庞兴
- 作品数:10 被引量:47H指数:4
- 供职机构:兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 牛肾原代细胞培养最适接种浓度的选择被引量:5
- 2009年
- 为了提高口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用原代牛肾细胞的产量和质量,对不同接种浓度培养的原代牛肾细胞的生长情况进行研究。将牛肾细胞按5×10^4、10×10^4、15×10^4、20×10^4、25×10^4、30×10^4个细胞/cm26个不同浓度接种到细胞培养瓶中,37℃培养,观察细胞生长情况并记录形成良好单层的时间。结果显示,接种浓度为20-30×10^4个细胞/c?的原代牛肾细胞培养8-9d时就能形成良好单层;而接种浓度小于20×10^4个细胞/cm2时,需11-12d才能形成良好单层或不能形成单层。说明在大批量培养原代牛肾细胞时,选择细胞接种浓度20-30×10^4个细胞/cm^2比较适宜。
- 刘学平沈劲草魏至栋庞兴谢澎石庆华
- 关键词:接种浓度
- 不同代次牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究被引量:14
- 2007年
- 口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞.原始的初代细胞(P0)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞.将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96~112瓶,细胞核型检查传至P5代的细胞染色体数目与初代细胞一致.细胞培养物均一性提高.P0代与P2代细胞病毒培养物滴度分别在6.2±1.5和6.5±0.51gCCID50/ml,使用P2代细胞培养病毒,产量增加10~15倍.提高了疫苗生产的可控性和质量,生产规模显著放大,经济效益明显.
- 鱼轲魏至栋庞兴刘晓凡刘溯谢澎王玉琳
- 关键词:传代培养轮状病毒疫苗
- 细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗的应用研究被引量:4
- 2011年
- 为了确定用细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗的工艺参数和质控点,将原代牛肾细胞按20×104个/cm2接种到细胞工厂培养,待形成良好单层后按4×104个/cm2连续传代2次后接种轮状病毒,并与转瓶作对照。结果显示,用细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗与转瓶培养无差异,细胞工厂可用于改进口服轮状病毒活疫苗的生产。
- 刘学平魏至栋谢澎庞兴任雅萍
- 关键词:细胞工厂轮状病毒疫苗
- LLR株口服轮状病毒活疫苗在制品稳定性观察被引量:4
- 2009年
- 对LLR株口服轮状病毒活疫苗生产中各阶段产物(在制品)放置于-20℃、2~8℃,进行稳定性观察,用细胞微量病变滴定法(CCID50)结合酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其病毒感染滴度。结果显示,LLR株口服轮状病毒活疫苗单一收获物-20℃放置18个月,病毒滴度不低于5.50logCCID50/ml,原液-20℃放置18个月,病毒滴度不低于5.50logCCID50/ml。2~8℃存放49d,疫苗原液的病毒滴度不低于5.75logCCID50/ml,疫苗半成品病毒滴度不低于5.50logCCID50/ml。结果表明,LLR株口服轮状病毒活疫苗生产各阶段产物在-20℃及2~8℃存放,其稳定性良好。
- 窦强谢澎庞兴吕雯楣魏至栋
- 关键词:轮状病毒疫苗病毒滴度稳定性
- 牛肾组织及其培养物的不同消化法效果评价被引量:4
- 2010年
- 为了比较不同消化液及消化方式对牛肾皮质组织和培养后形成单层细胞的消化分散效果并确定最适消化液和消化方式,分别用0.25%胰蛋白酶和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA两种消化液,消化牛肾皮质组织及其培养形成的单层牛肾皮质细胞。牛肾皮质组织采用热(37℃)和冷(4℃)两种消化方式;经培养形成单层的牛肾皮质细胞采用室温(25℃)消化。结果显示,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液热消化牛肾组织时,分散获得牛肾皮质细胞的活细胞数、存活率、贴壁率均优于其他消化方法,差异显著(P<0.05)。培养形成的单层牛肾皮质细胞用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液的消化速度明显快于用单一0.25%胰蛋白酶消化液的消化速度,统计学分析显示具有显著性差异(P<0.01),两种消化液消化所得细胞的存活率及贴壁率前者要更高,差异显著(P<0.05)。
- 刘学平魏至栋沈劲草马彦强庞兴谢澎
- 关键词:消化液
- 三种气性坏疽混合类毒素对马的免疫试验
- 1995年
- 三种气性坏疽混合类毒素对马的免疫试验刘哈霆,魏永嘉,张发臣,徐培德,李援,柳建平,杜生华,马晓玲,孟在琛,庞兴(卫生部兰州生物制品研究所730046)我国生产的多价混合气性坏疽抗毒素是将各免疫血浆经精制加工后按一定比例混合而成的。马匹免疫血浆若能同时...
- 刘哈霆魏永嘉张发臣徐培德李援柳建平杜生华马晓玲孟在琛庞兴
- 关键词:免疫疫苗
- 牛肾细胞基质牛源病毒的控制和检测被引量:4
- 2012年
- 目的:检测和控制牛肾细胞基质中可能存在的外源病毒,提高细胞基质的安全性,保证轮状病毒疫苗的质量。方法:用ELISA法检测牛肾供体新生小牛血清中的病毒抗体。用细胞培养法检测供体血清和牛肾细胞中的外源病毒,免疫荧光抗体法检测供体血清和牛肾细胞中的特殊牛源病毒。结果:81份禁食禁水的新生小牛血样7种病原抗体检测均为阴性;血吸附病毒检测均为阴性,直接免疫荧光检出1例BVDV阳性。65份牛肾细胞特殊牛源病毒检测均为阴性。结论:通过对牛肾供体小牛进行病原筛选可有效降低牛肾细胞携带外源病毒的风险,也是提高疫苗安全性行之有效的策略。
- 魏至栋鱼轲刘艳郭敏谢澎庞兴
- 关键词:外源病毒
- 口服轮状病毒活疫苗罗特威研究进展被引量:19
- 2012年
- 轮状病毒是引起婴幼儿重症腹泻的最主要病原体,是全球范围内导致婴幼儿发病和死亡的主要病因之一。我国5岁以下婴幼儿轮状病毒腹泻发病人数每年超过1 000万,每年导致大约3~4万名婴幼儿死亡。接种安全有效的疫苗是预防轮状病毒腹泻的主要手段。口服轮状病毒活疫苗罗特威于2001年获准上市,累计接种已超过3 000万剂,安全有效,可有效降低轮状病毒腹泻的发病率。
- 谢澎李青庞兴付敏强魏至栋
- 关键词:轮状病毒腹泻轮状病毒疫苗安全性有效性
- 不同代次的牛肾原代细胞培养轮状病毒的比较研究
- 口服轮状病毒活疫苗(LLR株)生产用细胞基质为新生小牛肾原代细胞。原始的初代细胞(PD)产量小,一对牛肾平均生产7瓶细胞。将原始的初代细胞传代可使细胞产量显著增加,两次传代后(P2代)细胞产量可由7瓶增加为96~112瓶...
- 鱼轲魏至栋庞兴吕雯楣刘溯谢澎王玉琳
- 关键词:传代培养轮状病毒疫苗生物制品
- 文献传递
- 影响轮状病毒半数细胞感染剂量法滴定的因素分析被引量:1
- 2012年
- 目的:确定影响轮状病毒感染增殖过程的因素,以提高滴度检测结果的重复性和可靠性。方法:采用半数细胞感染剂量法(CCID50)结合ELISA(CCID50-ELISA)判断病毒在细胞上有无复制来检测病毒滴度。结果:不同细胞代次、接种浓度、培养时间、培养液种类和接种细胞孔数均会对病毒滴定结果造成显著影响。结论:轮状病毒滴度检测的线性和准确性与细胞状态与培养环境相关。CCID50-ELISA法检测轮状病毒滴度有良好的重复性和耐用性。
- 鱼轲魏至栋郭敏刘艳谢澎庞兴崔焰
- 关键词:轮状病毒滴度