭菌培养液可滤性实验的初步研究被引量：1: 2012年; 目的通过探索F型肉毒梭菌培养液可滤性实验,为现有生产工艺提供科学的优化方案。方法分别采用不同型号的过滤器,通过不同的过滤组合对F型肉毒梭菌培养液进行澄清过滤。结果采用K700P过滤器(过滤精度6.0～15.0μm)对F型肉毒梭菌培养液进行一级澄清过滤,采用50P过滤器(过滤精度0.5～0.85μm)对料液进行二级澄清过滤,对F型肉毒梭菌培养液具有良好的澄清效果。结论可滤性实验的探索对于F型肉毒梭菌培养液批生产量的扩大具有切实可行的指导意义。; 窦强魏至栋谢澎高建军李育合

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魏至栋

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